蟾蜍他灵抑制急性髓系白血病HL-60细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

发布时间：2020-05-23 23:52

【摘要】：目的:探讨蟾蜍他灵对急性髓细胞白血病HL-60细胞株的增殖和凋亡作用的影响,从而为蟾蜍他灵治疗急性髓细胞白血病提供理论依据。方法:采用不同浓度的蟾蜍他灵作用于急性髓系白血病细胞HL-60;(1)细胞增殖测定:应用台盼蓝染色实验对应用蟾蜍他灵的HL-60细胞进行染色,进行细胞计数,计算细胞增殖抑制剂细胞活力,绘制增殖抑制曲线;应用MTT法检测细胞活力及抑制率,并绘制曲线;应用流式细胞仪检测细胞内DNA含量及细胞周期,对蟾蜍他灵作用后细胞内DNA含量及周期进行检测。(2)细胞凋亡测定:应用Hochest33258/PI染色法对不同浓度蟾蜍他灵作用后细胞双染后于荧光显微镜下对细胞形态及数量进行观察;应用Annexin V-FITC/PI双标记法对HL-60细胞进行双染,应用流式细胞仪检测细胞凋亡百分率,对蟾蜍他灵作用于HL-60细胞后对细胞增殖及凋亡进行检测。结果:1.蟾蜍他灵能够有效地抑制HL-60细胞的增殖,并呈药物浓度依赖性,通过计算其IC50为6.627μg/ml,且可以阻滞细胞在G0/G1期,从而抑制细胞增殖、诱导凋亡。2.通过用Hoechst33258/PI双染实验和Annexin V-FITC/PI双标记法实验提示蟾蜍他灵能诱导急性髓系白血病HL-60细胞凋亡;3.蟾蜍他灵1.25μg/ml的药物浓度即可出现细胞凋亡,在蟾蜍他灵浓度为5.0μg/ml~10.0μg/ml可以达到较好的诱导凋亡作用,与第一部分实验对细胞增殖抑制测定所得到的实验结果相一致。结论:1.本实验通过对细胞增殖能力的检测,应用台盼蓝拒染实验、MTT实验以及流式细胞仪检测细胞内DNA含量及细胞周期实验方法,揭示蟾蜍他灵对急性髓系白血病HL-60细胞具有抑制增殖作用,且呈现出药物浓度依赖性;2.通过细胞凋亡测定实验,得出蟾蜍他灵可以通过抑制HL-60细胞增殖活力,诱导细胞凋亡的结论,且其诱导HL-60细胞凋亡的作用受药物浓度的影响,1.25μg/ml的药物浓度即可出现细胞凋亡,在蟾蜍他灵浓度为5.0μg/ml-10.0μg/ml可以达到较好的诱导凋亡作用;3.蟾蜍他灵具有抑制急性髓系白血病HL-60细胞株增殖和诱导凋亡的作用;4.本研究已明确蟾蜍他灵对HL-60细胞具有抑制增殖和诱导凋亡的作用,但对其具体作用机制还尚未明确,有待进一步研究。
【图文】：

陕西中医药大学 2017 届硕士学位论文27.24%，24.48%，15.86%，13.79%，见图 1。结果显示蟾蜍他灵浓度增高，随之活胞数逐渐减少，表现出明显的量效关系。而在浓度区间为 5μg/ml~10μg/ml 蟾蜍他的细胞生长抑制率在与 DMSO 对照组对比后发现均有显著性差异。

图2：台盼蓝实验结果绘制出细胞活力及增殖抑制曲线
【学位授予单位】：陕西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285

【参考文献】

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