炮天雄质量标准及温肾助阳作用研究

发布时间：2020-05-26 13:19

【摘要】：炮天雄为毛茛科植物乌头(Aconitum carmichaelii Debx.)的子根的加工品,为附子炮制品规之一。现炮天雄多用于炖汤食疗保健,少用于临床,然历代医家认为天雄尤偏于益阳事,治男子虚寒失精、肾阳亏虚证,效果甚佳。炮天雄炮制工艺复杂,不同厂家其炮制工艺各异,生产的炮天雄色泽、性状等差别较大,不利于炮天雄在中医临床上的使用和推广。因此,有必要提高炮天雄的质量标准,增加炮天雄质量控制项目,保证炮天雄安全有效、质量可控。同时,对炮天雄温肾助阳作用进行研究,验证其作用,并尝试探讨炮天雄温肾助阳的作用机制。为炮天雄的进一步研究奠定基础,望为促进炮天雄传统加工炮制技艺的非物质文化遗产保护和推广炮天雄临床使用贡献微薄之力。通过查阅期刊论文、阅读古籍、国内外研究,确定天雄名称来源以及考证天雄炮制方法。天雄品名最早出现于西汉时期《淮南子·缪称训》,今天雄之药,是有其名、无其实的品种,现凡个大的附子皆可加工为天雄;天雄炮制方法最早可追溯至东汉时期张仲景著作《金匮要略方论》“炮”,天雄炮制方法历经了“炮”、“炮皴坼后,去皮尖底用”、“阴制”、“炮,去皮、脐”、“醋制”、“甘草制”、“童便制”、“黄连制”、“蜜炙”、“煨法”、“煮制”等多种方法。对炮天雄水提液、醇提液和石油醚提取液进行化学成分系统预实验,研究发现炮天雄最有可能含有的大类成分为糖/多糖/苷类和生物碱类,可能含有有机酸、蛋白质、皂苷等成分,为进一步研究炮天雄奠定基础。熟知炮天雄目前质量标准研究现状,了解炮天雄质量控制及加工炮制对化学成分、药性、药效和毒性的影响。炮天雄质量标准研究主要通过机器视觉技术、快速气相电子鼻和肉眼观察对性状进行描述,完善《四川省中药饮片炮制规范》(2015年版)所描述的性状内容;通过粉末显微鉴别、薄层鉴别,对炮天雄进行定性鉴别;测定水分、总灰分和酸不溶性灰分等检查项和浸出物,增加炮天雄质量控制项目;采用HPLC检测13批炮天雄3个单酯型生物碱苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头碱和3个双酯型生物碱新乌头碱、次乌头碱和乌头碱的含量,提高炮天雄含量测定限度。基于化学计量学对炮天雄色泽、生物碱含量进行聚类分析、主成分分析(PCA)和相关性分析,可以将炮天雄大致分为三类,说明相同厂家生产的炮天雄差异较小,不同厂家生产的炮天雄差异较大。同时,发现其颜色和双酯型生物碱总和呈正相关,证明炮天雄炮制程度直接关系到其色泽、生物碱含量,可以通过色泽和生物碱含量判断炮天雄是否炮制过度。确定有效而简便的肾阳虚证模型,为验证炮天雄温肾助阳作用和探讨作用机制提供理论基础。用灌胃腺嘌呤致肾阳虚和切除双侧肾上腺致肾阳虚两种模型,观察大鼠的一般状态、体重、肛温、饮水饮食量、脏器指数,测定血清中睾酮(T)、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、促肾上腺素皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、免疫球蛋白G(IgG)等指标水平验证炮天雄具有温肾助阳作用。在腺嘌呤致肾阳虚模型中,与模型组比较,血清ACTH、TSH、Cr、BUN含量下降,血清IgG、T含量上升,其差异有统计学意义;在切除大鼠双侧肾上腺致肾阳虚模型中,与模型组比较,血清ACTH、T含量上升,血清中TSH含量下降,血清中Cr、BUN、IgG含量无明显差异。说明炮天雄具有很好的温肾助阳作用,其作用机制可能跟改善下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)轴、下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴和下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴以及免疫功能有关。总之,本课题提升和完善了炮天雄的质量标准,验证了炮天雄的温肾助阳作用,探讨其温肾助阳功效的作用机制,为炮天雄的安全有效、质量可控提供了基础理论,为炮天雄在中医临床上的推广奠定了基础。
【图文】：

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22成的。图3-2 中坝炮天雄样品HeraclesⅡ超快速气相色谱图4.3.5炮天雄气味成分定性分析从图3-2可以很直观的发现炮天雄样品之间差异，但是对比每个样品色谱图均在某些相同保留时间出现色谱峰（图3-2圈出部分），只是峰面积存在差别，，通过Kovats保留指数定性，采用Arochembase数据库进行化合物定性分析，给出可能是炮天雄所含有的气味信息，其结果见表3-6。表3-6 Arochembase数据库分析炮天雄可能气味信息分子式 RI MXT-5 RI MXT-1701 可能的化合物气味信息C2H4Br2806 893 二溴乙烷有特殊甜味C6H14O 801 900 己醇有特殊香气C6H12O 801 890 己醛有刺激性气味C6H12O2812 885 乙酸丁酯愉快果香气味CHBr2Cl 800 886 氯二溴甲烷有刺激性气味C6H10O 800 884 甲基戊炔醇有特殊刺激性气味根据表3-6可知，炮天雄气味信息分析中，可能含有二溴乙烷、己醇、己醛、乙酸丁酯、氯二溴甲烷、甲基戊炔醇等成分，其中二溴乙烷的相关指数为92.59

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2-二溴乙烷结构式和 1,1-二溴乙烷结构味描述规定lesⅡ超快速气相色谱电子鼻技术，获取炮天雄气雷达特征分析，可以快速的区分不同厂家的炮天加工的方法、所用辅料等不同，导致炮天雄的气分差异较大，但对气相色谱信息进行分析，发图中有某些色谱峰保留时间相同，通过 Kovatsase 数据库进行化合物定性分析，可能含有二溴乙溴甲烷、甲基戊炔醇等成分，其中二溴乙烷的相中最可能含有二溴乙烷。二溴乙烷有特殊的气味味”而并非《四川省中药饮片炮制规范》（2015天雄具有“特殊气味”提供理论依据。天雄的气味应该完善为“有特殊气味”。
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R283

【参考文献】