基于运脾消积法的小儿开胃增食合剂对厌食症模型幼龄大鼠血液代谢物影响的实验研究

发布时间：2020-06-02 16:44

【摘要】：目的通过对基于运脾消积法的小儿开胃增食合剂治疗厌食症模型幼龄大鼠血液代谢物影响的实验研究,尝试寻找厌食症差异性代谢物,并探索小儿开胃增食合剂治疗厌食症的代谢组学机制。方法选取断乳后1周龄SD幼龄大鼠120只,随机分为空白组、模型组。空白组以常规饲料喂养,模型组用特制饲料喂养,自由进食饮水,共饲养5周建立动物模型。模型建立成功后,将模型组大鼠随机分为5组:模型对照组、小儿开胃增食合剂高、中、低剂量组和健胃消食片对照组,每组各20只。高、中、低剂量组分别灌服小儿开胃增食合剂14.4g/kg.d、7.2g/kg.d、3.6g/kg.d,健胃消食片对照组每日灌服江中健胃消食片水溶剂0.576g/kg.d。总共灌胃15天,实验过程中,每天定时观察大鼠体重及饮食变化,并随机取出空白组、模型组各10只分别于组造模前、模型建立成功后,经大鼠股静脉取血4ml,各组剩余大鼠在药物干预后,经大鼠股静脉取血约4ml,制备血清。对血清进行液质联用(LC-MS)技术检测,对数据进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)以及正交偏最小二乘法-判别(OPLS-DA)分析,通过变量重要性投影值(VIP1)和P值(P0.05)筛选出血清中的差异性代谢物。结果1与空白组大鼠相比,模型组大鼠于第二周开始进食量减少、体重下降,但无腹泻、蜷卧和弓背耸肩等脾虚症状。与模型组大鼠相比,药物干预组大鼠进食量、体重增加,剃毛光泽顺滑,差异有统计学意义(P0.05)。通过代谢组学PCA、PLS-DA和OPLS-DA三种分析方法能将模型组与空白组大鼠血液代谢物明显区分,且各组间无交叉与重叠。发现厌食症大鼠血清中存在一组相关联的潜在生物标记物:谷氨酸、鞘氨醇、丙氨酸、柠檬酸、油酸酰胺、β-羟基丁酸、花生四烯酸等。2与模型组大鼠相比,小儿开胃增食合剂高、中、低剂量组通过代谢组学PCA、PLS-DA和OPLS-DA三种分析方法均能与模型组大鼠血液代谢物明显区分,各组间无交叉与重叠,且向空白组靠拢,说明药物起治疗作用。代谢物油酸酰胺、鞘氨醇、胆碱、脯氨酸等的含量呈剂量依赖性降低,以高剂量组最显著。3与模型组大鼠相比,健胃消食片组通过代谢组学PCA、PLS-DA和OPLS-DA三种分析方法能与模型组大鼠血液代谢物明显区分,各组间无交叉与重叠,且向空白组靠拢,说明药物有治疗作用。但代谢物谷氨酸、鞘氨醇、花生四烯酸、胆碱等的含量均较小儿开胃增食合剂组远离空白组,说明疗效差于小儿开胃增食合剂。结论1采用特制饲料喂养幼龄大鼠能成功复制小儿厌食症模型,厌食症大鼠出现食欲下降、体重减轻和代谢物改变等表现。2基于运脾消积法的小儿开胃增食合剂治疗厌食症幼龄大鼠后,体重、摄食量较模型组增加,相同代谢物含量较模型组更接近空白组。3发现了谷氨酸、丙氨酸、丁酸、柠檬酸、油酸酰胺、花生四烯酸、β-羟基丁酸、鞘氨醇、甘油糖脂、LysoPE、LysoPC、MG等厌食症模型幼龄大鼠的潜在生物标志物,揭示了幼龄厌食症大鼠模型的发生与鞘脂类代谢、甘油磷脂代谢、三羧酸循环、脂肪酸类代谢、氨基酸类代谢、糖代谢紊乱有关。
【图文】：

TIC所有样本正模式下总离子流色谱图

TIC所有样本负模式下总离子流色谱图
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5;R-332

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本文编号：2693467