反式肉桂醛对脑缺血损伤保护作用的实验研究

发布时间：2020-06-23 17:56

【摘要】：目的通过观察反式肉桂醛(trans Cinnamaldehyde,TC)对缺血缺氧再灌注性脑损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法1.以ICR小鼠作为研究对象,通过建立大脑中动脉阻塞(MCAO)模型进行在体脑缺血实验研究。2.应用TTC染色法检测脑梗死体积。3.应用激光散斑成像仪检测反式肉桂醛对脑缺血损伤小鼠缺血侧大脑皮层血流灌注量的影响。4.以新生大鼠海马神经元作为研究对象,通过使用无糖培养液和物理性缺氧建立氧糖剥夺再灌注损伤模型进行体外脑缺血实验研究。5.采用MTT法、中性后染色法检测海马神经元存活率,采用紫外分光光度计法检测海马神经细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率。6.应用激光共聚焦显微镜,使用Fluo-3荧光探针及JC-1染料分别检测游离的钙离子含量和海马神经元内线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,MMP)水平。7.通过免疫蛋白印迹技术检测IKKα,IκBα,NFκB-p65,p-IKKα,p-IκBα,caspase-3,Bcl-2,和Bax的蛋白表达。结果1.与假手术组相比,模型组ICR小鼠脑梗死体积显著升高(p0.01);反式肉桂醛(30,60和120mg/Kg)剂量组与模型组相比,ICR小鼠脑梗死体积明显降低(p0.05,p0.01)。2.与假手术组相比,模型组ICR小鼠皮层局部血流量显著减少(P0.01);反式肉桂醛(30,60和120mg/Kg)组与模型组相比可明显提高小鼠ICR小鼠皮层局部血流量(p0.05,p0.01)。3.与正常组相比,模型组海马神经元存活率明显降低(p0.01)),乳酸脱氢酶的漏出率显著增加(与正常组比较p0.01);反式肉桂醛(0.1,1和10μmol/L)组与模型组相比,海马神经元的存活率显著升高(p0.05,p0.01,p0.001);乳酸脱氢酶漏出率显著降低(p0.05,p0.01)。4.与正常组相比,模型组海马神经元内游离的钙离子含量显著增多(P0.001),线粒体膜电位显著增高(p0.001);反式肉桂醛(0.1,1和10μmol/L)组与模型组相比,海马神经元内游离钙离子的含量显著降低(p0.05,p0.01),线粒体膜电位显著降低(p0.05,p0.01,p0.001)。5.与正常组相比,模型组海马神经元NFκB-p65,p-IKKα,p-IκBα,Bax和caspase-3的蛋白水平明显上调(P0.01);与模型组相比,反式肉桂醛(10μmol/L)能够显著下调NFκB-p65,p-IKKα,p-IκBα,Bax和caspase-3的蛋白的表达(p0.05)。另外与正常组相比,模型组海马神经元IκBα的蛋白水平显著下降(p0.01);与模型组相比,反式肉桂醛(10μmol/L)能够明显上调IκBα蛋白表达(p0.01)。此外各组海马神经元IKKα蛋白水平无显著性差异。结论1.反式肉桂醛对小鼠局灶性脑缺血损伤具有保护作用。2.反式肉桂醛对海马神经元氧糖剥夺再灌注损伤具有保护作用。3.反式肉桂醛可能通过NF-κB信号通路对海马神经元氧糖剥夺再灌注损伤产生保护作用。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：

图 1 TC 对小鼠脑缺血损伤脑梗死的影响（ x±s, n=6 ）(注：A.TTC 染色图；B.脑梗死率统计结果图)与 Control 组比较：##p<0.01；与 Vehicle 组比较： *p<0.05，**p<0.01

图 2 TC 对小鼠脑缺血损伤后大脑皮层血流灌注量的影响（ x±s, n=6 ）(注：A.大脑皮层血流灌注量彩色图像；B.大脑皮层血流灌注量减少比率统计结果图)与 Control 组比较：##p<0.01；与 Vehicle 组比较： *p<0.05，**p<0.01

【参考文献】

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本文编号：2727695