基于EGFR-STAT3通路探讨桂枝茯苓丸对人乳腺癌MCF-7细胞周期阻滞的影响

发布时间：2020-06-04 15:28

【摘要】：目的:通过体外实验研究桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与阻断剂(AG490)混合药液对人乳腺癌MCF-7细胞活性及周期蛋白STAT3、P-STAT3、Cyclind1、P53表达的影响,为桂枝茯苓丸的临床应用提供理论依据。方法:采用MTT法检测不同剂量(低剂量:1800μg/mL、高剂量:2700μg/mL)桂枝茯苓丸和不同剂量(低剂量:1800μg/mL+AG490、高剂量:2700μg/mL+AG490)桂枝茯苓丸与AG490混合药液在作用48h后,对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用。用倒置显微镜观察桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与AG490混合药液作用MCF-7细胞48h后对细胞形态学的影响;用流式细胞术检测桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与AG490混合药液对人乳腺癌MCF-7细胞相关周期蛋白STAT3、P-STAT3、Cyclind1、P53表达的影响。结果:1 MTT法测定结果显示,和空白对照组比较,不同剂量桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与AG490混合药液在作用48h后,MCF-7细胞OD值下降,且细胞抑制作用呈剂量依赖性。2倒置显微镜观察不同剂量桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与AG490混合药液作用48h后,MCF-7细胞形态发生改变,以高剂量组最为明显。3流式细胞术测定细胞周期蛋白结果显示,与空白对照组比较,不同剂量桂枝茯苓丸作用48h后,MCF-7细胞P-STAT3的表达显著下调,有统计学差异(P0.05)。在P53表达中,与空白对照组比较,低剂量组蛋白表达上调不明显,高剂量组蛋白表达显著上调,有统计学差异(P0.05)。在CyclinD1表达中,与空白对照组比较,高剂量组蛋白表达显著下调,有统计学差异(P0.05)。在STAT3表达中,与空白对照组比较,各剂量组蛋白表达无显著下调,无统计学意义(P0.05)。4流式细胞术测定细胞周期蛋白结果显示,与空白对照组比较,不同剂量桂枝茯苓丸与AG490混合药液作用48h后,MCF-7细胞P-STAT3的表达显著下调,有统计学差异(P0.05)。在P53表达中,与空白对照组比较,高、低剂量组蛋白表达均上调显著,有统计学差异(P0.05);在CyclinD1表达中,与空白对照组比较,低剂量组蛋白表达下调不明显,高剂量组蛋白表达显著下调,有统计学差异(P0.05)。在STAT3表达中,与空白对照组比较,各剂量组蛋白表达下调均不明显,无统计学意义(P0.05)。结论:1桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与AG490混合药液能抑制MCF-7细胞活性,使其发生不同程度的形态学变化,且同时间内呈剂量依赖性。2桂枝茯苓丸及桂枝茯苓丸与AG490混合药液抑制MCF-7细胞异常生长和周期阻滞作用机制,可能和蛋白P-STAT3、CyclinD1的表达下调及蛋白P53表达上调有关。3 EGFR、STAT3并非为桂枝茯苓丸作用于MCF-7细胞的唯一通路。桂枝茯苓丸可通过其它通路抑制MCF-7细胞活性。
【图文】：

1.1 桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞 MCF-7 活性的影响MTT 结果表明，，不同剂量(低剂量:1800μg/mL、高剂量:270作用 MCF-7 细胞 48h 后，与空白对照组比较，OD 值均显著比与阳性对照组比较，高、低剂量组 OD 值均低于阳性对照组，有见表 1 和图 1。表 1 不同剂量桂枝茯苓丸对 MCF-7 细胞活性的影响（ ±s,n=3）组别 48hOD 值 抑制率空白对照组 2.004±0.198 --阳性对照组 0.869±0.117 57.2低剂量组 1.330±0.127##33.1高剂量组 1.173±0.162##40.3注： ：同空白对照组相比 P<0.01。#：同空白对照组比 P<0.05。##：（下同）x

无统计学意义（P>0.05）。在 95%置信区间内发现 50作用较稳定；因此选择 50μmoL/L 组作为后续试验的浓度剂量 AG490 药液对 MCF-7 细胞活性的影响（ ±s,n=3）48hOD 值 抑制率（%）组 1.950±0.072 -- 1.388±0.057 28.6 1.248±0.055 35.3 1.241±0.049 36.6 1.035±0.018 47.3x4550
【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285

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本文编号：2696587