祛风活血丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠视网膜Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响

发布时间：2020-06-10 20:46

【摘要】：目的:通过观察祛风活血丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠视网膜Bcl-2、Bax和Caspase-3表达的影响,探讨祛风活血丸对EAU的疗效和作用机制。方法:将SPF级纯系健康雄性Lewis大鼠65只(130眼)根据随机数字表法随机抽取12只作为空白组,对剩余的53只大鼠进行主动免疫以建立EAU大鼠模型,其在大鼠右后腿内侧皮下注射含有视网膜光感受器间维生素A类结合蛋白(IRBP)和弗氏完全佐剂(FCA)的混合乳糜液。主动免疫后,每天在裂隙灯显微镜下观察眼部炎症反应,并参照Caspi评分标准进行炎症评分。在造模后第7天,从造模组大鼠中随机选择5只大鼠处死,取眼球制作病理切片,进行组织病理学检查。将造模成功的EAU大鼠按随机数字表法将其分为模型对照组、熊胆开明片组(阳性药物对照组)、祛风活血丸低倍组、祛风活血丸高倍组。连续灌胃给药14天,取大鼠视网膜组织,用qPCR法检测视网膜组织中Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的相对表达量,用Western Blot法检测视网膜组织中Caspase-3蛋白的相对表达量。结果:1.EAU大鼠模型建立:在造模组的大鼠主动免疫后第4天,裂隙灯显微镜下观察可见大鼠虹膜血管扩张、角巩膜缘血管充血,部分眼底红光反射减弱,眼部炎症评分(1.45±0.74)。第7天可见虹膜血管明显扩张充血、房水混浊、眼底红光反射明显减弱,部分可见瞳孔缘灰白色絮状物、前房积脓,眼部炎症评分(2.62±0.65)。大鼠眼球病理切片显示在角膜后、虹膜、睫状体和视网膜中有不同程度的炎症细胞浸润。以上表明在主动免疫后第7天成功建立了EAU大鼠模型。2.qPCR检测结果显示:与空白组相比:模型对照组Bcl-2 mRNA呈低表达(P0.05),Bax mRNA呈显著高表达(P0.01);与模型对照组比较:熊胆开明片组和祛风活血丸高倍组Bcl-2 mRNA均呈显著高表达(P0.01),祛风活血丸低倍组Bcl-2 mRNA表达未见明显变化(P0.05),熊胆开明片组和祛风活血丸高倍剂量组Bax mRNA均呈显著低表达(P0.01),祛风活血丸低倍剂量组Bax mRNA表达未见明显变化(P0.05)。3.Western Blot检测结果显示:与空白组相比:模型对照组Caspase-3呈显著高表达(P0.01);与模型对照组比较,祛风活血丸低倍组Caspase-3呈低表达(P0.05),熊胆开明片组和祛风活血丸高倍组Caspase-3均呈显著低表达(P0.01)。结论:1.通过采用IRBP抗原-完全弗氏佐剂主动免疫Lewis大鼠,可以成功建立EAU大鼠模型。2.祛风活血丸可以上调EAU大鼠视网膜组织中Bcl-2的表达,抑制Bax、Caspase-3的表达,说明Bcl-2、Bax和Caspase-3可能是祛风活血丸作用于EAU大鼠的靶点,从而改善EAU病理过程,以发挥治疗作用。3.祛风活血丸可能通过抑制葡萄膜炎的凋亡相关因子Bax、Caspase-3的表达,促进Bcl-2的表达,来发挥其抗炎作用。
【图文】：

空白组

造模第3天
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2706837