基于“精-血-髓”一体论探讨最佳量效点的当归补血汤对VD大鼠学习记忆的改善及对海马CA1区GFAP数目、缺血脑组织微血管

发布时间：2020-06-07 01:56

【摘要】：●目的本研究依据“精-血-髓”一体论理论认为,一方面血能直接充养脑髓,另一方面精血髓可互生,可见血具有营养脑髓的双重作用,遂提出以当归补血汤为代表的补血法治疗血管性痴呆(VD)的临床新思路。临床发现VD患者依从性差则疗效降低,在该理论指导下,前期研究发现采用补血法治疗VD疗效优于传统补肾法,且高剂量的当归补血汤疗效最佳。遂现进一步在最佳剂量下得出最佳时间窗是何时,并观察不同时间窗的当归补血汤对改善VD大鼠海马CA1区血流灌注、促进血管新生、抑制神经元凋亡的关系,为该方治疗血管性痴呆提供更加科学的临床指导,并进一步推广“精-血-髓”一体论在临床应用。●方法以健康SPF级SD雄性大鼠为试验对象,将100只大鼠随机分为VD模型+高剂量当归补血汤90天组、VD模型+高剂量当归补血汤180天组、VD模型+高剂量当归补血汤270天三组,前两组33只,第三组34只。第22日龄采用改良Pulsinelli四血管阻断(4-VO)制作VD大鼠模型,造模一周后根据模型行为表现并进行神经功能缺损评分选出49只模型大鼠进行试验,分别是15、16、18只。造模7天后予以当归补血汤免煎颗粒灌胃,分别灌胃90天、180天、270天3个时间段,270天后运用Morris水迷宫、免疫荧光标记技术、HE染色、光镜及免疫组化法方法观察各组大鼠行为学、海马CA1区GFAP(胶原纤维酸性蛋白)数目、第Ⅷ因子、脑组织形态和缺血脑组织微血管密度的变化。●结果1.形态学观察:VD模型+高剂量当归血汤组(3组)海马较前期模型组星形胶质细胞增生增多,可见噬神经现象,且活化的AS270天组180天组90天组(两两比较具有显著差异,p0.01)。2.Morris水迷宫行为学测试结果:Morris水迷宫实验逃避潜伏期时间,高剂量当归补血汤三组逃避潜伏期时间均缩短,且270天组180天组90天(两两比较具有显著差异,p0.01)。3.荧光显微镜下观察GFAP表达结果:三组大鼠海马CA1区GFAP表达的免疫荧光细胞均显著增加,且270天180天组90天组(两两比较具有显著差异,p0.01)。4.缺血脑组织微血管密度检测结果:三组大鼠随着灌胃时间的延长,缺血灶周围微血管密度依次升高,两两比较具有显著差异(p0.01)。●结论1.当归补血汤在高剂量下能改善大鼠学习记忆能力;2.高剂量的当归补血汤在270天时改善VD大鼠学习记忆能力最佳;3.最佳量效点的当归补血汤改善VD大鼠学习记忆能力的机制与调控海马CA1区星形胶质细胞,促进血管新生,营养和修复受损神经元有关。
【图文】：

图 4-1 左图为 VD 模型组，右图为 VD+高剂量当归补血汤 90 天组；在 100 倍荧光镜下显微镜观察：GFAP 阳性表达为绿色荧光，其表达在胞质部分，，复染 DAPI 的细胞核为蓝色；较治疗前 VD+当归补血 90 天组汤海马 CA１区 GFAP 表达的阳性反应细胞明显增多（p＜0.01）

图 4-1 左图为 VD 模型组，右图为 VD+高剂量当归补血汤 90 天组；在 100 倍荧光镜下显微镜观察：GFAP 阳性表达为绿色荧光，其表达在胞质部分，复染 DAPI 的细胞核为蓝色；较治疗前 VD+当归补血 90 天组汤海马 CA１区 GFAP 表达的阳性反应细胞明显增多（p＜0.01）
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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本文编号：2700639