升降散对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠免疫炎性因子及Nogo-A的影响

发布时间：2020-07-02 10:31

【摘要】：目的:通过观察升降散对自身免疫性脑脊髓炎大鼠临床症状、病理改变、以及免疫炎性因子和Nogo-A水平的影响,来探讨它对该病的抗炎效果和神经保护作用,从而为多发性硬化的治疗提供实验依据。方法:将32只WWistar雌性大鼠分成正常组、模型组、激素组、中药组,利用豚鼠脊髓匀浆作为大鼠致敏抗原,制成EAE模型。正常组、模型组以生理盐水灌胃,激素组以及中药组分别予醋酸泼尼松、升降散灌胃。用药从造模当天开始,并每天给大鼠称重、进行神经功能评分。用药16天后将大鼠处死并收集血清及脑脊髓组织。ELISA法测定血清中IL-33和IL-35含量,QPCR法检测脑和脊髓中TLR-4的表达,免疫组化法观察脊髓组织中Nogo-A含量,进行HE组织染色观察组织炎性浸润程度。结果:神经功能评分:正常组大鼠神经功能评分始终为0,其余三组大鼠的神经功能评分在实验前期先逐渐下降,其后有出现缓慢回升的趋势。相比于正常组,三个EAE组的大鼠评分更高,各组间差异具有统计学意义(P0.05)。相比于模型组,治疗组的神经功能评分更低,组间差异也有统计学意义(P0.05)。而中药组评分相对较激素组更低(P0.05)。潜伏期:相比于模型组,治疗组大鼠的潜伏期明显更短,组间差异有统计学意义(P0.05)。而中药组则明显较激素组更短(P0.05)。高峰期:各组大鼠发病的高峰期在统计学上却无明显差异(P0.05)。体重:正常组大鼠的体重一直持续增长,其余三组大鼠体重均在前期出现下降,在后期则缓慢回升。体重下降值:激素组与模型组比较,大鼠体重下降的差异并不明显(P0.05),而中药组下降的数值则明显较模型组少,且两者差异有统计学意义(P0.05)。IL-33:与正常组作对比,三个EAE组大鼠的IL-33含量均升高,其差异都有统计学意义(P0.05)。而两个治疗组与模型组比较,各自的含量均明显更低,差异也有统计学意义(P0.05)。但两个治疗组之间比较却无明显差异。IL-35:与正常组作对比,三组EAE大鼠的IL-35含量明显降低,其组间差异有统计学意义(P0.05)。而两个治疗组与模型组比较,治疗组的含量更高,组间差异亦有统计学意义(P0.05)。但两个治疗组之间比较却无明显差异。TLR-4:与正常组作对比,三组EAE大鼠的TLR-4含量明显升高,其差异有统计学意义(P0.05)。两个治疗组的含量明显低于模型组,其差异也有统计学意义(P0.05)。然而两个治疗组之间比较却无明显差异。Nogo-A:与正常组比较,三组EAE大鼠的Nogo-A含量明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。相比于模型组,我们发现两个治疗组的含量相对较低,组间差异具有统计学意义(P0.05)。然而两个治疗组之间比较却无明显差异。HE染色:三组EAE大鼠组织切片中均出现了不同程度的炎细胞浸润及髓鞘脱失。与正常组比较,三组EAE大鼠的病理评分明显更高,其差异具有统计学意义(P0.05)。两个治疗组与模型组比较,其HE评分均明显更低,各者之间差异有统计学意义(P0.05)。然而中药组与激素组之间则无明显差异。结论:升降散可以延迟EAE大鼠的发病及减轻疾病的严重程度,此外还能降低EAE大鼠IL-33的含量,减少神经组织中TLR4和Nogo-A的表达,并同时提升IL-35的含量。上述结果均说明升降散具有减轻EAE的炎症反应和保护中枢神经系统受损伤的作用,这提示升降散具备治疗多发性硬化的潜力。
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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