HNYSPJ60对大鼠醋酸型慢性胃溃疡的治疗作用和机制研究

发布时间：2020-07-03 13:58

【摘要】：胃溃疡是最常见的上消化道疾病,具有较高的发病率和复发率。关于胃溃疡的发病机制仍未完全阐明。目前广泛认可的是胃黏膜攻击因子(胃酸和胃蛋白酶等)和防御因子(粘液和重碳酸盐等)失衡学说。此外,非甾体抗炎药(NSAIDs)的滥用、不良的饮食习惯、吸烟酗酒、应激以及幽门螺杆菌感染都会导致胃溃疡的发生。HNYSPJ60是从楹树树皮中分离得到的提取物,前期研究结果显示该提取物具有改善大鼠胃溃疡的作用。本研究采用醋酸致大鼠慢性胃溃疡模型,连续灌胃给药12天,通过观察大鼠一般行为状态和胃组织形态以及测定胃溃疡面积,评价HNYSPJ60的抗慢性胃溃疡的作用。实验结果显示,HNYSPJ60(200 mg·kg-1,i.g.)治疗12天可以显著逆转醋酸损伤引起的胃组织结构破坏,使溃疡面积减少38.4%(P0.05)。炎症反应在胃溃疡的发生过程中发挥重要作用。在大鼠醋酸型慢性胃溃疡中,中性粒细胞和巨噬细胞会在粘膜损伤部位聚集,进而释放大量促炎症细胞因子,如TNF-α、IL-6、IL-1β等,从而加重胃溃疡。JNK和p38属于应激活化的MAPK,在炎症反应中发挥重要的作用。实验结果显示,与模型组大鼠相比,连续给予HNYSPJ60(200 mg kg-1 i.g.)3天后,胃组织中TNF-α和IL-6的浓度分别降低43.8%(P0.01)和 32.7%(P0.01),MPO 活性降低 37.3%(P0.01),p38 磷酸化水平显著下调,而JNK磷酸化水平、p38及JNK总蛋白水平均没有明显改变。溃疡愈合主要涉及到上皮细胞增生,表皮再生,腺体重建,肉芽组织形成,新生血管形成,各种细胞和细胞基质间的相互作用等。细胞大量增殖可提供粘膜表面上皮结构,重建粘膜腺体,对溃疡愈合过程至关重要。PCNA是DNA多聚酶δ的辅助因子,可以作为细胞增殖标记物。Western blot结果显示,与正常对照组相比,醋酸损伤12天后大鼠胃组织中PCNA蛋白表达量明显增加,HNYSPJ60(200 mg·kg-1,i.g.)治疗12天后PCNA蛋白表达量进一步增加。细胞因子和生长因子在溃疡愈合过程中发挥重要的调控作用。EGF与其细胞表面的特定受体EGFR结合后,能够刺激细胞增殖和迁移进而促进伤口愈合。Ras/Raf/ERK1/2通路是EGFR所介导的下游信号通路之一,在细胞增殖过程中发挥重要作用。Western blot结果显示,与正常对照组相比,醋酸损伤12天后大鼠胃组织中p-ERK1/2蛋白表达无明显变化。HNYSPJ60(200mg·kg-1,i.g.)治疗12天可以显著提高胃组织中p-ERK1/2蛋白水平。各组间ERK1/2蛋白表达量无明显差异。为了探究ERK1/2上游信号通路,我们选择给药7天作为取材时间点。Western blot结果显示,模型组大鼠胃组织中p-MEK1/2、p-c-Raf和EGFR蛋白表达无明显变化,EGF蛋白表达明显减少。与模型组相比,HNYSPJ60(200mg·kg-1,i.g.)治疗7天后大鼠胃组织中p-MEK1/2、EGF和EGFR蛋白明显增加,p-c-Raf蛋白以及MEK1/2和c-Raf总蛋白表达量均无明显差异。免疫组化结果显示,与正常对照组相比,EGF和EGFR在模型组大鼠胃腺基底部表达为弱阳性。HNYSPJ60(200mg·kg-1,i.g.)治疗7天后,EGF和EGFR在溃疡边缘增殖带和胃腺体底部大量表达。综上所述,HNYSPJ60(200 mg·kg-1,i.g.)可以有效地改善大鼠醋酸型慢性胃溃疡,其作用机制可能是通过抑制p38炎症信号通路的过度激活从而减轻溃疡形成期胃组织炎症反应;同时HNYSPJ60(200mg·kg-1,i.g.)还可以激活EGF-R-ERK信号通路从而促进溃疡愈合期大鼠胃组织中细胞的增殖过程。
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

【参考文献】