诃子成分五没食子酰葡萄糖及其联合5-FU对HepG2细胞的抑制和机理研究

发布时间：2020-07-02 15:56

【摘要】：诃子因其自身成分种类繁多,药理活性丰富,因此常用于治疗多种疾病,在藏药和蒙药中有“药中之王”之称。五没食子酰葡萄糖(PGG)是诃子中天然多酚化合物之一。已有报道证明PGG具有抗癌活性,但其抗肝癌活性作用机理不甚清楚,与临床药物的联合作用也没有研究。现在天然药物成分与化疗药物联合治疗是肿瘤治疗中的热点,这种联合治疗可以降低常规化疗药物的作用浓度。因此本研究主要探究诃子中的PGG及其联合5-FU对肝癌细胞Hep G2的影响和作用机理,为蒙药资源的开发、天然产物抗癌成分的临床应用提供科学依据。应用现代色谱和光谱技术,从诃子中分离鉴定出6个化合物:荭草素(orientin,1);鞣云实精(corilagin,2);诃子酸(chebulinic acid,3);五没食子酰葡萄糖(pentagalloyl glucose,PGG,4);1,3,6-三-O-没食子酰葡萄糖(1,3,6-tri-O-galloyl-β-D-glucopyranose,5);11,12-诃子裂酸二甲酯(11,12-dimethylchebulate,6)。利用分子生物学和细胞生物学技术,发现PGG依赖量效和时效关系抑制HepG2细胞增殖。PGG处理后,Bcl-2、Bcl-x/l、XIAP、p62、PI3K、Akt和p-Akt表达下调,Bax、AIF、Atg13和Atg14表达上调。因此PGG诱导细胞凋亡和细胞自噬,抑制PI3K/Akt信号通路,同时还抑制肝癌细胞Hep G2的迁移侵袭能力。与单一用药相比,PGG和5-FU联合用药更好地抑制了HepG2细胞增殖,效果呈现浓度依赖性;上调Bax/Bcl-2比例,活化caspase-3和caspase-9;P27、cyclinB1表达升高,cyclin E1和Akt表达降低,协同诱导HepG2细胞凋亡,降低线粒体膜电位,G1期阻滞;同时联合用药协同抑制HepG2细胞的侵袭和迁移能力。联合用药降低MDR1、LRP1的表达,有逆转5-FU耐药性的潜力。总之,诃子成分PGG抑制肝癌HepG2细胞的增殖,与5-FU联用后,增强了HepG2细胞对5-FU的敏感性,减少了5-FU的用量,提示PGG有临床应用价值。
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284;R285
【图文】：

分离过程,甲醇,化合物,洗脱

2250 g 浸膏。取 1000 g 浸膏过大孔树脂，依次得到纯水（Fr1）、50％甲醇（（Fr3）三个洗脱部分。Fr2 经 Sephadex LH-20 等度洗脱（50%甲醇和 80%甲 7 个部分（Fr2.1-2.7）。Fr2.3（50%甲醇洗脱部分）得到化合物 2（16 mg），%甲醇洗脱部分）分别得到化合物 4（7 mg）和 3（17 mg）。Fr2.1（50%甲醇洗DS 纯化，水：甲醇=100：0～0：100 洗脱，3%甲醇洗脱部分得到化合物 6（5 m%甲醇洗脱部分）经 ODS 纯化，甲醇等度洗脱得到化合物 1（10 mg）。Fr2.4（部分）经 ODS 纯化，水：甲醇=100：0～0：100 洗脱，15%甲醇洗脱部分得到g）。Fr2.5（80%甲醇洗脱部分）经 ODS 纯化，水：甲醇=100：0～0：100 洗脱部分得到化合物 5（2 mg）。图如图 2.1 所示。

诃子成分五没食子酰葡萄糖及其联合5-FU对HepG2细胞的抑制和机理研究

种诃合物的构

【参考文献】