伪原薯蓣皂苷对脂多糖诱导的巨噬细胞炎症介质表达及相关信号通路的影响

发布时间：2020-05-27 13:28

【摘要】：目的:研究有效成分伪原薯蓣皂苷(PPD)对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞炎症介质及相关信号通路的影响。方法:(1)使用PPD前采用HPLC检测其纯度;(2)体外培养Raw264.7巨噬细胞,加入不同浓度的PPD,采用SRB比色法确定无细胞毒性的最适使用剂量;(3)采用qPCR、western blot观察PPD对LPS诱导Raw264.7巨噬细胞IL-1β表达及相关信号通路TLR2/MAPK/NF-кB、NLRP3/caspase-1的影响;(4)采用qPCR、western blot、ELISA观察PPD对LPS诱导Raw264.7巨噬细胞AA代谢通路的影响。结果:(1)HPLC分析PPD的纯度为96.15%,可用于处理细胞;(2)SRB分析确定PPD的无细胞毒性剂量范围大约为15-30μg/mL;(3)用PPD预处理Raw264.7巨噬细胞,可剂量依赖地抑制LPS诱导的IL-1β表达(P0.01或P0.05),也显著抑制了调控IL-1β表达的上游通路MAPK/NF-кB活性(P0.01或P0.05),以及NLRP3/caspase-1的表达(P0.01或P0.05),对TLR2mRNA的表达无影响;(4)此外,在AA代谢通路中,PPD剂量依赖地抑制LPS诱导的LTB_4、PGE_2的表达,也显著下调COX-2 mRNA表达(P0.01或P0.05),对PLA_2 mRNA表达无影响(P0.01或P0.05)。结论:伪原薯蓣皂苷通过抑制炎症介质IL-1β、LTB_4、PGE_2表达而发挥抗炎活性,其作用机制与抑制MAPK/NF-кB、NLRP3/caspase-1和AA代谢通路有关。
【图文】：

技术路线图

PPD化学结构
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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1 张晓音;吴e，

本文编号：2683601