清窍胶囊对分泌性中耳炎小鼠模型水通道蛋白AQP1,4,5表达水平的影响

发布时间：2020-06-02 17:32

【摘要】：目的:基于水通道蛋白对院内制剂“清窍胶囊”治疗分泌性中耳炎(SOM)小鼠模型机制的初步研究,试图为清窍胶囊治疗分泌性中耳炎提出新的理论依据,同时探讨清窍胶囊对SOM小鼠模型外周血及中耳黏膜水通道蛋白(Aquaporin)AQP1,4,5表达水平的影响,部分诠释清窍胶囊治疗分泌性中耳炎的蛋白组学机制。方法:采用随机、对照、前瞻性研究的方法,将80只健康、耳廓反射良好且无噪声暴露史的小鼠随机纳入健康对照组10只,实验组、空白对照组各35只。实验组及空白对照小鼠统一采用卵清蛋白分别于第1、第8天行腹腔注射全身致敏,第15天卵清蛋白鼓室内注射耳内激发,3天内观察鼓室内出现液平面或液气平面,显示分泌性中耳炎小鼠模型制备成功,淘汰各组造模未成功及不合格的小鼠;实验组予清窍胶囊药末混悬液0.5ml(0.02mg/kg)灌胃,每日2次;空白对照组予等量生理盐水灌胃;实验组及空白对照组分别于d1、3、5、7、9随机取2只小鼠,行心脏采血及快速断头刮取中耳黏膜,余各组小鼠于第10日予以心脏采血及快速断头刮取双侧中耳黏膜,以双侧中耳黏膜为一个实验标本,并分组编号,血清予以常规高速离心取上清液,中耳黏膜予以强蛋白裂解液冰点充分裂解后高速离心取上清液,各组均采用ELLSA方法对各组小鼠外周血清及中耳黏膜裂解液中的水通道蛋白AQP1,4,5含量进行定量检测并统计分析。统计学方法:采取SPSS 17.00统计软件包分析数据,计量数据以(x±s)表示,组间比较采用两独立样本t检,以P0.05表示比较差异有统计学意义。结果:(1)实验组SOM小鼠模型血清AQP1,5表达浓度明显高于空白对照组(P0.01),差异具有统计学意义,而AQP4表达浓度较空白对照组显著降低(P0.05);(2)实验组小鼠模型中耳黏膜裂解液中AQP1,5表达浓度较空白对照组明显升高(P0.01),AQP4表达浓度与空白对照组相比略微降低,差异无统计学意义(P0.05)。(3)实验组中SOM小鼠血清AQP1,5及中耳黏膜AQP1,4的随时间的表达浓度显著高于空白对照组,而中耳黏膜中AQP5随时间的表达水平明显低于空白对照,并且血清中AQP4随时间的表达水平则与空白对照组相比无显著差距。结论:(1)清窍胶囊能明显提高SOM小鼠血清中AQP1,5的表达量,提高小鼠中耳黏膜中AQP1,5的表达水平,加快SOM小鼠血清中AQP1,5及黏膜中AQP1,4的表达,但对中耳黏膜AQP4及血清中AQP4的表达水平的提高作用有限,对中耳黏膜中AQP4无明显干预。(2)显示清窍胶囊可能通过提高SOM小鼠模型血清和中耳黏膜中水通道蛋白AQP1,5的表达水平,从而干预分泌性中耳炎(SOM)中耳黏膜水液的输布,提高中耳黏膜AQP1,4对水液的转运效率,调节中耳黏膜水平衡,从而促进中耳积液的清除,其对缩短SOM的病程及改善分泌性中耳炎的转归有着积极明显的作用。(3)清窍胶囊对小鼠中耳黏膜及外周血水通道蛋白AQP4的调节效果有限,且可能下调AQP5的表达,预示着中耳黏膜及血清当中的AQP1,4,5之间可能存在着协调表达,各亚型之间可能存在表达、分布的相互平衡,但具体清窍胶囊如何干预AQP1,4,5的表达,各水通道蛋白如何协调表达及之间的信号通路尚需更深一步的研究。
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5;R-332

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本文编号：2693523