基于“虚—瘀—痰”病机探讨竹节参对AD大鼠认知功能及突触的作用

发布时间：2020-07-02 15:26

【摘要】：目的本文旨在从中医“虚-瘀-痰”这一病机探讨竹节参水煎液对Aβ_(25-35)诱导的AD模型大鼠学习记忆功能及脑海马突触相关蛋白表达的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法(1)理论研究:通过查阅文献、回顾中医经典对AD致病机理的了解,结合课题组研究成果,深化对本病病机理论的认识。(2)实验研究:将60只3月龄的SD大鼠随机分为假手术组、模型组、西药组、竹节参低剂量组、竹节参中剂量组、竹节参高剂量组。运用Aβ_(25-35)双侧海马注射进行造模,予以相应剂量的竹节参水煎液、盐酸多奈哌齐、ddH_2O灌胃28天。用Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)实验检测用药前后AD模型大鼠空间学习记忆能力的变化情况。用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组AD模型大鼠脑海马组织中β淀粉样蛋白42(Aβ_(1-42))表达含量的变化情况。运用western blot检测各组AD模型大鼠脑海马组织中β位点APP分泌酶1(BACE-1)、Synaptophysin、SynapsinⅠ及突触后密度蛋白-95(PSD-95)的表达情况。用免疫组化法(IHC)检测各组AD模型大鼠脑海马CA1区、CA3区的PSD-95蛋白表达情况。结果(1)空间探索实验结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠在目标象限游泳的时间明显缩短(P0.01),大鼠穿越原平台放置区次数显著减少(P0.01),第一次穿越平台时间明显较长(P0.01);竹节参治疗组与模型组比较,大鼠在目标象限游泳的时间明显延长(P0.05),大鼠穿越原平台放置区次数显著增加(P0.05),第一次穿越平台时间明显缩短(P0.05);各治疗组与西药组比较,差异不明显;各组大鼠全程游速比较未见明显差异(P0.05)。(2)ELISA法结果显示,与假手术组比较,模型组海马组织Aβ_(1-42)升高(P0.01);竹节参治疗组,与模型组相比,竹节参中、高组显著下降(P0.05);竹节参各个剂量组与西药组比较,差异不明显(P0.05)。(3)Western blot法测BACE-1、Synaptophysin、SynapsinⅠ、PSD-95蛋白在海马的表达,结果显示,模型组与假手术组比较,BACE-1升高(P0.01),Synaptophysin、SynapsinⅠ、PSD-95均显著降低(P0.01)。竹节参治疗组与模型组比较,竹节参中、高剂量组BACE-1明显降低(P0.01),竹节参各剂量组的Synaptophysin含量显著增多(P0.05),竹节参各剂量组SynapsinⅠ含量显著升高(P0.01),竹节参中、高剂量组PSD-95含量显著增加(P0.01)。竹节参各剂量组与西药组比较差异不明显(P0.05)。(4)IHC法检测结果显示,与假手术组比较,模型组海马CA1和CA3区PSD-95蛋白含量显著下降(P0.01);竹节参治疗组与模型组比较,竹节参中、高剂量组的CA1区和CA3区PSD-95表达显著增加(P0.05);竹节参高治疗组CA1区与西药组比较差异不明显(P0.05);竹节参中、高治疗组CA3区与西药组比较差异不明显(P0.05)。结论(1)机体正气亏虚,诸脏腑功能失调,痰瘀痹阻脑窍,终致髓减脑消,神机失用,为老年性痴呆的重要致病机理。(2)竹节参可改善Aβ_(25-35)诱导的AD模型大鼠学习与记忆功能。(3)竹节参可降低Aβ_(25-35)诱导的AD模型大鼠脑海马组织中BACE-1、Aβ_(1-42)的表达,其可能原因为通过降低BACE-1的途径使得Aβ_(1-42)的生成减少或加速其清除,起到神经保护作用。(4)竹节参可上调Aβ_(25-35)诱导的AD模型大鼠脑海马组织中突触蛋白SynapsinⅠ、Synaptophysin及PSD-95蛋白的表达,增强其突触功能,这可能是竹节参改善Aβ_(25-35)诱导的AD模型大鼠认知功能障碍的机制。
【学位授予单位】：湖北民族大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

APP的切割途径[39]

a：实验大鼠第五天的游泳轨迹Figure3-1a:Routemapofratswimmingtrajectoryinthefifthday

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本文编号：2738359