淫羊藿苷对产前应激子鼠抑郁样行为及脑内ⅠmGluRs、EAAT2表达的影响

发布时间：2020-05-24 02:38

【摘要】：目的:观察淫羊藿苷对产前应激子鼠行为学影响,检测海马区、前额叶皮层区Ⅰ族代谢型谷氨酸受体mGluR1、mGluR5和转运体EAAT2表达变化,探究淫羊藿苷的抗抑郁作用。方法:1.对怀孕后期SD大鼠,建立产前慢性束缚应激动物模型,将雄性子鼠随机分成5组:空白对照组(CON)、产前应激组(PS)、生理盐水组(NS)、淫羊藿苷高剂量组(80mg/kg/day)、淫羊藿苷低剂量组(40mg/kg/day)。2.分别运用糖水偏好、强迫游泳和旷场实验评价各组子鼠抑郁样行为。3.采用蛋白免疫印迹法(WesternBlot)测定各组子鼠海马区、前额叶皮层区 mGluRl、mGluR5、EAAT2 蛋白表达。4.采用实时定量PCR实验测定各组子鼠海马区及皮层区mGluR1、mGluR5、EAAT2mRNA 表达。结果:1.糖水偏好实验结果表明,五组子鼠饮水总量不变,与CON相比较,PS组糖水偏好所占百分数明显下降,淫羊蕾苷高低剂量组糖水偏好所占百分数与NS组相比明显上升。2.强迫游泳实验结果表明,PS诱导子鼠不动时间明显延长,挣扎时间明显缩短,淫羊藿苷灌胃给药后不动时间显著缩短,挣扎时间延长。3.广场实验中,PS组子鼠穿越中央方格的次数,中央格停留时间较CON组显著减少,淫羊藿苷(80mg/kg或40mg/kg)给药后,子鼠穿越中央格次数和中央格停留时间显著增加;PS也能导致直立次数减少,淫羊藿苷干预后直立次数较NS组显著增加,但各组间并没有统计学差异(p0.05);在旷场试验中,五组子鼠的理毛次数也无显著差异性(p0.05)。4.Western Blot结果表明,在海马区和前额叶皮层区,PS组与CON组相比,mGluR1、mGluR5蛋白表达显著升高,EAAT2蛋白表达显著降低;淫羊藿苷高剂量组能使PS子鼠海马区、前额叶皮层区mGluR5蛋白表达明显下调,海马区EAAT2蛋白水平明显上调,前额叶皮层区mGluR1蛋白水平显著下调;与NS组相比,而淫羊蕾苷低剂量组使海马区与皮层区mGluR1蛋白水平明显降低,EAAT2蛋白水平明显增高,使海马区mGluR5蛋白水平显著下调。5.实时定量PCR实验结果表明,PS子鼠海马区与皮层区mGluR1、mGluR5 mRNA表达显著升高,EAAT2mRNA表达显著降低;淫羊藿苷灌胃给药后(80mg/kg或40mg/kg),可显著逆转PS 鼠海马区与前额叶皮层区mGluR1、mGluR5 及 EAAT2 mRNA 表达。结论:1.PS引起雄性子鼠抑郁样行为,淫羊藿苷灌胃给药能改善雄性子代鼠抑郁样行为。2.PS引起雄性子鼠海马区、前额叶皮层区I族mGluRs过表达,EAAT2表达降低,淫羊藿苷能逆转两个脑区I族mGluRs和EAAT2的表达,缓解雄性子代鼠抑郁样行为。
【图文】：

图１谷氨酸突触传递图逡逑１．４谷氨酸受体及转运体（ＥＡＡＴｓ）逡逑１．４．邋１谷氨酸受体与ＰＳ逡逑谷氨酸受体可以分为两类，离子型受体（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ｉＧｌｕＲｓ）和代逡逑谢型受体（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ邋ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ，ｍＧｌｕＲｓ）。ｉＧｌｕＲｓ邋主要可分为三类，ＮＭＤＡＲ、逡逑ＡＭＰＡ及ＫＡＲ，这些ｉＧｌｕＲｓ通常与离子通道相结合，转变为复合物，主要用于逡逑转导快反应信号而ｍＧｌｕＲｓ—般是与细胞膜内的Ｇ－蛋白相偶联，根据氨基逡逑酸序列的同源性及胞内信号传导机制的不同可将其分为３族８亚型，Ｉ族包括逡逑ｍＧｌｕＲｌ和ｍＧｌｕＲ５，可被Ｑｕｉｓ活化并与磷脂酶Ｃ邋（ＰＬＣ）途径相偶联，对调节逡逑后突触兴奋性及突触可塑性起到关键的作用［５９，６（）］；邋ＩＩ族ｍＧｌｕＲｓ包含ｍＧｌｕＲ２和逡逑１３逡逑

图３淫羊藿苷氋效液相色谱图逡逑实验方法逡逑１实验动物分组逡逑实验用雄性大鼠体重保持在２８０－３５０ｇ，雌性大鼠体重保持在２３０－２５０ｇ，３只逡逑大鼠和１只雄性大鼠于实验当晚合笼饲养，第二天清晨进行阴道涂片检查，逡逑学显微镜下检测到精子呈阳性的雌鼠被单独喂养，并被认定为妊娠第０天。逡逑随后被随机分成对照组和应激组，对照组不进行任何干预，应激组的每只孕逡逑给予束缚应激。孕鼠于第２１天分娩，子鼠与母亲同笼饲养至产后第２１天逡逑Ｄ２１），子鼠断奶，雌雄子代鼠分开饲养。每组随机抽取８只子代雄鼠进行逡逑，同一窝选取的子代雄鼠不得多于两只。逡逑实验将子代雄鼠共分为５组，对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ，邋Ｃ０Ｎ），８只，来自对逡逑孕鼠，子代出生后不进行任何干预；产前应激组（Ｐｒｅｎａｔａｌ邋Ｓｔｒｅｓｓ邋ｇｒｏｕｐ，，邋ＰＳ），逡逑
【学位授予单位】：西北大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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本文编号：2678327