【摘要】：目的:观察脑缺血再灌注(cerebral ischemia reperfusion,CIR)后大鼠缺血灶周边脑组织不同时间点神经血管单元(neurovascular unit,NVU)超微结构变化及相关的神经核抗原(neuronal nuclear antigen,NeuN)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和层粘连蛋白(laminin,LN)在不同时间点的表达变化,探讨三七总皂苷(panax notoginseng saponins,PNS)对脑缺血后大鼠脑组织NVU超微结构及相关蛋白表达的影响,进一步阐明PNS对脑缺血具有保护作用。方法:(1)雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组3组,各组分别又按脑缺血再灌注后24 h、72 h、7 d、3 w分为4个亚组,每亚组大鼠12只。采用线栓法制作局灶性大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型。采用Longa法评分标准检测各组大鼠术后4 h神经功能评分,随之各组进行干预,分别在缺血再灌注后24 h、72 h、7 d、3 w进行神经功能评分。(2)应用蛋白质印迹(western blot,WB)法检测神经血管单元各组分相关蛋白NeuN、GFAP和LN的表达变化。(3)透射电镜下观察各组大鼠缺血灶周边脑组织不同时间点的NVU超微结构变化。结果:(1)神经功能评分:干预前即术后4 h治疗组和模型组神经功能评分比较无明显差异;PNS干预后治疗组大鼠神经功能评分逐渐改善,缺血再灌注后24 h与模型组比较,差异无统计学意义(P0.05),再灌注72 h、7 d、3 w的大鼠神经缺损评分与同时间点模型组相比差异有统计学意义(P0.05)。(2)大鼠MCAO模型脑肉眼直观图:IR 3w模型组可见明显脑梗死灶,脑皮质区表面苍白肿胀,梗死中心区可有不同程度脑组织萎缩,血管分支少,细小,走行不清;治疗组脑皮质区表面苍白不明显,组织肿胀较模型组轻,脑缺血梗死中心区较模型组缩小,血管分布较模型组丰富,分支多,走行清晰可见。(3)NeuN、GFAP和LN蛋白印迹结果:假手术组NeuN、GFAP、LN蛋白各时间点表达均无明显改变。模型组NeuN蛋白各时间点表达均低于假手术组,其中IR 24 h、7 d、3 w表达与假手术组比较差异有统计学意义(P0.05);治疗组NeuN的表达量逐渐升高,各时间点表达量均高于模型组,在IR 72 h后基本接近正常,其中7d、3 w与同时间点模型组相比,差异有统计学意义(P0.05)。模型组GFAP蛋白相对表达量逐渐增加,相对假手术组仍低,各时间点的GFAP表达量与假手术组相比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗组各时间点相对表达量较模型组升高,IR 72 h、7 d、3 w表达相比模型组差异有统计学意义(P0.05),至IR 7 d后,治疗组GFAP蛋白表达基本接近正常。模型组LN表达量逐渐增加,各时间点仍低于假手术组,24 h、72 h、7 d相比假手术组差异有统计学意义(P0.05),而3 w与假手术组相比较差异无统计学意义(P0.05);治疗组各时间点LN蛋白表达量较模型组升高,其7 d、3 w表达与模型组相比较,差异有统计学意义(P0.05)。(4)电镜观察发现再灌注24 h、72 h、7 d、3 w治疗组大鼠脑组织NVU超微结构的病理形态损伤均较同时间点模型组明显减轻。结论:(1)PNS对脑缺血后NVU的保护作用,可能与上调脑缺血后NeuN、GFAP、LN蛋白表达有关。(2)PNS能同时减轻脑缺血后NVU损伤的病理形态变化。(3)PNS可通过整合促进脑缺血后NVU的神经元、胶质细胞和微血管的修复,改善神经功能缺损症状,对脑缺血具有保护作用。
【图文】：
图 2-1 大鼠 MCAO 模型成功后典型体征e 2- 1 Typical signs of successful MCAO mode再灌注后 Longa 神经功能评分的变化： 2-1 各组大鼠神经功能评分的比较（ ±s, n=son of neurological deficit scores in rats among e72 h 亚组 7 d 亚组 干预前 72 h 干预前 7 0 0 0 0.60 1.83±0.65 1.92±0.63 1.92±0.63 1.50±0.65△1.83±0.65 1.08±0.36▲1.92±0.63 0.92±0
比较无明显差异；PNS 干预后治疗组大鼠神经功能评分逐渐显降低，缺血再灌注后 24 h 与模型组比较，差异无统计学意 的大鼠神经缺损评分与同时间点模型组相比差异有统计学AO 模型取脑后肉眼直观图比较，肉眼观察可见 IR 3 w 假手术组大鼠脑组织双侧基本对称布丰富，，走行清晰连续；模型组可见明显脑梗死灶，脑皮质区可有不同程度脑组织萎缩，血管分支少，细小，走行不清不明显，组织肿胀较模型组轻，脑缺血梗死中心区较模型组富，分支多，走行清晰可见。见图 2-2。
【学位授予单位】：右江民族医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【参考文献】
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1 陈杰;袁捷;韩祖成;曹姻莉;;三七总皂苷对脑缺血-再灌注损伤大鼠脑神经的保护作用及机制[J];中国药业;2015年24期
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3 王琼;孙湛;买买提祖农·买苏尔;陈永香;龙梅;闫玉仙;;三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织的凋亡抑制作用[J];现代生物医学进展;2013年15期
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5 曹双双;刘志辉;祝新莉;张培;王彬;李健;;三七总皂苷对脑梗死大鼠脑组织N-甲基-D天冬氨酸受体-1表达的影响[J];临床神经病学杂志;2012年06期
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7 谭华;黄小平;邓常清;;黄芪总苷和三七总皂苷配伍对小鼠缺血再灌注脑组织氧化应激的影响[J];中西医结合学报;2010年05期
8 刘旺华;李花;周小青;陈淑华;何倩;莫莉;;三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注海马细胞Ca~(2+)及线粒体膜电位的影响[J];中华中医药学刊;2009年01期
9 张峰;李晓红;;大鼠局灶性脑缺血再灌注后肿瘤坏死因子表达的变化及三七总皂苷的作用研究[J];中西医结合心脑血管病杂志;2007年07期
10 唐映红;张淑萍;梁燕;邓常清;;三七总皂苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素-1β和其相关因子及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶表达的影响[J];中西医结合学报;2007年03期
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2673780
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