溃结安康汤对溃疡性结肠炎大鼠肠道受损黏膜修复作用的机制研究

发布时间：2020-06-12 10:51

【摘要】：目的:一、探讨溃结安康汤治疗溃疡性结肠炎(UC)的理论基础;二、揭示溃结安康汤治疗UC大鼠肠道受损黏膜的修复机制。方法:本研究分为理论研究与实验研究。一、理论研究详尽地阐述了导师柳越冬教授对UC病因病机的认识,再以此为基础提出了治疗UC的基本原则,并对溃结安康汤进行方义解析及现代药理研究总结。二、实验研究本研究采用三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇二次致炎法建立UC大鼠模型,观察溃结安康汤对UC大鼠一般情况和结肠组织形态学的影响,并利用ELISA、RT-PCR、Western blot等检测技术分析溃结安康汤对UC大鼠TGF-β_1、bFGF、EGF、p-MEK、p-ERK的影响。结果:一、理论研究导师柳越冬教授认为UC是本虚标实之证,脾虚是其发病的基础,热毒内蕴是其发病的条件,瘀血是其病理产物,这与国内众医家对病因病机的认识相吻合。故主张以健脾益气、清热解毒、化瘀通络法为治则,拟用溃疡安康汤治疗UC。现代药理研究及以往实验研究表明,溃结安康汤具有抑制炎症、修复肠道损伤黏膜的作用。二、实验研究1.一般情况正常组大鼠饮食正常、大便正常、毛发柔顺有光泽、精神活动正常、体重呈逐渐上升趋势。两次致炎后,各造模组的大鼠均出现精神萎靡、毛发晦暗、水样便、鲜红色便血、食欲减退及体重下降等症状,给予溃结安康汤、SASP及补脾益肠丸治疗后,这三组大鼠的上述症状逐渐好转,均优于模型组。2.DAI评分与正常组相比,模型组DAI评分明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01)。与模型组相比,溃结安康汤组、SASP组DAI评分均有所降低,差异有显著统计学意义(P0.01);补脾益肠丸组给药第1 d、7 d的DAI评分差异无统计学意义(P0.05),给药第14 d、21 d的DAI评分明显降低,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组给药第1 d、7 d、21 d的DAI评分与SASP组相比,差异均无统计学意义(P0.05),明显低于补脾益肠丸组,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);。3.CMDI评分与正常组相比,模型组CMDI评分显著升高,差异有显著统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各治疗组CMDI评分均有所降低,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组的CMDI评分与SASP组相比,差异无统计学意义(P0.05),明显低于补脾益肠丸组,差异有统计学意义(P0.05)。4.组织病理学评分与正常组相比,模型组组织病理学评分明显增高,差异有显著统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各治疗组组织病理学评分明显降低,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组组织病理学评分与SASP组相比,差异无统计学意义(P0.05);明显低于补脾益肠丸组,差异有显著统计学意义(P0.01)。5.血清和结肠组织TGF-β_1含量与正常组相比,模型组大鼠血清和结肠组织中TGF-β_1含量明显降低,差异有显著统计学意义(P0.01)。各治疗组大鼠血清和结肠组织中TGF-β_1含量均高于模型组,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组大鼠血清和结肠组织中TGF-β_1含量与SASP组相比,差异无统计学(P0.05);明显高于补气益肠丸组,差异有显著统计学意义(P0.01)。6.结肠组织bFGF mRNA表达与正常组相比,模型组大鼠结肠组织bFGF mRNA相对表达量明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织bFGF mRNA相对表达量明显增高,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组大鼠结肠组织bFGF mRNA相对表达量与SASP组及补脾益肠丸组相比均明显增高,差异有显著统计意义(P0.01)。7.结肠组织EGF mRNA表达与正常组相比,模型组大鼠结肠组织EGF mRNA相对表达量明显降低,差异有显著统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织EGF mRNA相对表达量明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组大鼠结肠组织EGF mRNA相对表达量与SASP组相比,差异无统计学意义(P0.05),高于补脾益肠丸组,差异有统计学意义(P0.05)。8.结肠组织p-MEK、p-ERK蛋白表达与正常组相比,模型组大鼠结肠组织p-MEK、p-ERK蛋白表达明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01)。与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织p-MEK、p-ERK蛋白表达明显升高,差异有显著统计学意义(P0.01)。溃结安康汤组大鼠结肠组织p-MEK、p-ERK蛋白表达与SASP组相比,差异无统计学意义(P0.05);明显高于补脾益肠丸组,差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:一、理论研究脾虚是UC发病的基础,热毒内蕴是其发病的条件,瘀血是其病理产物,以健脾益气、清热解毒、化瘀通络为其基本治则,这是溃结安康汤治疗UC的理论基础。二、实验研究1.溃结安康汤能减轻UC大鼠肠道炎症溃结安康汤能有效地改善TNBS/乙醇二次致炎法诱导的UC模型大鼠的一般情况、结肠组织大体形态及光镜下结肠黏膜病理学变化,减轻肠道的炎症反应,促进结肠受损黏膜修复,从而达到治疗的目的。2.溃结安康汤能提高UC大鼠血清和结肠组织中TGF-β_1含量溃结安康汤通过上调UC大鼠血清和结肠组织中TGF-β_1的含量,来抑制炎症反应,以维持肠道黏膜免疫系统的平衡,从而促进溃疡愈合。3.溃结安康汤能提高UC大鼠结肠组织bFGF和EGF mRNA表达溃结安康汤通过上调bFGF和EGF mRNA在结肠组织的表达量,发挥bFGF、EGF两种生长因子的调控作用,刺激上皮细胞增殖及血管生成,保护肠道黏膜屏障,进而促进受损黏膜修复,最终达到治疗的目的。4.溃结安康汤能提高UC大鼠结肠组织p-MEK和p-ERK蛋白表达溃结安康汤能通过上调UC大鼠结肠组织p-MEK和p-ERK蛋白表达,激活MEK/ERK信号转导通路,进而导致肠道受损黏膜的修复。综上所述,溃结安康汤治疗UC的机制可能是通过上调TGF-β_1表达水平,提高bFGF、EGF基因表达,从而激活MEK/ERK信号转导通路,进而抑制肠道炎症反应,促进肠道受损黏膜修复,促使UC溃疡愈合。
【图文】：

图 1 各组大鼠不同时间体重变化表 5 首次致炎前、后体重变化比较（ x ± s）组别 首次致炎前 首次致炎第 3 d 首次致炎第 7 d 首次致炎第 14 d正常组 204.92 ± 6.42 219.00 ± 6.38 233.92 ± 5.85 263.17 ± 5.89模型组 201.00 ± 5.95 192.00 ± 6.16△200.10 ± 6.42△221.00 ± 6.15△SASP 组 203.00 ± 6.62 193.73 ± 6.71△202.09 ± 6.99△222.82 ± 6.95△补脾益肠丸组 203.17 ± 6.83 194.42 ± 6.97△202.82 ± 7.11△223.82 ± 7.37△溃结安康汤组 205.83 ± 9.00 197.50 ± 8.87△206.00 ± 8.78△226.83 ± 8.28△注：与正常组比，△P＜0.01表 6 二次致炎前、后体重变化比较（ x ± s）组别 二次致炎前 二次致炎第 3 d 二次致炎第 12 d 处死前正常组 259.83 ± 6.06 274.92 ± 6.24 320.25 ± 6.41 370.33 ± 7.139△△△△

辽宁中医药大学 2018 届博士学位论文P＜0.01）；补脾益肠丸组大鼠给药第 1 d、7 d 的 DAI 评分差异无统计学意义（P＞0.05药第 14 d、21 d 的 DAI 评分明显降低，差异有显著统计学意义（P＜0.01）。溃结汤组大鼠给药第 1 d、7 d、21 d 的 DAI 评分均明显低于补脾益肠丸组，差异有统计义（P＜0.01 或 P＜0.05）；与 SASP 组比较差异均无统计学意义（P＞0.05），，见图表 7。
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

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