新疆芹菜根提取物及其主要成分对肝细胞脂质堆积的影响及机制研究

发布时间：2020-05-20 04:36

【摘要】：目的:研究新疆芹菜(Apium graveolens L.)根提取物及其主要成分对L02细胞和HepG2细胞体外脂肪堆积模型脂质代谢的影响及作用机制。方法:1、采用游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)诱导L02和HepG2细胞建立体外脂肪堆积模型;通过用油红O染色及测定生化参数验证模型是否成功;采用CCK-8试剂盒测定药物对细胞的毒性,并筛选药物安全范围内的高、中、低浓度。2、本实验设定空白(Con)组、模型(FFA)组、菲诺贝特(FF)组,芹菜素(AGN)组、芹菜苷(AIN)组、芹菜根提取物(AGRE)组。通过酶联免疫吸附法(Elisa)测定脂肪因子和炎症因子的含量;qRT-PCR技术检测ADPN mRNA、AMPK mRNA及SREBP-1c mRNA基因的表达;Western-blot技术检测P-AMPKα、P-ACC、ACC和SREBP-1_C蛋白的表达。结果:1、成功建立L02细胞和HepG2细胞体外脂肪堆积模型。AGN,AIN,3?-甲氧基芹菜苷(3?-MI)及AGRE对L02细胞影响的IC_(50)依次是49.90、541.94、224.36、896.00μg/mL;HepG2细胞的IC_(50)依次是64.52、430.23、302.68、961.00μg/mL。AGN,AIN和AGRE能有效降低细胞内TG、TC的含量(P0.05)。2、与模型组相比,AGRE、FF、AGN及AIN均明显降低IL-6和TNF-α的含量(P0.05),FF组中脂联素(adiponectin,ADPN)分泌蛋白的表达明显增加。AGN组、AIN组及AGRE组呈剂量依赖性的增加ADPN mRNA和AMPK mRNA的表达,降低SREBP-1c mRNA的表达。此外,也明显增加P-AMPKα及P-ACC蛋白的表达,减少SREBP-1_C和ACC蛋白的表达。结论:新疆芹菜根提取物具有可靠的调脂作用,可能通过调节脂质代谢中AMPK/SREBP-1c信号通路。本研究可为开发防治非酒精性脂肪肝病(non-alcohol fatty liver disease,NAFLD)等脂质代谢紊乱相关疾病的药物提供实验依据。
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285

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