荷叶碱的提取分离及荷叶提取物降血脂功能研究

发布时间：2020-05-22 19:01

【摘要】：荷叶是睡莲科莲属多年生草本挺水植物莲荷的叶,荷叶中含有的荷叶碱等生物活性物质具有多种功效。本文对荷叶中荷叶碱的提取分离纯化条件,以及荷叶提取物的降血脂功能性进行了深入的探究,并研制了一款荷叶功能性饮料,对荷叶的开发利用具有一定的意义与价值。本文首先对比了超声波辅助提取,索氏提取以及传统的回流提取对于荷叶中荷叶碱的得率的影响,确定了较为优化的提取方式为超声波辅助提取,并在此提取方式上进一步进行乙醇浓度、料液比、提取时间以及提取温度的优化,确定了荷叶碱的最优提取条件。在此提取条件下对荷叶碱进行提取,选用D101大孔吸附树脂分离纯化荷叶碱得到荷叶提取物。将荷叶提取物作为动物实验药剂通过灌胃方式进行小鼠体内实验,实验小鼠共分为7组,分别为(1)空白对照组、(2)空白给药组、(3)高脂模型组、(4)血脂康组、(5)荷叶提取物低剂量组、(6)荷叶提取物中剂量组、(7)荷叶提取物高剂量组,其中(1)、(2)组采用普通饲料喂养,(3)-(7)组采用高脂饲料喂养,分别在造模两周、给药两周以及给药四周时取血,测定各组小鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并在给药四周后处死小鼠,取小鼠肝脏组织,进行实时荧光定量PCR实验,测定肝脏组织中与胆固醇和脂肪酸相关代谢基因的表达情况。最后根据动物实验结果确定荷叶提取物在荷叶饮料中的添加量,确定荷叶饮料配方。实验结果为:(1)在最适的提取条件下,超声波辅助提取的荷叶碱得率比索氏提取高出20%,比传统的回流提取高出74%,确定了运用超声波辅助提取的最佳提取条件为乙醇浓度70%,料液比1:25,提取时间2.0 h,提取温度85℃。(2)确定了荷叶碱的分离纯化条件,为运用D101大孔吸附树脂,选用乙醇作为洗脱剂梯度洗脱,收集50%-70%体积分数的乙醇洗脱液,经过浓缩,可以得到荷叶碱含量为2%的荷叶提取物。(3)动物实验的结果为荷叶提取物能够降低小鼠血清TC、TG、LDL-C的水平,对于小鼠血清HDL-C水平无显著性的影响,高剂量的荷叶提取物对于小鼠血清TC、TG、LDL-C水平的改善与血脂康胶囊相当,荷叶提取物具有降低血脂的功效。(4)实时荧光定量PCR结果表明,荷叶提取物能够显著下调小鼠肝脏组织细胞中影响胆固醇合成代谢的蛋白HMGCR与SREBP-2的基因的表达,同时可以显著上调影响胆固醇分解代谢的蛋白LXRα和CYP7a1的基因的表达,达到降低小鼠血清TC水平的效果。荷叶提取物能够显著下调影响脂肪酸合成代谢的蛋白ACC和SREBP-1c的基因的表达,同时上调影响脂肪酸分解代谢的蛋白CPT-1的基因的表达,达到降低小鼠血清TG水平的效果。(5)确定了荷叶饮料的配方为荷叶、决明子、山楂、甘草按照5:3:2:0.5的比例,经过1:100倍数稀释,加入到90℃的水中,保持90℃水温提取25 min,过滤,取过滤后的清液加入5 mL/L的蜂蜜、5 g/L的荷叶提取物、0.08 g/L的柠檬酸、0.04 g/L的苹果酸、0.02g/L的三氯蔗糖、0.03 g/L的甜菊糖。
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284.2;R285.5

【参考文献】