制黄精水煎剂对造血功能抑制小鼠造血系统的影响及机制探讨

发布时间：2020-05-20 13:21

【摘要】：目的:探讨制黄精水煎剂对化疗后造血功能抑制致“血虚、虚劳”机体造血系统的影响及作用机制,明确黄精“补诸虚,填精髓”作用的生物学实质及传统滋补肾精中药在临床治疗肿瘤、血液疾病中的潜在应用价值。方法:本研究采用腹腔注射环磷酰胺导致小鼠造血功能抑制,并用不同浓度的制黄精水煎剂灌胃,采用血细胞计数测量外周血细胞数量;采用脏器称重方法测量胸腺、脾脏指数;采用MTT法、细胞培养、祖细胞集落分析方法检测骨髓细胞增殖能力、基质细胞对正常骨髓细胞的粘附能力、不同祖细胞集落的产率;采用实时荧光定量PCR,检测实验小鼠肾脏的红细胞生成素及脾脏红细胞生成素受体的m RNA表达量。结果:本研究发现1、制黄精水煎剂低、中、高剂量组均可升高环磷酰胺致造血功能抑制小鼠的红细胞、血红蛋白、血小板和白细胞的值,且呈剂量依赖关系;其中红细胞、血红蛋白、血小板在用药第7天就开始升高,而白细胞在用药第14天开始升高。2、制黄精水煎剂各剂量组在用药第7天,小鼠胸腺指数、脾脏指数均呈上升趋势,同时中、高剂量组脾脏指数还显著高于低剂量组;在10、14天时,高剂量组脏器指数仍然高于生理盐水组,14天时高剂量组的脏器指数仍然高于低剂量组,中剂量组脾脏指数也高于生理盐水组。3、第7、10、14天时,制黄精水煎剂各剂量组的骨髓细胞增殖能力(吸光度)均显著高于生理盐水组,且呈剂量依赖性,高剂量组的吸光度从第7天到第14天的变化为由0.142±0.007上升到0.174±0.005,生理盐水组的相应值0.121±0.007上升到0.126±0.004。4、第10天时,制黄精水煎剂高剂量组将模型组小鼠骨髓基质细胞的粘附力由19.45%提高到27.55%。5、灌胃高剂量制黄精水煎剂第10天,小鼠骨髓早期红系祖细胞、晚期红系祖细胞、粒-巨噬系祖细胞、巨核系祖细胞集落数均明显上升,与灌胃生理盐水组有显著差异。6、第10天时,制黄精水煎剂高剂量组肾脏红细胞生成素基因的表达是灌胃生理盐水组的近三倍;脾脏红细胞生成素受体基因的表达也上升,与生理盐水组有显著差异。7、灌胃生理盐水组各时间点、各检测指标值均低于模型组,尤其是各时间点的血红蛋白含量、14天时的红细胞含量及10天时的晚期红系祖细胞集落数,均显著低于模型组。结论:本研究证实:1、制黄精水煎剂可通过提高骨髓细胞的增殖能力、促使造血干细胞向不同系别的造血祖细胞分化,促进祖细胞增殖,改善环磷酰胺致造血功能抑制小鼠的外周血象,但对不同系别的细胞起效时间可能不同。其中对红细胞的恢复作用还可以通过促进肾脏分泌红细胞生成素和提高脾脏红细胞生成素受体的表达来实现。2、制黄精水煎剂可以提高造血功能抑制小鼠的骨髓基质细胞粘附能力,改善造血诱导微环境的功能,促进造血恢复。3、制黄精水煎剂可提高造血功能抑制小鼠的脾脏、胸腺指数,提高其机体免疫力。4、长期灌胃可能会对实验动物造成一定的损伤,必须在实验中设置灌胃生理盐水对照组,以规避系统误差。
【图文】：

基质培养,黄骨髓,红骨髓,情况

4 讨论在胚胎发育第 3 周，人的原始血细胞在卵黄囊壁的血岛内发生，第 6 周血内的造血干细胞随血流入肝内开始造血，第 12 周逐渐迁至脾内造血，胚胎周，也可最早在 12-15 周，骨髓开始造血，成为主要的造血器官，维持终生造能力。骨髓位于骨髓腔，分为红骨髓和黄骨髓两种，红骨髓因含有大量的红细和不同成熟程度的红系前体细胞而呈红色，黄骨髓主要由脂肪细胞组成。胎儿婴幼儿时期的骨髓均为红骨髓，，造血活跃，大约从 5 岁开始长骨的髓腔内出现肪细胞，逐渐由红骨髓变为黄骨髓，18 岁时几乎所有的肢体骨的骨髓腔中都黄骨髓，其造血功能也随之消失。但黄骨髓中仍含少量的造血干细胞，有一定高剂量组正常组图 2-1 各组小鼠骨髓基质培养第 7 天时的贴壁情况（未染色，200×）

成都中医药大学,硕士学位论文,胎牛血清,造血祖细胞

成都中医药大学 2017 届硕士学位论文表 3.1 CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg 培养体系的组成CFU-GM CFU-E BFU-E CFU-Meg2-Me(10-4mol/L) 0.2ml 0.2ml 0.2ml 0.2mlL-Glu(3%) 0.03ml 0.03ml 0.03ml 0.03ml胎牛血清 0.5ml 0.5ml 0.5ml 0.5mlrhEPO(100IU/ml) - 0.02ml 0.02ml 0.02mlIL-3(40ng/ml) - - 0.05ml -RmGM-CSF(50ng/ml) 0.05ml - -rmTPO(50ng/ml) - - - 0.1mlBMNCs 1×105/ml 1×105/ml 1×105/ml 1×105/mlIMDM To1.9ml To1.9ml To1.9ml To1.9ml3%Agar 0.1ml 0.1ml 0.1ml 0.1ml
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】