壳聚糖联合消炎止痛中药对突发性创口愈合的研究
发布时间：2020-05-22 04:39
【摘要】：目的研究壳聚糖/消炎止痛中药及两者联合应用对小鼠皮肤伤口愈合过程中的作用,分析不同用药组和不同浓度组与小鼠皮肤创口愈合情况的对应关系,进一步讨论壳聚糖、壳聚糖季铵盐和消炎止痛中药促进伤口愈合的作用机制,为壳聚糖外伤敷料的临床应用提供实验依据。方法1.动物分组及造模采用306只健康昆明近交雄性小鼠,将其中300只小鼠随机分为9个用药治疗组和一个空白对照组,每组30只小鼠,剩余6只为正常组。每只小鼠背部造一个约0.5cm2的圆形皮肤全层切割伤口。所有创伤小鼠于制备皮肤缺损创面后立即实行治疗,连续9天,每天2次。9个治疗组分别为高、中、低(8mg/L、4mg/L、2mg/L)壳聚糖外伤敷料治疗组,高、中、低(8mg/L、4mg/L、2mg/L)壳聚糖季铵盐外伤敷料治疗组,4mg/L壳聚糖+1/2消炎止痛中药外伤敷料治疗组、4mg/L壳聚糖季铵盐+1/2消炎止痛中药治疗组和消炎止痛中药外伤敷料治疗组。2.小鼠创伤收缩率评价于术后第1、3、5、7、9天对各组小鼠创伤部位进行标准化摄影,记录每只小鼠创口的创面,采用ImageJ图像处理软件对其进行计算机图形处理。根据数据分布特征,对术后第1、3、5、7、9天各组小鼠创伤面积收缩率数据进行单因素方差分析。3.酶联免疫吸附法测定IL-1、TNF-α、TGF-β和PDGF的表达术后第1、3、5、7、9天,每组随机选取6只小鼠摘眼球取血,血液当天离心取上清液,使用酶联免疫试剂盒测定IL-1、TNF-α、TGF-β和PDGF的表达情况。4.组织病理学评价术后第3、5、7、9天,将取血完毕的小鼠脱臼处死,手术取其创面组织样本约1cm2。组织样本做石蜡切片,HE染色。普通光学显微镜下观察组织病理学变化。结果术后第1天,各组创伤收缩率未见显著差异(P0.05)。术后第3、5天,高、中壳聚糖组,高、中壳聚糖季铵盐组,壳+药组,壳季+药组,中药组创面收缩率明显大于空白组(P0.05),高浓度组创伤收缩率高于低浓度组(P0.05),壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组创伤收缩率无统计学差异(P0.05),联合应用组和高浓度组的创伤收缩率无统计学差异(P0.05)。术后第7、9天治疗组创面收缩率明显高于空白组(P0.05)。病理学切片镜下观察发现:治疗组的炎症反应较空白组轻,上皮细胞增殖加快,新生血管丰富,肉芽组织成熟。高浓度组与低浓度组相比,炎症减轻时间更早、上皮细胞增殖更快,肉芽组织出现时间更早,皮肤恢复完整结构时间更短。壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组镜下恢复程度基本相同,联合应用组镜下恢复程度与高浓度组相似,术后第9天可见完整皮肤结构。治疗组IL-1和TNF-α的表达明显低于空白组(P0.01),高浓度组IL-1和TNF-α的表达较低浓度组低(P0.05),壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组IL-1和TNF-α的表达无统计学差异(P0.05)。联合应用组IL-1的表达较高浓度组低(P0.05),TNF-α的表达与高浓度组无统计学差异(P0.05)。治疗组TGF-β和PDGF的表达明显高于空白组(P0.05),高浓度组TGF-β和PDGF的表达较低浓度组高(P0.05),壳聚糖组和壳聚糖季铵盐组TGF-β和PDGF的表达无统计学差异(P0.05),联合应用组PDGF的表达较高浓度组高(P0.05),TGF-β的表达无统计学差异(P0.05)。结论1.壳聚糖、壳聚糖季铵盐和消炎止痛中药均具有减轻炎症反应和促进生长因子表达的作用,进而促进创口愈合。2.高浓度壳聚糖和壳聚糖季铵盐减轻炎症反应和促进生长因子表达的作用较低浓度组好,具有更强的促进创口愈合能力。3.壳聚糖和壳聚糖季铵盐减轻炎症反应促进生长因子的能力大致相同,促进创口愈合的能力相似。4.壳聚糖/壳聚糖季铵盐和消炎止痛中药联合应用的减轻炎症反应和促进生长因子表达的能力最好,促进伤口愈合的能力最佳。
【图文】：
结果逡逑１．小鼠皮肤愈合情况和创口收缩率逡逑各组小鼠９天创口标准化摄影见图１，创口收缩率见表３。逡逑术后第一天：各组小鼠创面均无明显结疤，创面处有少量炎性渗出，创伤边逡逑缘处略有红肿凸起，创面因皮肤向创口收缩而形状不一。各组小鼠的创伤收缩率逡逑大致相同，无显著性差异（００．０５）。逡逑术后第三天：壳高组、壳中组、壳季高组、壳季中组、壳＋药组、壳季＋药组、逡逑中药组均可观察到创面有结疤，炎性渗出减少或无，创伤边缘处无红肿凸起，创逡逑伤面积有所减少，创口形状不规整，创伤收缩率与空白组差异显著（／＜0．邋０５）。逡逑壳高组、壳季高组、壳＋药组和壳季＋药组间之间创伤收缩率的差异无统计学意义逡逑（＆０．邋０５），高于壳中组、壳季中组和中药组。壳中组、壳季中组和中药组之逡逑间创伤收缩率的差异无统计学意义（／＞0．邋０５）。壳低组、壳季低组和空白组可逡逑见创面有少量结疤，伤口表明有炎性渗出，创伤边缘略有红肿凸起，三组之间创逡逑伤收缩率的差异无统计学意义（／＞0．0５）。逡逑术后第五天：各组小鼠创面均可见结疤
图２邋１０组小鼠术后３、５、７、９天１００倍光镜下组织病理切片ＨＥ染色逡逑联免疫法测定细胞因子逡逑标准曲线的绘制逡逑按照酶联免疫吸附法测定小鼠白细胞介素１邋（ＩＬ－１）、小鼠肿瘤坏死因子ａ逡逑Ｆ－ａ）、小鼠血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）、小鼠转化生长因子Ｐ邋（ＴＧＦ－逡逑中的实验步骤测定各标准品的吸光度，绘制标准曲线。逡逑＿三＇邋逦邋％逦．．．逡逑＇邋：ｆ逦一逦ｒ邋＝邋ｓ－ｓｓｓｓｘ邋－邋＾．ｖ．ｐ＾逡逑ｌ邋！邋邋邋．逦？，邋－邋０，，００￡＜邋－＊？邋Ｓ＃５Ｓ７逦－逦Ｓ？：邋＝邋ｒ；逡逑＂；逦Ｒ＊邋＝邋０．９９３５＾＊逦＾逡逑逦＾邋ｉ邋１：逡逑Ｂ邋＂逦５§逦域逦ＩＳＯ逦２＾｝逦２５０邋诞逦．Ｓ邋’逦＾逦~栧蝀4邋娜’P欏义希穑纾恚戾义希颍幔纾恚戾义贤迹冲澹桑蹋北曜记咤瓮迹矗裕危疲驯曜记咤义
本文编号：2675457
【图文】：
结果逡逑１．小鼠皮肤愈合情况和创口收缩率逡逑各组小鼠９天创口标准化摄影见图１，创口收缩率见表３。逡逑术后第一天：各组小鼠创面均无明显结疤，创面处有少量炎性渗出，创伤边逡逑缘处略有红肿凸起，创面因皮肤向创口收缩而形状不一。各组小鼠的创伤收缩率逡逑大致相同，无显著性差异（００．０５）。逡逑术后第三天：壳高组、壳中组、壳季高组、壳季中组、壳＋药组、壳季＋药组、逡逑中药组均可观察到创面有结疤，炎性渗出减少或无，创伤边缘处无红肿凸起，创逡逑伤面积有所减少，创口形状不规整，创伤收缩率与空白组差异显著（／＜0．邋０５）。逡逑壳高组、壳季高组、壳＋药组和壳季＋药组间之间创伤收缩率的差异无统计学意义逡逑（＆０．邋０５），高于壳中组、壳季中组和中药组。壳中组、壳季中组和中药组之逡逑间创伤收缩率的差异无统计学意义（／＞0．邋０５）。壳低组、壳季低组和空白组可逡逑见创面有少量结疤，伤口表明有炎性渗出，创伤边缘略有红肿凸起，三组之间创逡逑伤收缩率的差异无统计学意义（／＞0．0５）。逡逑术后第五天：各组小鼠创面均可见结疤
图２邋１０组小鼠术后３、５、７、９天１００倍光镜下组织病理切片ＨＥ染色逡逑联免疫法测定细胞因子逡逑标准曲线的绘制逡逑按照酶联免疫吸附法测定小鼠白细胞介素１邋（ＩＬ－１）、小鼠肿瘤坏死因子ａ逡逑Ｆ－ａ）、小鼠血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）、小鼠转化生长因子Ｐ邋（ＴＧＦ－逡逑中的实验步骤测定各标准品的吸光度，绘制标准曲线。逡逑＿三＇邋逦邋％逦．．．逡逑＇邋：ｆ逦一逦ｒ邋＝邋ｓ－ｓｓｓｓｘ邋－邋＾．ｖ．ｐ＾逡逑ｌ邋！邋邋邋．逦？，邋－邋０，，００￡＜邋－＊？邋Ｓ＃５Ｓ７逦－逦Ｓ？：邋＝邋ｒ；逡逑＂；逦Ｒ＊邋＝邋０．９９３５＾＊逦＾逡逑逦＾邋ｉ邋１：逡逑Ｂ邋＂逦５§逦域逦ＩＳＯ逦２＾｝逦２５０邋诞逦．Ｓ邋’逦＾逦~栧蝀4邋娜’P欏义希穑纾恚戾义希颍幔纾恚戾义贤迹冲澹桑蹋北曜记咤瓮迹矗裕危疲驯曜记咤义
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