黄芩苷元调控高糖诱导肝脏氧化应激的机制

发布时间：2020-07-07 16:48

【摘要】：糖尿病已经成为全球发病率和死亡率最高的疾病之一,其并发症更是严重威胁了患者的健康。目前常用的药物如阿卡波糖、二甲双胍等,虽然能够降低血糖,但是常常伴随着不良反应的发生。黄芩苷元是一种黄酮类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗菌等活性,并有降低血糖,改善糖尿病并发症的作用,但是黄芩苷元的降糖机理尚不完全清楚。本论文主要研究黄芩苷元对高糖诱导的肝脏细胞和组织中的抗氧化应激及凋亡作用,分析了其抵御氧化应激与凋亡的信号通路,为将黄芩苷元开发为糖尿病药物奠定理论基础。研究内容主要包括以下几个方面:(1)建立高糖诱导正常肝细胞HL7702细胞的模型。确定60.5 mM为最佳的葡萄糖诱导浓度。采用MTT的方法考察了不同浓度的黄芩苷元与高糖处理对细胞存活率产生的影响。高糖处理的细胞存活率显著低于正常细胞,黄芩苷元处理后则能够提高细胞存活率。考察了黄芩苷元对于高糖诱导的氧化应激和凋亡的影响,通过分光光度法检测了细胞内氧化指标SOD,CAT,GSH,MDA含量的变化,通过DCFH-DA探针检测了ROS含量的变化,通过Annexin V/PI双染技术检测了细胞凋亡水平的变化。黄芩苷元处理后,细胞内SOD,CAT,GSH水平显著上升,MDA水平显著下降,ROS含量显著降低,早期凋亡比例也显著减少。糖尿病小鼠肝组织的氧化指标结果与细胞中的结果类似。(2)研究了黄芩苷元抵御高糖诱导的氧化应激和凋亡的分子机制。对黄芩苷元给药糖尿病鼠的肝组织进行基因表达谱分析,结果表明黄芩苷元能够显著调控内质网蛋白进程中的PERK/Nrf2/CHOP通路。在细胞水平上,qRT-PCR和Western blot分析表明,黄芩苷元能够下调高糖诱导的HL7702细胞中PERK,CHOP蛋白和mRNA的表达水平,上调Nrf2,HO-1蛋白及mRNA的表达水平。在动物组织水平上,各蛋白表达水平变化规律和细胞结果一致,并能够上调抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平,下调促凋亡蛋白Bax表达水平。
【学位授予单位】：大连理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】

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本文编号：2745354