山藿香化学成分及生物活性研究

发布时间：2020-05-23 04:54

【摘要】：山藿香,又名血见愁,为唇形科香科科属植物。最早记载于清康熙末年何谏约所撰的《生草药性备要》,具有凉血、止血,解毒消肿的功效,临床上用于治疗吐血、肠风下血、妇科崩漏、跌打损伤、病毒性结膜炎以及糖尿病等。本课题从山藿香的综合利用角度出发,结合传统医学的记载,对山藿香的化学成分和生物活性进行了探究,通过体外止血实验方法,初步筛选出山藿香止血活性部位,同时还对山藿香的抗肿瘤活性进行了探究,为其进一步开发利用提供了依据,以期更好地开发和利用该药用资源。本文以山藿香为研究对象,通过超声加热乙醇溶剂提取法,反复采用凝胶柱色谱、硅胶柱色谱、薄层层析等诸多技术手段,从山藿香的三部分萃取物中共分离得到11个化合物单体化合物。采用核磁共振等方法,鉴定了这些化合物的结构:20β-羟基熊果酸(20β-hydroxy ursolic acid,1)、β-谷甾醇(β-sitosterol,2)、羽扇豆醇(lupeol,3)、齐墩果酸(oleanolic acid,4)、木犀草素(luteolin,5)、槲皮素(quercetin,6)、芹菜素(apigenin,7)、胡萝卜苷(daucosterol,8)、芹菜素-7-O-葡萄糖苷(apigenin-7-O-glucoside,9)、化合物(10)和(11),其中化合物(1)、(3)、(7)、(9)均为首次从山藿香中分离得到。化合物(10)和(11)结构进一步鉴定中。通过体外止血实验方法初步筛选山藿香止血活性部位。分别对山藿香的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物以及萃余水相部分,分别以血浆复钙时间测定法、试管法、凝血板法探究其体外凝血活性。结果显示乙酸乙酯萃取物可显著缩短凝血时间和血浆复钙时间,正丁醇萃取物也具有一定的缩短凝血时间和血浆复钙时间的效果。山藿香石油醚萃取物对体外凝血时间和血浆复钙时间没有明显影响,萃余水相部分可缩短体外凝血时间,但对血浆复钙时间无明显影响。要进一步研究山藿香的凝血作用,还需要进一步探究其体内止血效果。通过MTT法和CCK-8法检测山藿香四部分萃取物和四种单体化合物的抗肿瘤活性。选取人食管癌细胞EC-109和人宫颈癌Hela细胞两种细胞株,对山藿香的四种萃取物和四种单体化合物进行了体外抗肿瘤实验,结果表明山藿香正丁醇萃取物和乙酸乙酯萃取物对两种癌细胞均具有明显的抑制作用。根据计算得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分对EC-109细胞的IC_(50)值分别为46.69μg/mL和30.07μg/mL,对Hela细胞的IC_(50)值分别为37.87μg/mL和40.56μg/mL,石油醚萃取物和水相萃取物无明显抗肿瘤效果。对4种单体化合物羽扇豆醇、芹菜素、芹菜素-7-O-葡萄糖苷及20β-熊果酸进行抗肿瘤活性的测定,结果显示四种化合物均具有一定的抗肿瘤活性。四种化合物对EC-109细胞的IC_(50)值分别为1.098 mg/mL、0.2705 mg/mL、0.3191 mg/mL、2.279 mg/mL。四种化合物对Hela细胞的IC_(50)值分别为1.4970 mg/mL、0.2325 mg/mL、0.2735mg/mL、1.0975mg/mL。
【图文】：

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图 2-1 山藿香不同萃取部位分离纯化实验流程Figure. 2-1 the different extracts and purification experiment process of Shanhuoxiang图 2-2 山藿香不同萃取部位及单体化合物活性实验流程Figure 2-2 Experimental procedures for different extracts and bioactive experiment activity of

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16图 2-2 山藿香不同萃取部位及单体化合物活性实验流程Figure 2-2 Experimental procedures for different extracts and bioactive experiment activity ofShanhuoxiang
【学位授予单位】：北京工业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284;R285

【参考文献】