15种重楼属植物根茎的化学成分分析

发布时间：2020-06-01 18:01

【摘要】：目的:重楼是我国传统名贵中药,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊等功效,主要用于咽喉肿痛、毒蛇咬伤、跌打伤痛、惊风抽搐等症。2015版《中华人民共和国药典》规定其来源是滇重楼Paris polyphylla Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand. Mazz.或七叶一枝花Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的根茎。重楼属有38种(含变种),其中18个种(含变种)在民间常做重楼药用。为了探讨重楼属不同种之间化学成分的异同及其他种作为重楼药用的可行性,我们采集鉴定了15种重楼属植物,进行其化学成分的分析鉴定和质量评价。方法:(1)研读文献,总结并建立重楼皂苷数据库和重楼甾体皂苷的质谱裂解规律及其在反相色谱上的保留规律;(2)利用UPLC-Q-TOF MS技术和多元统计分析的方法对15种重楼属植物的根茎提取物进行了代谢组分析,发现不同种重楼间的异同及标志性差异化合物;(3)利用Unify软件和重楼皂苷数据库,对滇重楼、南重楼和长柱重楼的化学成分进行了结构分析和鉴定;(4)在UPLC-Q-TOF MS半定量分析的基础上,进一步对重点的8种主要活性成分(重楼皂苷VII、H、VI、II、I、V,薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷)建立了其HPLC-UV的含量测定方法,并对183份样品进行了含量测定。结果:(1)建立了重楼皂苷数据库和总结了重楼甾体皂苷在ESI源下的质谱裂解规律和在反相色谱上的保留规律。(2)建立了重楼属样品UPLC-Q-TOF MS的分析方法,并对重楼属15个种进行了液质的表征分析。最终从滇重楼,长柱重楼,南重楼中鉴定或试着鉴定了171个化合物,其中56个化合物首次在重楼属中被发现。(3)通过对15种重楼的UPLC-Q-TOF MS的数据进行多元统计学分析发现:PCA聚类结果显示大理重楼、五指莲、长柱重楼和滇重楼基本可以聚为一类;狭叶重楼、毛重楼和金线重楼分为一类;南重楼可分为一类;七叶一枝花不同的产地差异较大,长药隔重楼处于滇重楼和七叶一枝花之间,更偏向于滇重楼。通过OPLS-DA分别对长柱重楼与滇重楼,南重楼与滇重楼的分析,从中各找到15种代谢物作为长柱重楼与滇重楼,南重楼与滇重楼的差异标记物,可以很好的区分3种不同的重楼。(4)建立了同时测定重楼中8种主要活性甾体皂苷(重楼皂苷VII、H、VI、II、I、V、薯蓣皂苷和纤细薯蓣皂苷)的含量测定方法,用以评价重楼属药材质量的优劣。含量测定结果表明不同种重楼中重楼皂苷的含量差异显著,毛重楼、狭叶重楼和金线重楼中皂苷含量较低或基本不含重楼皂苷,不适合作为重楼药用;不同产地的七叶一枝花含量差异显著;滇重楼、长柱重楼、大理重楼和五指莲中重楼皂苷含量较高,最高达5.0%,南重楼中虽然药典规定四种皂苷含量较低,但8种总皂苷含量较高。长柱重楼、大理重楼和五指莲等可作为潜在的重楼药用资源。结论:本研究较为系统的对重楼属15种重楼进行了化学成分的定性和定量研究,发现了重楼药材潜在的替代资源,并挖掘鉴定了不同药材之间关键的差异成分,这一结果对利用化学成分进行种源鉴定具有重要意义;发现中国药典中重楼的含量测定方法具有一定的局限,建议采用含量测定加指纹图谱的质控方法更为合理,且控制重楼皂苷H比重楼皂苷VI更为理想。本研究结果将为重楼属的综合保护、利用和开发奠定一定的物质基础,也为边少地区利用重楼种植进行精确扶贫提供了科学数据。
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284.1

【参考文献】