虎杖苷对改善小鼠宫腔粘连的作用及其机制研究

发布时间：2020-05-20 13:48

【摘要】：目的:宫腔粘连(IUA)又被称作Asherman综合征,是由感染、创伤等原因造成的子宫内膜基底层损伤,而子宫内膜修复异常,造成的宫腔或宫颈管纤维瘢痕,使子宫生理形态改变、月经量减少、闭经以及复发性流产甚至不孕等相关临床症状。目前,随着诊疗技术的提高,宫腔粘连的检出率越来越高,但是临床上治疗宫腔粘连的方法有限:包括宫腔镜下粘连松解术、术后雌激素预防治疗、术后球囊支撑治疗及防粘连膜等方法。虎杖苷已被发现在其他组织器官的纤维化疾病中有治疗作用。因此本文主要通过研究虎杖苷(Polydatin)在改善小鼠宫腔粘连疾病模型方面的研究。探讨宫腔粘连患者的发病原因、病情进展及该疾病的分子机制,为宫腔粘连的临床诊疗提供新的视角,并为因该疾病引起的不孕提供新的思路。方法:我们通过机械损伤加脂多糖(LPS)炎症双重作用刺激建立宫腔粘连小鼠模型。将所有小鼠分为6组,每组8只,分别为:正常组、假手术组、模型组、虎杖苷低剂量组(5mg/kg)、虎杖苷中剂量组(10mg/kg)和虎杖苷高剂量组(20mg/kg)。建模结束后给予不同剂量(5mg/kg,10mg/kg,20mg/kg)的虎杖苷干预;正常组不进行任何干预,假手术组给予相同体积的生理盐水;治疗14天结束后收集所有小鼠双侧子宫,评估造模是否成功。子宫组织行石蜡切片Masson染色分析各组小鼠子宫胶原纤维沉积程度;免疫组化分析NF-κB、TGF-β、Smad2/3及α-SMA蛋白的表达量评估虎杖苷是否可降低这些与纤维化有关蛋白的表达量;qPT-PCR检测子宫组织中(TGF-β1、NF-κB、P38和MSK)各基因的表达水平,观察虎杖苷是否可在基因层面调控纤维化的发生。结果:不同剂量(5mg/kg,10mg/kg,20mg/kg)的虎杖苷分别作用于IUA小鼠,给药14天后,发现各浓度的虎杖苷对IUA小鼠的体重并无明显影响,各组之间体重增量并无明显差异;通过Masson染色发现:虎杖苷能够明显降低IUA小鼠子宫胶原纤维沉积(P0.05),改善粘连情况,并且随着药物浓度的增加而减少;此外,除虎杖苷低剂量组子宫内膜腺体数目与模型组腺体数之间没有差异外,其他浓度虎杖苷治疗组可以修复因机械损伤及炎症刺激导致的IUA小鼠子宫内膜,腺体数明显比模型组腺体数增加,差异具有统计学意义(P0.05);蛋白水平分析发现,治疗组小鼠子宫内TGF-β1、NF-κB、α-SMA及Smad2/3蛋白的表达比模型组显著减少(P0.05),并且TGF-β1、NF-κB与RNA水平分析结果一致:炎症因子P38和MSK的表达量在虎杖苷各治疗组均明显降低,且与正常组对比均有明显差别(P0.05)。结论:虎杖苷能够改善IUA小鼠宫腔粘连程度,减少组织胶原纤维沉积,减轻内膜粘连症状,并且可促进腺体的恢复;并且通过下调与粘连相关及炎症相关基因(TGF-β1、NF-κB、P38及MSK)的表达水平,抑制IUA小鼠体内炎症因子及粘连因子的表达,显著改善IUA小鼠粘连情况,促进内膜的修复和腺体的再生功能,这些可能会提高IUA小鼠的受孕率;在IUA小鼠的治疗上发挥积极的作用,为该疾病的治疗机制上提供新的视角。
【图文】：

虎杖苷,结构式

硕士毕业论文虎杖苷对改善小鼠宫腔粘连的作用在体内相互转换，两者具有相似的药理作用，但是，白藜芦醇的没有虎杖苷的作用强[10]。虎杖苷分布广，不仅存在于中药虎杖可可、红酒等一些食品中也包含该成分。虎杖苷的传统药理功效清热祛毒、活血化瘀等，常用于黄疸、风湿、咳嗽等疾病的治疗究发现，虎杖苷还有其他的药理作用，除发现虎杖苷在抗炎、抗方面有生物学作用外，，它还在抗组织纤维化方面也发挥着积极

HE染色,虎杖苷,内膜,皱襞

州大学硕士毕业论文虎杖苷对改善小鼠宫腔粘连的作用及其机制1.3 HE 染色观察子宫内膜：HE 染色观察子宫组织内膜形态（见图 2）。未行机械刺激及脂多糖埋线的：子宫内膜组织有完整的内膜层、肌层及浆膜层；内膜组织可见排列整齐的柱状上皮，间质均一无水肿，腺体分布均匀；间质细胞排列紧密，成卵圆深染。IUA 小鼠模型组：子宫内膜厚度变薄，皱襞减少，部分管腔变小甚至；腺体数量明显减少，腺体分布不均，密度减小；偶见白细胞浸润，间质水显。虎杖苷低剂量治疗组（5mg/kg）：内膜组织较完整，内膜变薄；间质水体分布不均。虎杖苷中剂量治疗组（10mg/kg）：子宫内膜组织完整，内膜较组薄，间质水肿减轻，管腔正常，可见皱襞及凹陷，腺体数目增加。虎杖苷量治疗组（20mg/kg）：子宫内膜较正常组薄，上皮组织较完整，呈单层柱状，间质水肿较轻，管腔正常，可见皱襞及凹陷，腺体数明显增多。Normal ShamIUA
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

【相似文献】