基于基底外侧杏仁核信息编码的酸枣仁拮抗大鼠状态性焦虑的研究

发布时间：2020-05-25 08:47

【摘要】：目的:基于基底外侧杏仁核神经元信息编码,研究酸枣仁对大鼠状态性焦虑的干预作用及作用机制。方法:第一部分状态性焦虑大鼠的行为学与BLA神经元c-Fos蛋白表达及信息编码的变化一、状态性焦虑大鼠行为学的变化选取SD雄性大鼠10只,适应7天后,利用动物行为学采集和分析系统,以跨格次数、站立次数、修饰次数、总运动时间、进入中央格次数、中央格运动时间及中央格/总运动时间(%)为指标,记录10min内实验动物在旷场实验中的行为学表现。每日1次,连续观察7天。二、状态性焦虑大鼠BLA神经元c-Fos蛋白表达的变化选取SD雄性大鼠,适应7天后,随机分为空白对照组与模型组,每组10只。模型组大鼠进行旷场实验1Omin,每日1次,连续7天。此期间空白对照组不做任何处理。末次旷场实验结束后,将两组大鼠灌流取脑并制作脑组织切片,利用免疫组织化学技术,测定两组大鼠BLA神经元c-Fos蛋白的表达水平。三、状态性焦虑大鼠BLA神经元信息编码的变化选取SD雄性大鼠10只,麻醉后固定在脑立体定位仪上,将16(4×4)通道在体记录电极埋置于大鼠的BLA区域。手术后恢复4天,每日先监测大鼠在日常饲养环境下的BLA神经元基底放电(10min),再监测大鼠在旷场中的BLA神经元放电信号(10min),每日1次,连续7天。以神经元动作电位放电频率为指标,观察大鼠BLA神经元信息编码的变化。电信号采集全部结束后,利用脑组织切片的HE染色技术判定记录电极是否准确插入BLA区。第二部分酸枣仁对状态性焦虑大鼠的干预作用及作用机制一、酸枣仁对状态性焦虑大鼠行为学的影响选取SD雄性大鼠,适应7天后,随机分为模型对照组与酸枣仁组,每组10只。每日经灌胃途径给予酸枣仁组大鼠酸枣仁水煎液(17.5g/kg),模型对照组给予同等体积生理盐水。每日给药30min后,利用动物行为学采集和分析系统,以跨格次数、站立次数、修饰次数、总运动时间、进入中央格次数、中央格运动时间及中央格/总运动时间(%)为指标,记录1Omin内实验动物在旷场实验中的行为学表现。每日1次,连续观察7天。二、酸枣仁对状态性焦虑大鼠BLA神经元c-Fos蛋白表达的影响选取SD雄性大鼠,适应7天后,随机分为模型对照组与酸枣仁组,每组10只。每日经灌胃途径给予酸枣仁组大鼠酸枣仁水煎液(17.5g/kg),模型对照组给予同等体积生理盐水,给药30min后,两组大鼠进行旷场实验10min,每日1次,连续7天。末次旷场实验结束后,将两组大鼠灌流取脑,制作脑组织切片,利用免疫组织化学技术,测定两组大鼠BLA神经元c-Fos蛋白的表达水平。三、酸枣仁对状态性焦虑大鼠BLA神经元信息编码的影响选取SD雄性大鼠,适应7天后,随机分为模型对照组与酸枣仁组,每组10只。麻醉后,将大鼠固定在脑立体定位仪上,将16(4×4)通道在体记录电极埋置于大鼠的BLA区域。手术后恢复4天,每日经灌胃途径给予酸枣仁组大鼠酸枣仁水煎液(17.5g/kg),模型对照组给予同等体积生理盐水。每日给药30min后,监测两组大鼠在旷场中的BLA神经元放电信号(10min),每日1次,连续7天。以神经元动作电位放电频率为指标,观察大鼠BLA神经元信息编码的变化。电信号采集全部结束后,利用脑组织切片的HE染色技术判定记录电极是否准确插入BLA区。结果:第一部分状态性焦虑大鼠的行为学与BLA神经元c-Fos蛋白表达及信息编码的变化一、状态性焦虑大鼠行为学的变化实验结果表明:与第一天的行为学表现比较,大鼠的跨格次数、站立次数、修饰次数、总运动时间在第2-7天均无明显变化(p0.05);进入中央格次数在第2天增加,存在显著性差异(p0.05),在第3-7天增加,存在极显著性差异(p0.01);中央格运动时间在第2-7天增加,存在极显著性差异(p0.01);中央格/总运动时间(%)在第2-7天增加,存在极显著性差异(p0.01)。二、状态性焦虑大鼠BLA神经元c-Fos蛋白表达的变化实验结果表明:与空白对照组比较,模型组大鼠BLA神经元c-Fos蛋白表达增多,两组之间存在极显著性差异(p0.01);三、状态性焦虑大鼠BLA神经元信息编码的变化实验结果表明:将大鼠BLA区采集到的神经元分为A、B两类。与基底放电频率比较:A类神经元动作电位放电频率在第1-7天均增加,两组之间存在极显著性差异(p0.01);B类神经元动作电位放电频率在第1、4、5天增加,两组之间存在显著性差异(p0.05),在第2、3、6、7天增加,两组之间存在极显著性差异(p0.01)。第二部分酸枣仁对状态性焦虑大鼠的干预作用及作用机制一、酸枣仁对状态性焦虑大鼠行为学的影响实验结果表明:与模型对照组比较,酸枣仁组大鼠的跨格次数在第5、7天减少,两组之间存在显著性差异(p0.05);站立次数在第2、4、5、7天减少,两组之间存在极显著性差异(p0.01);修饰次数与总运动时间在1-7天均无明显变化(p0.05);进入中央格次数在第1天增加,两组之间存在极显著性差异(p0.01);中央格运动时间在第1、3、6天增加,两组之间存在极显著性差异(p0.01),在第2天增加,两组之间存在显著性差异(p0.05);中央格/总运动时间(%)在第1、3、6天增加,两组之间存在极显著性差异(p0.01),在第5、7天增加,两组之间存在显著性差异(p0.05)。二、酸枣仁对状态性焦虑大鼠BLA神经元c-Fos蛋白表达的影响实验结果表明:与模型对照组比较,酸枣仁组大鼠BLA神经元c-Fos蛋白表达减少,两组之间存在显著性差异(p0.05)。三、酸枣仁对状态性焦虑大鼠BLA神经元信息编码的影响实验结果表明:将大鼠BLA区采集到的神经元分为A、B两类。与模型对照组比较,酸枣仁组大鼠的BLA区A类神经元动作电位放电频率在第3、5、6天减少,两组之间存在显著性差异(p0.05);B类神经元动作电位放电频率在第3、6天减少,两组之间存在显著性差异(p0.05)。结论:1.通过旷场实验复制大鼠状态性焦虑,大鼠表现出基底外侧杏仁核神经元c-Fos蛋白表达增加,以及基底外侧杏仁核神经元动作电位放电频率增加。2.酸枣仁具有拮抗状态性焦虑的作用。3.酸枣仁的抗状态性焦虑的作用机制与抑制基底外侧杏仁核神经元c-Fos蛋白表达、及降低基底外侧杏仁核神经元动作电位放电频率有关。
【图文】：

逡逑的细胞核呈棕黄色或棕褐色，阴性神经元的细胞核呈蓝紫色。（图１－８）逡逑Ａ民尸＇逦７￣ｌ（Ａ）逡逑十，逡逑／邋ｊ邋０ＬＡ邋ｒ邋Ｒｌ．ｐ逡逑」，，ｌ逡逑．／？Ｘ．．．邋．邋（Ｂ）逦／＾ｘ邋？邋ｃｃ＞逡逑．．：：．．逡逑；／邋ｂｕ．邋／：邋，邋／邋ｂｕ邋ｉ：－逡逑图１－８大鼠ＢＬＡ区域进行ｃ－Ｆｏｓ蛋白免疫组化的阴性对照和阳性反应。逡逑（注：图Ａ为大鼠脑立体定位图谱所示ＢＬＡ区位置，图Ｂ为正常羊血清代替ｏＦｏｓ逡逑一抗的阴性对照，图Ｃ为使用Ｃ－Ｆｏｓ邋—抗的阳性反应。逡逑切片图放大倍数为１００倍，标尺为２００ｐｍ。）逡逑利用邋Ｉｍａｇｅｐｒｏ－Ｐｌｕｓ邋６．０邋专业图像软件（Ｍｅｄｉａ邋Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ邋Ｉｎｃ，邋Ｓｉｌｅｒ邋Ｓｐｒｉｎｇ，邋ＭＤ，逡逑ＵＳＡ）统计每只大鼠ＢＬＡ区连续切片中ｃ－Ｆｏｓ阳性神经元的累积光密度（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ逡逑ｏｐｔｉｃａｌ邋ｄｅｎｓｉｔｙ

逡逑的细胞核呈棕黄色或棕褐色，阴性神经元的细胞核呈蓝紫色。（图１－８）逡逑Ａ民尸＇逦７￣ｌ（Ａ）逡逑十，逡逑／邋ｊ邋０ＬＡ邋ｒ邋Ｒｌ．ｐ逡逑」，，，ｌ逡逑．／？Ｘ．．．邋．邋（Ｂ）逦／＾ｘ邋？邋ｃｃ＞逡逑．．：：．．逡逑；／邋ｂｕ．邋／：邋，邋／邋ｂｕ邋ｉ：－逡逑图１－８大鼠ＢＬＡ区域进行ｃ－Ｆｏｓ蛋白免疫组化的阴性对照和阳性反应。逡逑（注：图Ａ为大鼠脑立体定位图谱所示ＢＬＡ区位置，图Ｂ为正常羊血清代替ｏＦｏｓ逡逑一抗的阴性对照，图Ｃ为使用Ｃ－Ｆｏｓ邋—抗的阳性反应。逡逑切片图放大倍数为１００倍，标尺为２００ｐｍ。）逡逑利用邋Ｉｍａｇｅｐｒｏ－Ｐｌｕｓ邋６．０邋专业图像软件（Ｍｅｄｉａ邋Ｃｙｂｅｒｎｅｔｉｃｓ邋Ｉｎｃ，邋Ｓｉｌｅｒ邋Ｓｐｒｉｎｇ，邋ＭＤ，逡逑ＵＳＡ）统计每只大鼠ＢＬＡ区连续切片中ｃ－Ｆｏｓ阳性神经元的累积光密度（ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ逡逑ｏｐｔｉｃａｌ邋ｄｅｎｓｉｔｙ
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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本文编号：2679889