有氧运动联合四君子汤对肝癌小鼠术后免疫功能影响的实验研究

发布时间：2020-07-01 22:45

【摘要】：第一部分:不同阶段有氧运动干预对肝癌小鼠术后一般状态和免疫功能的影响目的:通过设定有氧运动干预的不同时间节点,以术前4周和术后第7天为运动介入时机,探讨不同阶段有氧运动干预对模型小鼠一般状态和免疫功能影响的差别及相关机制。方法:构建小鼠肝脏原位种植瘤切除术及运动模型,观察不同阶段有氧运动干预对肝癌术后小鼠自发活动度、肝肾功能、死亡率、肺转移发生率、脏器指数的影响,流式细胞术检测外周血及脾脏淋巴细胞CD4+/CD8+比例,检测脾脏淋巴细胞增殖能力,对脾脏淋巴细胞进行蛋白质印迹法检测,探讨相关分子机制。结果:1.术后对照组小鼠自发活动总路程小于正常组小鼠,差异有统计学意义(P0.05);后期运动组与全程运动组小鼠自发活动总路程均大于术后对照组小鼠,除后期运动组外,差异有统计学意义(P0.01)。2.各组小鼠ALT、AST均高于正常组小鼠,除术后对照组外,其余各组差异无统计学意义。各组小鼠TP、A/G比值均低于正常组小鼠。各组小鼠血尿素氮与正常组小鼠相比,差异无统计学意义。术后对照组血尿酸与正常组小鼠相比,差异有统计学意义(P0.01),其余各组差异无统计学意义。前期运动组、后期运动组、全程运动组小鼠血尿酸均低于术后对照组小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。3.运动各组小鼠术后死亡率和肝癌肺转移发生率均低于术后对照组。4.各组小鼠脾脏指数均大于正常组小鼠,除后期运动组、全程运动组外,差异有统计学意义(P0.01)。各组小鼠胸腺指数均大于正常组小鼠,差异无统计学意义。5.术后对照组小鼠外周血和脾脏T淋巴细胞CD4+/CD8+比值均小于正常组小鼠,差异有统计学意义(P0.05),后期运动组、全程运动组与正常组相比,差异无统计学意义。全程运动组小鼠外周血和脾脏T淋巴细胞CD4+/CD8+比值均大于术后对照组,差异有统计学意义(P0.05)。术后各组小鼠脾脏淋巴细胞增殖水平均高于正常组小鼠,差异有统计学意义(P0.05)。6.运动各组小鼠脾脏淋巴细胞中Beclin1表达均较术后对照组升高,前期运动和后期运动组小鼠脾脏淋巴细胞LC3-Ⅱ表达较术后对照组升高;运动各组小鼠脾脏淋巴细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2表达均较术后对照组增加,后期运动组小鼠抗凋亡蛋白Bcl-x L较术后对照组增加;术后对照组小鼠脾脏淋巴细胞中Caspase-3及Cleaved Caspase-3表达水平高于其余各组小鼠。结论:不同阶段有氧运动干预均能在一定程度上改善肝癌小鼠术后一般状态和免疫功能,且以术前联合术后运动干预效果最为显著;不同阶段有氧运动干预促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖的机制可能与促进脾脏淋巴细胞自噬、抑制脾脏淋巴细胞凋亡有关。第二部分:有氧运动联合四君子汤对肝癌小鼠术后一般状态和免疫功能的影响目的:通过设定术后运动干预方案,与四君子汤联合运用,探讨有氧运动联合四君子汤对肝癌小鼠术后一般状态和免疫功能影响的差别及相关机制。方法:构建小鼠肝脏原位种植瘤切除术模型,采用有氧运动和四君子汤联合干预,观察对肝癌术后小鼠自发活动度、肝肾功能、死亡率、肺转移发生率、脏器指数的影响,流式细胞术检测外周血及脾脏淋巴细胞CD4+/CD8+比例,检测脾脏淋巴细胞增殖能力,对脾脏淋巴细胞进行蛋白质印迹法检测,探讨相关分子机制。结果:1.除运动组外,其余各组小鼠自发活动总路程均小于正常组小鼠,差异有统计学意义(P0.01);中药组、运动组和中药加运动组自发活动总路程均大于术后对照组小鼠,经统计学分析,差异有统计学意义(P0.01)。2.各组小鼠ALT、AST均高于正常组小鼠,差异有统计学意义(P0.01);中药组、运动组、中药加运动组小鼠ALT、AST均低于术后对照组小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。中药组、运动组、中药加运动组小鼠TP均高于术后对照组小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。各组小鼠A/G比值均低于正常组小鼠,差异有统计学意义(P0.01)。除中药加运动组小鼠血清尿素氮与正常小鼠差别有统计学意义(P0.05),其余各组小鼠血清尿素氮和尿酸与正常小鼠相比,差异无统计学意义。3.中药组、运动组及中药加运动组小鼠术后死亡率和肝癌肺转移发生率均低于术后对照组。4.各组小鼠脾脏指数均大于正常组小鼠,经统计学分析,差异有统计学意义(P0.01);各组小鼠胸腺指数均大于正常组小鼠,差异无统计学意义。5.术后四君子汤及术后运动干预均可提高术后小鼠外周血及脾脏淋巴细胞CD4+/CD8+比值,促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖,且以有氧运动联合四君子汤干预组效果最优。6.运动组及中药加运动组小鼠脾脏淋巴细胞中Beclin1、LC3-Ⅱ表达均较术后对照组升高,中药组Beclin1、LC3-Ⅱ表达水平未见明显升高。中药组小鼠脾脏淋巴细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-x L表达水平高于术后对照组小鼠,Caspase-3及Cleaved Caspase-3表达水平低于术后对照组小鼠。运动组Bcl-2表达水平高于术后对照组,Caspase-3及Cleaved Caspase-3表达水平低于术后对照组。中药联合运动组Bcl-2表达水平高于术后对照组小鼠,而Bcl-x L、Caspase-3及Cleaved Caspase-3表达水平与术后对照组无明显差别。结论:术后四君子汤干预及术后有氧运动干预均能在一定程度上改善肝癌小鼠术后一般状态和免疫功能,且以有氧运动联合四君子汤干预组效果最优。四君子汤干预促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖机制可能有抑制淋巴细胞凋亡有关;有氧运动联合四君子汤干预可能通过促进淋巴细胞自噬的发生促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖,其具体机制有待进一步研究。
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：

Fig2-5 .Changes of A/G rate content in mouse serum肾功能2-3 和图 2-6、2-7 所示，除中药加运动组小鼠血清 BUN 与正常小鼠义（P<0.05）,其余各组小鼠血清 BUN 和 UA 与正常小鼠相比，差异2-3：The peripheral blood renal function index of mice between difX ± S , n=5） BUN(mmol/L) UA(μmol/Ll 16.98±4.46 95.40±42.06l 14.59±1.02 114.47±28.3 13.44±2.68 104.40±21.015.41±2.15 91.81±26.09 EX 12.58±3.42* 90.08±30.40

二军医大学硕士学位论文5.有氧运动联合四君子汤对肝癌小鼠术后脾脏淋巴细胞自噬相关蛋白及凋号通路的影响取各组小鼠脾脏淋巴细胞进行体外培养 24h后，提取脾脏淋巴细胞总蛋白进行 western bolt 检测自噬标志蛋白 Beclin 1、LC3Ⅰ/Ⅱ、P62 和凋亡相关白 Caspase-3、Cleaved Caspase-3 及抗凋亡蛋白 Bcl-2、Bcl-xL 的表达情况

【参考文献】

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1 施胜英;林海桢;周n

本文编号：2737376