基于p38 MAPK信号传导通路健骨方干预大鼠膝关节骨性关节炎的实验研究

发布时间：2020-06-15 04:51

【摘要】：膝骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)是一种以骨关节软骨退变,软骨下骨重建(增厚,骨萎缩,骨囊肿),韧带和半月板变性,关节囊肥大为特征的退行性骨关节疾病。中老年人中发病率和患病率居高不下,给其身体上和精神上带来诸多损害,严重者给日常生活带来诸多困扰,给社会、家庭增添了一定的负担。西医方法主要包括药物口服、物理治疗、关节腔注射、手术治疗等治疗方案。但是目前没有一种令人十分满意的治疗方法。健骨方为湖北中医大师李同生教授验方,能促进关节面的修复,采用健骨方治疗早中期KOA取得了较好的效果。前期兔实验模型研究结果表明健骨方能够减轻关节炎症,改善关节软骨功能,但其确切的作用机理有待深入研究。本项目围绕健骨方治疗鼠膝KOA前后组织形态、p38 MAPK的表达、Ⅰ、Ⅱ型胶原降解的过程,探讨健骨方治疗KOA影响p38MAPK信号转导延缓关节软骨退变的作用机制。目的:观察健骨方干预KOA模型对膝骨关节软骨的影响;健骨方干预KOA模型对软骨细胞中Ⅰ、Ⅱ型胶原分泌表达的影响;健骨方干预KOA模型对p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)表达的影响。方法:将雌雄大鼠采用随机数字表法随机分成四组,正常组即为假手术组+生理盐水灌胃、模型组即为手术组+生理盐水灌胃、健骨方组即为手术组+健骨方灌胃、阳性对照组为手术组+塞来昔布口服。治疗3个月后,断颈处死正常组、健骨方组、模型组及阳性对照组大鼠。分别取出右侧后肢膝关节软骨,镜下观察上述各组关节软骨形态学改变;用RT-PCR法分别检测关节软骨细胞中的Ⅰ、Ⅱ型胶原m RNA的表达,以了解健骨方对Ⅰ、Ⅱ型胶原的影响;用Western blot法检测关节软骨细胞中p38的含量的变化,了解健骨方对p38 MAPK信号转导通路中蛋白激酶的影响。结果:电镜结果我们发现模型组关节软骨组织红染表明坏死,而健骨方组关节软骨没有像模型组坏死而是关节软骨粗糙不平,形成溃疡,在少量的坏死区仍可见软骨基质。病理改变Mankin,s评分结果示:模型组与正常组、健骨方组与模型组比较差异都有统计学意义(p0.05,p=0.000);健骨方能够降低关节软骨细胞中的Ⅰ型胶原m RNA的表达,增加Ⅱ型胶原分泌表达;p38 MAPK磷酸化产物在各个组中均有表达,各组相比(p0.05,p=0.007),有统计学意义,说明骨性关节炎发病过程中确实引起了p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路的激活。健骨方组与模型组相比,健骨方组p38 MAPK磷酸化产物表达呈下降趋势。结论:健骨方对Hulth法建立的膝骨关节炎鼠模型的关节软骨损伤有明显的修复作用。膝骨关节炎的发病机制可能与p38MAPK介导的细胞信号通路密切相关。通过干预和调控p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路信号的表达和活性,将有希望成为治疗膝骨关节炎的一种新的有效途径。
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：

40图 4 不同组别大鼠 P-38 的相对表达结果（p38/GAPDH）5 讨论膝骨性关节炎(knee osteoarthritis KOA)是一种以骨关节软骨退软骨下骨重建（增厚，骨萎缩，骨囊肿），韧带和半月板变性，关节大为特征的退行性骨关节疾病[58]。膝关节骨性关节炎属于无菌性炎症是在发病的过程有多种炎症介质参与，并与关节基质以及外界作用力作用于软骨特定的受体，从而激活多种信号通路，传导到细胞核，从动基质分解酶和炎性基因，但目前并没有明确的标准提出膝骨性关节

【参考文献】

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本文编号：2713924