大叶蛇葡萄总黄酮提取物抗肿瘤作用及其机制研究

发布时间：2020-07-07 05:56

【摘要】：大叶蛇葡萄Ampelopsis megalophylla Diels et.Gilg为葡萄科蛇葡萄属植物,其药用部位是叶及嫩茎。味酸涩、性平,具有清热凉血等功效。主要分布于我国湖北、陕西、云南等地,是湖北恩施地区的民间药用植物,曾收载于《湖北中草药志》。课题组前期经渗漉法得到了大叶蛇葡萄总黄酮提取物。本实验采用MTT法对大叶蛇葡萄总黄酮提取物进行了体外抗肿瘤活性的研究。结果表明其对人宫颈癌Hela、肺癌A549、乳腺癌MCF-7、肝癌HepG2、卵巢癌A2780及结肠癌SW620六种肿瘤细胞均有一定的增殖抑制作用,并呈现一定的浓度、时间依赖性。其中较为敏感的细胞株有MCF-7、A2780、和SW620,IC50分别为28.47、18.41和21.85μg·mL-1。在此基础上,以人乳腺癌MCF-7细胞为模型,运用Hoechst33258荧光染色法、PI单染法及Annexin V-FITC/PI双标记法进一步研究大叶蛇葡萄总黄酮提取物体外抗肿瘤作用,同时运用Rh-123染色法及蛋白免疫印迹法对其诱导MCF-7细胞凋亡的机制进行了探讨。实验结果表明,大叶蛇葡萄总黄酮提取物可诱导MCF-7细胞凋亡,33258染色可在荧光倒置显微镜下观察到凋亡小体,双染法显示细胞凋亡率呈现一定的浓度依赖性,这二者分别从定性和定量两个方面说明药物诱导细胞产生凋亡;PI法显示药物使MCF-7细胞阻滞在G2/M期。线粒体检测显示细胞线粒体膜电位降低,WB结果显示caspase8、Bax、cytc、Apaf-1、caspase9和caspase3的表达量整体上随着药物作用浓度的增高而上调,而抗凋亡蛋白Bcl-2的表达量则显著下调,且Bcl-2/Bax的比率下降。综合以上结果分析可知,大叶蛇葡萄总黄酮提取物可以抑制MCF-7细胞增殖,其机制可能是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。
【学位授予单位】：湖北中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285
【图文】：

图 1.1 总黄酮提取物对 Hela 图 1.2 总黄酮提取物对 A549细胞作用的抑制率 细胞作用的抑制率图 1.3 总黄酮提取物对 MCF-7 图 1.4 总黄酮提取物对 HepG2细胞作用的抑制率 细胞作用的抑制率

图 1.1 总黄酮提取物对 Hela 图 1.2 总黄酮提取物对 A549细胞作用的抑制率 细胞作用的抑制率图 1.3 总黄酮提取物对 MCF-7 图 1.4 总黄酮提取物对 HepG2细胞作用的抑制率 细胞作用的抑制率

图 1.3 总黄酮提取物对 MCF-7 图 1.4 总黄酮提取物对 HepG2细胞作用的抑制率 细胞作用的抑制率图 1.5 总黄酮提取物对 A2780 图 1.6 总黄酮提取物对 SW620细胞作用的抑制率 细胞作用的抑制率

【参考文献】

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本文编号：2744740