青娥方及复方党参方的药学研究

发布时间：2020-07-05 11:37

【摘要】：本论文的研究聚焦于经典复方青娥方和经方复方党参方。青娥方是出自《太平惠民和剂局方》的经典名方,由杜仲(盐制)、补骨脂(盐制)、核桃仁(炒制)和大蒜四味中药组成。方中各单味药对学习记忆的保护作用的研究已有报道,但是关于青娥全方及其不同配伍对学习记忆方面的影响却鲜有报道。复方党参方是一个经方,由党参、当归、枸杞、天门冬、酒大黄组成,经长期临床证实具有抗氧化、抗衰老等功能。本论文的目的之一是研究经典复方青娥方不同配伍对东莨菪碱模型小鼠学习记忆的改善作用;另一目的是基于复方党参方的抗氧化功能的保健食品的研究。因此,本论文主要开展了如下工作:(一)青娥方不同配伍对东莨菪碱模型小鼠学习记忆的改善作用青娥方及其不同拆方(杜仲、杜仲+补骨脂、杜仲+核桃仁、杜仲+大蒜,杜仲+补骨脂+核桃仁+大蒜、补骨脂)各按经典复方配比,采用75%乙醇加热回流提取,制得提取物。6个药物配伍组,阳性组及模型组和空白对照组小鼠分别灌胃相应的药物2周后,东莨菪碱造模,研究各配伍药物对模型动物学习和记忆的影响。结果发现,除杜仲+核桃仁外,其余配伍组均能不同程度延长模型小鼠在跳台实验中的学习记忆潜伏期(P0.05或P0.01);同时六种配伍提取物均能明显降低模型小鼠在Morris水迷宫中的逃逸潜伏期(P0.05或P0.01),显著增加模型小鼠在目的象限滞留时间百分比(P0.05或P0.01),升高目的象限运动距离百分比(P0.05或P0.01)。进一步机制研究发现,青娥方不同配伍组可显著降低小鼠海马区域AChE活性(P0.01),增加BDNF的含量。其中以青娥全方的改善效果最为显著。青娥方及其配伍组均具有改善东莨菪碱致小鼠短暂记忆障碍的效果,且全方效果优于两两配伍组和君药杜仲组及臣药补骨脂组。该研究从青娥方对学习记忆的改善效果及其机制方面证实了其配伍的的合理性。(二)复方党参胶囊的药学研究(1)提取工艺研究:采用L9(34)正交设计,以总多糖、总黄酮、总皂苷含量为指标,优选最佳的复方党参方提取工艺。优选的提取工艺为:药材按处方配比混合后,以8倍量水浸泡4 h,提取3次,三次加水量分别为8,6,6,1 h/次。该工艺条件下,提取率可达到47.16%,提取物中总多糖含量为700.05mg/g,总黄酮含量为12.27mg/g,总皂苷含量为111.88mg/g。(2)提取物体外抗氧化研究:研究复方党参方提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(dpph)、羟自由基(·oh)、超氧阴离子自由基(o2-·)的清除能力,结果发现复方党参方提取物在0.04~1.23mg/ml浓度范围内,对三种自由基均有清除能力,且随着浓度的增大,清除能力增强。(3)剂型的选择及制剂工艺研究:按拟定的胶囊剂进行实验设计。以提取物和不同辅料组成的混合物的吸湿百分率为指标确定辅料的类型和比例;以成型率及制粒难易度为指标,筛选制剂最佳的成型工艺。最终确定的辅料为微晶纤维素:糊精为1:3,且药:辅比为1.5:1时,以60%乙醇为润湿剂,制得的囊心物流动性较小,满足生产需求。因此优选的制剂工艺为:以1.5:1的比例加入辅料(微晶纤维素:糊精=1:3),加60%乙醇作为润湿剂,20目筛制粒,80℃干燥,整粒,装囊。(4)质量标准研究:从定性鉴别、含量测定及检查三方面对复方党参胶囊进行质量控制研究。结果在薄层色谱鉴别中制剂中的当归、枸杞子、大黄斑点清晰,准确,且阴性无影响;在检查中,水分,装量差异及崩解时限均符合《中国药典》2015年版的相关要求;在含量测定中,作为制剂中定量指标的有效成分还原糖、总黄酮及总皂苷的平均含量分别为:23.20g/100g,8.71mg/100g,1.20g/100g。(5)抗氧化功能评价:按照《保健食品检验与评价技术规范(2003版)》中抗氧化功能检验的方法,分别研究了复方党参胶囊对d-半乳糖致衰老模型小鼠和60coγ射线辐照模型小鼠血清及肝脏中丙二醛(mda)水平、总超氧化物歧化酶(t-sod)和谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)活性的影响。结果发现在d-半乳糖衰老模型中,复方党参胶囊的中(1.2g/kg)、低剂量(0.6g/kg)均能明显提高小鼠血清和肝脏中t-sod活性(p0.05或p0.01),显著提高血清中gsh-px活性(p0.05或p0.01),显著降低肝组织中mda含量(p0.01);高剂量(2.4g/kg)能显著降低血清和肝脏中mda含量(p0.05或p0.01),同时显著提高血清中t-sod活性(p0.01)。在60coγ辐照模型中,复方党参胶囊的高剂量能够显著升高模型小鼠血清和肝脏中的gsh-px活性(p0.05或p0.01),同时还可以显著降低模型小鼠肝脏中mda含量(p0.01)和提高t-sod活性(p0.05)。中剂量能够显著提高肝脏中gsh-px活性和降低mda含量(p0.01)。按保健食品抗氧化功能评价中动物实验结果的判定标准,可证实该复方党参胶囊具有抗氧化保健功能。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：

兰州大学硕士学位论文 青娥方及复方党参方的药学研究1.4 研究内容1.4.1 青娥方不同配伍对东莨菪碱模型小鼠学习记忆的改善效果考虑到青娥方各组分均具有改善学习记忆的作用，但青娥方全方改善学习记忆的研究报道较少。因此本论文拟研究青娥方及其各配伍组对东莨菪碱致小鼠学习记忆的改善作用以及其配伍的合理性。具体研究内容包括：昆明小鼠随机分为 9 组：⑴空白组；⑵模型组；⑶阳性组；⑷杜仲组；⑸杜仲＋补骨脂组；⑹杜仲＋核桃仁组；⑺杜仲＋大蒜组；⑻杜仲＋补骨脂＋核桃仁＋大蒜组；⑼补骨脂组；空白组和模型组灌胃等量自来水，各治疗组灌胃给予相应的配伍提取液 2 g/kg。从第 15 天开始，用氢溴酸东莨菪碱造模，并进行行为学实验；在行为学实验结束后，取各组小鼠的海马区，检测海马区乙酰胆碱酯酶的活性和脑源性神经营养因子的含量的变化，以此探讨青娥方不同配伍对学习记忆影响的机制（技术路线图见图 1-1）。

大学硕士学位论文 青娥方及复方党参方的药学研究3.以吸湿百分率为指标确定辅料的类型和比例；以成型率及制粒难易度为指筛选最佳成型工艺条件。4.根据国家相关部门对中药新药的管理规定，从定性鉴别、含量测定及检查面对复方党参胶囊的质量控制内容进行试验研究。5.以 D-半乳糖和辐照的方式制造衰老模型，给予相应的药物治疗后，观察模物体内 MDA 含量、SOD 和 GSH-Px 活力的变化，确定复方党参胶囊的功效。技术路线见图 1-2。

【参考文献】

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本文编号：2742556