平菇子实体化学成分及不同极性部位对四种细胞增殖作用的研究

发布时间：2020-05-22 20:38

【摘要】：平菇(Pleurotus ostreatus)是一种常见的药食两用真菌。平菇子实体中含有多种化学成分主要为多糖、甾类、挥发油类、多酚类等,具有抗肿瘤、抗炎、抗病毒、免疫调节、抗氧化、降血糖、降血脂、保肝、杀虫、抑菌等多种药理活性,对治疗股骨头坏死、阿尔茨海默症也有一定疗效。本文首先综述了平菇的化学成分、药理活性,然后提取分离纯化平菇子实体中的化学成分,并对其结构鉴定,为更好的研究开发平菇资源,并将其应用到医药、保健品、食品等相关领域提供参考依据。1.平菇子实体化学成分的系统分离鉴定研究。通过数次硅胶柱色谱、制备薄层色谱法、ODS反向柱色谱、凝胶柱色谱、制备型高效液相色谱等多种分离技术,对平菇不同极性部位进行了分离纯化,共得到19个化合物,结合1H-NMR、13C-NMR、DEPT、MS等多种光谱共鉴定出16个化合物,分别为麦角甾醇(ergosterol)(1)、麦角甾-7,9(11),22-三烯-3β,5α,6α-三醇(ergost-7,9(11),22-trien-3β,5α,6α-triol)(2)、邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate)(3)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(bis(2-ethylhexyl)benzene-1,2-di carboxyl ate)(4)、邻苯二甲酸二戊酯(dipentyl phthalate)(5)、邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate)(6)、邻苯二甲酸二(2-甲基)庚酯(bis(2-methylheptyl)phthalate)(7)、苯丙氨酸(phenylalanine)(8)、焦谷氨酸甲酯(pyroglutamic acid methyl ester)(9)、甲酰胺(Formamide)(10)、leptosphaerin(11)、1,2-dihydroxymintlactone(12)、α-dimorphecolic acid(13)、4-hydroxy-17R-methylincisterol(14)、volemolide(15)、(1'R,2'R,3'S,4'R)-1,2,4-三唑核苷((1'R,2'R,3'S,4'R)-1,2,4-triazole nucleoside)(16)。其中在石油醚部位共鉴定出5个化合物,分别为化合物1、6、13-15,在乙酸乙酯部位得到6个化合物,分别为化合物2-5、7、12,在正丁醇部位分离得到5个化合物,分别为化合物8-11、16。其中化合物2-15为首次从平菇中分离获得。2.不同极性部位对四种细胞增殖作用的研究。本文采用CCK-8法研究了平菇的乙醇浸膏、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位四种不同极性部位对腺癌人类肺泡基底上皮细胞(A549)、人肝癌细胞(HepG-2)、大鼠成肌细胞(L6)、小鼠成骨细胞(MC3T3)的抑制或增殖作用。结果表明:乙醇浸膏对HepG-2肿瘤细胞的抑制作用效果最好,IC50值为35.3μg·mL-1,在500.0μg·mL-1时,抑制率可达到66.6%,乙酸乙酯部位对HepG-2肿瘤细胞的IC50值为42.1 μg·mL-1,正丁醇部位对HepG-2肿瘤细胞的IC50值为48.9 μg·mL-1,石油醚部位较弱,IC50值为88.5μg·mL-1;平菇各部位浸膏对A549肿瘤细胞作用较弱;平菇乙醇浸膏对L6成肌细胞的促增殖作用稍优于阳性药,但其它部位浸膏作用效果明显弱于乙醇浸膏;平菇乙酸乙酯部位对MC3T3成骨细胞的促增殖作用最好且明显优于阳性药,在250.0 μg·mL-1时,细胞活力可达到199.7%,其它部位浸膏作用较弱。本文首先对平菇子实体的化学成分进行了系统的分离纯化,并做了不同极性部位的药理活性初筛,可为下一步探究单体化合物药理活性提供理论依据。
【图文】：

平菇,香气,维生素

平菇中麦角甾醇可经 UV-B 辐射后转化成维生素 D[51]，由此看来可作为生产维生素 D 的天然原料。a b c图 1.1 平菇中甾类化合物结构Fig.1.1 Chemical structures of steroids in P. ostreatus 挥发性化合物平菇鲜品具有特殊香气，干品香气会减轻，，可能为干燥后会损耗掉部分挥发性中挥发性成分主要包括 1,1-二乙氧基乙烷、1-辛烯-3-醇、3-辛酮、3-辛醇和(1E,碳三烯-5,14-二醇、油酸、亚油酸、亚油酸乙酯、十五烷酸（d）、正十六烷酸（f）、9-十八碳烯酸、3-甲基环戊酮、2-戊基呋喃、四甲基硫脲、2,6-二叔丁酚等[39,52-54]。部分化合物结构见图 1.2。

平菇,文献来源,正十五烷,D-甘露醇

图 1.3 平菇中其它类化合物结构Fig.1.3 Chemical structures of others in P. ostreatus表 1.1 平菇子实体主要化学成分Table.1.1 Main chemical compositions of fruiting bodies of P. ostreatus别化合物文献来源化合物 22E,24R-5α,6α-环氧麦角甾-8(14),22-二烯-3β,7α-二醇(22E,24R-5α,6α-epoxyergosta-8(14),22-diene-3β,7α-diol)[39]麦角甾醇(22E,24R-ergosta-5,7,22-trien-3β-ol)[39,50-51]麦角甾醇过氧化物(24R-5α,8α-epidioxyergosta-6,22-dien-3β-ol)[39]及苷类 D-甘露醇(D-mannitol)[39,50]三唑核苷(1’R,2’R,3’R,4’R-1,2,4-ribavirin)[50]腺苷(adenosine)[39]尿苷(uridine)[39,50]酸类正十六烷酸(palmitic acid)[50]正十五烷酸(penta- decanoic acid)[50]
【学位授予单位】：吉林农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285;R284.1

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