柴胡疏肝散对功能性消化不良大鼠胃平滑肌细胞凋亡和NF-κB蛋白表达的影响

发布时间：2020-06-08 07:59

【摘要】：目的:探讨柴胡疏肝散对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠胃平滑肌细胞凋亡和NF-κB蛋白表达的影响,以进一步揭示疏肝理气法促胃动力机制。方法:将48只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、多潘立酮组及柴胡疏肝散低、中、高剂量组。除正常组外,其余五组均通过改良夹尾激惹刺激法制造FD大鼠模型,于造模同一天分别使用多潘立酮水溶液(0.3g·L-1)和柴胡疏肝散低、中、高剂量水煎剂(0.16g?mL-1,0.32g?mL-1,0.64g?mL-1)进行灌胃,在造模4周后,测定各组大鼠胃排空率,采用HE染色观察胃组织病理变化,利用透射电子显微镜观察大鼠胃平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC)线粒体形态,采用原位末端缺口标记法(TdT-mediated d UTP Nick-End Labeling,TUNEL)检测大鼠胃SMC凋亡情况;免疫组化法检测大鼠胃平滑肌细胞Bcl-2、Bax、NF-KB蛋白的表达。结果:各组大鼠胃组织病理学观察未见糜烂、溃疡、化生等器质性病变。透射电镜观察胃组织发现正常组大鼠胃SMC之间间隙正常,连接紧密,线粒体形态正常;模型组大鼠胃SMC间隙增宽,连接松弛,线粒体明显肿胀,亦可见凋亡小体;多潘立酮组和柴胡疏肝散低、中、高剂量组胃SMC间隙正常,连接紧密,线粒体肿胀减轻,凋亡小体减少。与正常组比较,模型组大鼠胃排空率显著降低(P0.05),细胞凋亡率显著增高(P0.05),胃平滑肌细胞Bcl-2表达显著减少(P0.05),Bax、NF-KB表达显著升高(P0.05);与模型组比较,柴胡疏肝散低、中、高剂量组和多潘立酮组大鼠胃排空率均显著升高(均P0.05),胃SMC线粒体损伤显著改善,细胞凋亡率和Bax、NF-KB表达水平均显著降低(均P0.05),Bcl-2表达水平则显著升高(P0.05);与多潘立酮组比较,柴胡疏肝散高剂量组胃排空率显著升高(P0.05),胃SMC凋亡率和Bax、NF-KB表达水平均显著降低(均P0.05),Bcl-2表达水平则显著升高(P0.05);柴胡疏肝散低、中、高剂量组间比较,中、高剂量组胃排空率和Bcl-2表达水平较低剂量组有显著升高(均P0.05),中、高剂量组胃SMC凋亡率、Bax、NF-KB表达水平较低剂量组显著降低(均P0.05)。结论:1.柴胡疏肝散可以降低FD大鼠胃平滑肌细胞的凋亡率,从而发挥促胃动力作用,其机制是通过上调Bcl-2的表达、抑制Bax的表达来调节线粒体途径的细胞凋亡来发挥作用。2.FD的发生、发展可能与胃平滑肌NF-κB蛋白的表达密切相关;柴胡疏肝散可以减少NF-κB蛋白的表达,抑制NF-κB凋亡信号通路异常激活导致的胃平滑肌的损伤,促进胃肠动力的恢复。
【图文】：

图 1 各组大鼠胃组织学变化（HE,×100）Fig.1 Group changes in histology of stomach in rats（HE,×100）A: 正常组 B：模型组 C：多潘立酮组 D：柴胡疏肝散低剂量组E：柴胡疏肝散中剂量组 F：柴胡疏肝散高剂量组3.3 各组大鼠胃 SMC 超微结构、线粒体的变化正常组大鼠胃 SMC 表面不平整，肌膜可见小凹，SMC 之间间隙正常，接紧密，胞质可见丰富的线粒体，线粒体形态正常，结构完整（A）。模组大鼠胃 SMC 间隙增宽，，连接松弛，溶酶体增多，内质网扩张，线粒体显肿胀，线粒体嵴模糊、断裂或消失，胞质亦可见凋亡小体(B)。多潘立

图 2 各组大鼠胃 SMC 线粒体超微结构(TEM,×50000)Fig.2 The ultrastructure of mitochondria of rat gastric SMC(TEM,×5000A:正常组 B：模型组 C：多潘立酮组 D：柴胡疏肝散低剂量组 E：柴胡疏肝散中剂量组 F：疏肝散高剂量组3.4 各组大鼠胃 SMC 凋亡率（表 2；图 3）与正常组比较，模型组大鼠胃 SMC 凋亡率显著高于正常组（P<0.05与模型组比较。多潘立酮组和柴胡疏肝散低、中、高剂量组胃 SMC 凋亡均有显著降低（P<0.05）；与柴胡疏肝散低剂量组比较，多潘立酮组和柴疏肝散中、高剂量组大鼠 SMC 凋亡率有显著降低（均 P<0.05）；柴胡疏肝中剂量组与柴胡疏肝散高剂量组比较无统计学意义。表 2 各组大鼠胃 SMC 的凋亡率( , x±s)Table 2 Group rates of gastric SMC apoptosis in rats( , x±s)组别 N 细胞凋亡率
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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本文编号：2702779