锁阳多糖体外免疫活性及多糖提取工艺优化研究

发布时间：2020-06-11 12:57

【摘要】：锁阳(CYNOMORII HERBA)是常用蒙中药材,以干燥肉质茎入药,具有益精血、补肾阳、润肠通便的功效。锁阳富含多糖等多种物质,研究表明锁阳多糖(Cynomorium songaricum polysaccharide,CSP)具有抗衰老和抗氧化等作用,而对其免疫活性研究甚少。B细胞是生命机体免疫的重要细胞之一,其通过分泌抗体在适应性免疫系统的体液免疫组分中起作用。本研究以锁阳为实验材料,通过酶解不同时间(1-5 h)得到锁阳多糖样品(CSP1-CSP5),在小试条件基础上,结合化学性质分析、红外光谱及扫描电镜对锁阳多糖中试提取工艺进行初步研究,为锁阳多糖中试生产提供理论依据。其次用得到样品(CSP1-CSP5)的不同浓度处理小鼠脾淋巴细胞,检测其对祖B细胞(Pro-B cell)、前B细胞(Pre-B cell)和未成熟B细胞(immature B cell)的增殖的影响。结果如下:(1)不同酶解时间获得的锁阳多糖对Pro-B、Pre-B、immature B细胞均有促进增殖的作用。CSP5对B细胞的作用较为明显,其中Pro-B细胞数量增幅在0.14%~0.29%,immature B细胞数量增幅在0.05~0.08%;而Pre-B细胞在低浓度处理下细胞数量下降了0.03%~0.36%,这可能是低浓度会促进Pre-B细胞向immature B细胞的发育。(2)随着酶解时间增加,锁阳多糖含量增加,与CSP1相比,其它锁阳多糖样品多糖含量分别增加了10.77%、19.88%、26.17%、32.38%;初步分离之后水淋洗部分多糖含量比粗多糖中多糖含量升高了。(3)锁阳多糖中试生产提取条件:酶解10 h、提取3次、提取3 h、酶用量5%;在此条件提取锁阳多糖得率为17.18%~20.26%,多糖含量为78.54%~89.76%,蛋白质含量为1.22%~1.8%;电镜扫描后发现原材料被破坏较为严重。
【图文】：

图 3.1 酶解 1 h 锁阳多糖 CSP1 的 DEAE-52 纤维素柱分离洗脱曲线Fig.3.1 Elution profiles of CSP1 by DEAE-52cellulose column酶解1 h用DEAE-52纤维素柱分离CSP1得到两个组分（图3.1），即水淋洗部分CSP1-D0和 0.1 mol/L NaCl 淋洗部分 CSP1-D1。图 3.2 酶解 2 h 锁阳多糖 CSP2 的 DEAE-52 纤维素柱分离洗脱曲线Fig.3.2 Elution profiles of CSP2 by DEAE-52 cellulose column

用不同浓度 NaCl 溶液洗脱得到的酸性多糖。以下是对不同处理锁阳粗多糖分离的结果图 3.1 酶解 1 h 锁阳多糖 CSP1 的 DEAE-52 纤维素柱分离洗脱曲线Fig.3.1 Elution profiles of CSP1 by DEAE-52cellulose column酶解1 h用DEAE-52纤维素柱分离CSP1得到两个组分（图3.1），即水淋洗部分CSP1- 0.1 mol/L NaCl 淋洗部分 CSP1-D1。
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284.2

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本文编号：2707940