基于补肾益癸理论探讨左归丸防治PMOP的疗效机制

发布时间：2020-07-10 18:31

【摘要】：目的:探讨中医学天癸理论的基本内涵,分析补肾益癸法治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的理论基础,观察左归丸对PMOP模型大鼠骨密度、血清骨代谢及相关蛋白表达的影响和药效作用机制,为左归丸治疗PMOP的临床应用提供理论和实验依据。方法:系统梳理古今医学文献中有关“天癸”的记载,探寻天癸理论的渊源及其物质属性和功能特点,分析肾虚精亏天癸枯竭在PMOP发病中的重要意义,探讨PMOP的中医学治疗思路,阐释左归丸防治PMOP的中医学理论基础。选用SPF级6月龄雌性健康Sprague-Dawley大鼠46只,随机分为造模组(40只)和假手术组(6只)。造模组经去卵巢处理,假手术组仅去除卵巢周围等量的脂肪组织。一个月后将造模组大鼠随机分为五组(模型组,左归丸高、中、低剂量组,阳性对照组)。左归丸低、中、高剂量组分别予以该方冻干粉混悬液2.3g/kg/d、4.6g/kg/d、6.9g/kg/d一日一次灌胃,阳性对照组给予17β-雌二醇25μg/kg/d一日一次灌胃,模型组和假手术组给予生理盐水一日一次灌胃。三个月后将各组大鼠经腹腔注射戊巴比妥麻醉、腹主动脉采血后处死,收集血清样本检测骨转换指标Ⅰ型胶原氨基端前肽(N-terminal propeptide of type I procollagen,PINP)、Ⅰ 型胶原羧基端肽 β 特殊序列(βisomer of the C-terminal telopeptide of type I collagen,β-CTX)、骨钙素(osteocalcin,OCN),取股骨行骨密度检测,取胫骨松质骨检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)蛋白的变化。结果:天癸理论源于《黄帝内经》,历代医家又不断予以补充发挥。天癸是一种由肾精所化生的特殊物质,在促进生殖功能和强健骨骼方面发挥着重要作用。肾精亏虚、天癸枯竭、骨失所养是PMOP发生的基本病机,左归丸是补肾填精益癸壮骨防治PMOP的代表方剂,天癸与骨骼在生理和病理方面的密切相关性值得引起研究者关注。实验研究表明:(1)骨密度:左归丸高中剂量组和雌二醇组均明显高于模型组(P0.05)。(2)血清骨代谢:左归丸各剂量组和雌二醇组的PINP、OCN均明显低于模型组(P0.05),左归丸高中剂量组和雌二醇组的β-CTX亦明显低于模型组。(3)骨组织蛋白表达:左归丸高剂量组和雌二醇组的OPG蛋白表达量明显高于模型组(P0.05)。左归丸高中剂量组和雌二醇组的RANKL蛋白相对表达量明显低于模型组(P0.05)。结论:天癸是肾精所化生的促进生殖功能和强健骨骼的重要物质,肾虚癸竭是PMOP形成的基本病机,补肾益癸是防治PMOP的基本大法,左归丸是其代表方剂。提高骨密度、调节骨代谢、上调OPG、下调RANKL等是左归丸填精益癸壮骨的部分药效机制。
【学位授予单位】：南京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5
【图文】：

巢对大鼠体重具有明显的影响。灌胃给药后第１、３、５、７、９、１１周测量各组大鼠体重，逡逑发现五个造模组体重增长幅度均明显高于假手术组（Ｐ＜0．0５）。给药第９周时，左归丸逡逑高中剂量组体重明显低于模型组（Ｐ＜０．０５）（见表２．１，图２．１）。从总体体重变化趋势逡逑来看，左归丸高中低剂量组及雌二醇组对切除卵巢后大枈丨＿体重的增长具有抑制作用。逡逑逦表２．１去卵巢大鼠体重变化（Ｓ±ｓ，邋ｎ＝６）逦逡逑周数逦１逦３逦５逦７逦９逦１１逡逑３２３．５４±７．０６逦３３６．５４±６．６２逦３６０．３±９．４０逦３６２．７７±１０．９６逦３８２．５５±１１．８６逦３８７．６６±１３．４２逡逑（ｇ）逡逑３７５．５±６．４５＊逦４０９±８．０５＊逦４３３．６±１２．３６＊逦４５２±１３．７１＊逦４８６．３３±１８．６７＊逦４９５．５±１７．６８＊逡逑（ｇ）逡逑１？逦３７２－５３±８＇５７＊逦３９７－３０±６－８＊逦４１６－０７±７－１８＊逦４２５－５４±６＇１６＊逦４４２－２７±７－８７＊＃逦４５９±６－９＊逡逑｜？逦３７６－７１±４＇ｉｒ逦４１0±８－４８＊逦４２５－９，±８＇５９＊逦４３３＇５±７－２９＊逦４４８－７±１0－４１，＃逦４６３±１，－？ｒ逡逑ｍｍ逦３７４

３．２左归丸对去卵巢大鼠骨密度的影响逡逑各造模组骨密度均明显低于假手术组（户＜０．０５），表明骨质疏松模型造模成功。左逡逑归丸高中剂量组和雌二醇组骨密度明显高于模型组（户＜邋０．０５）（见表２．２及图２．２），提逡逑示大鼠去卵巢后骨密度明显下降。左归丸高中剂量组和雌二醇组对去卵巢大鼠骨密度的逡逑下降具有明显的抑制作用。逡逑逦表２．２去卵巢大鼠骨密度比较（Ｓ邋士邋ｓ，ｎ＝６）逦逡逑组别逦Ｍｍ逦骨密度逦逡逑假手术组逦生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ／ｄ逦０．２７±０．０２＃逡逑模型组逦生理盐水１０ｍｌ／ｋｇ／ｄ逦０．１８±０．０１＊逡逑左归丸尚剂量组逦左归丸６．９ｇ／ｋｇ／ｄ逦ｑ邋２３±0．0３＊＃逡逑左归丸中剂量组逦左归丸４．６邋ｇ／ｋｇ／ｄ逦０．２３±０．０１＊＃逡逑左归丸低剂量组逦左归丸２．３邋ｇ／ｋｇ／ｄ逦0＞２0±0．0ｒ逡逑雌二醇组逦１７ｐ－雌二醇邋２５ｊｉｇ／ｋｇ／ｄ逦０．２３±０．０Ｔ＃逡逑注：＊与假手术组比较尸＜０．０５；邋＃与模型组比较尸＜０．０５。逡逑０．４－１逡逑＃逡逑八邋０．３■丁逡逑１邋ｒＳ邋ｆ逦＾逡逑Ｍｉｌ逡逑＊0逦Ａ逦＾逦＾逦Ｖ逡逑图２．２左归丸对去卵巢大鼠骨密度的影响逡逑Ｓ邋即邋ＳＨＡＭ邋（假手术组），Ｖ邋即邋ＯＶＸ＋Ｖｅｈｉｃｌｅ邋（模型组），Ｈ邋即邋ＯＶＸ＋ＺＧＷ邋６．９邋ｇ／ｋｇ／ｄ邋（左归丸逡逑高剂量组），Ｍ即ＯＶＸ＋ＺＧＷ４．６ｇ／ｋｇ／ｄ邋（左归丸中剂量组），Ｌ即ＯＶＸ＋ＺＧＷ２．３ｇ／ｋｇ／ｄ邋（左归丸低逡逑剂量组）

３．３左归丸对去卵巢大鼠血清骨代谢指标的影响逡逑左归丸高中低剂量组和雌二醇组的骨形成指标ＰＩＮＰ和ＯＣＮ均明显低于模型组逡逑（Ｐ＜邋０．０５）（见表２．３，图２．３、２．５），表明切除卵巢造成大鼠血清骨形成指标ＰＩＮＰ和逡逑ＯＣＮ的升高，左归丸高中低剂量组能减缓去卵巢大鼠ＰＩＮＰ和ＯＣＮ指标升高的趋势。左逡逑归丸高中剂量组和雌二醇组的骨吸收指标Ｐ＿ＣＴＸ均明显低于模型组（Ｐ＜邋０．０５）（见表逡逑２．３，图２．４），表明切除卵巢亦造成大鼠血清骨吸收指标（３－ＣＴＸ的升高，左归丸高中低剂逡逑量组能减缓去卵巢大鼠Ｐ－ＣＴＸ指标升高的趋势。可见，去卵巢骨质疏松模型大鼠应用左逡逑归丸干预后，左归丸可降低去卵巢骨质疏松大鼠血清骨代谢指标水平，减慢骨重建高转逡逑换速度。逡逑逦表２．３邋去卵巢大鼠血清骨代谢指标比较（ｘ邋土邋ｓ，ｎ＝６）逦逡逑组别逦剂量逦ＰＩＮＰ逦（３－ＣＴＸ逦ＯＣＮ逡逑假手术组逦生理盐水逦１０ｍｌ／ｋｇ／ｄ逦５．８９±０．５２逦１７．６８±１．４５逦７．１３±０．６２逡逑模型组逦生理盐水逦ｌ0ｍｌ／ｋｇ／ｄ逦８．８９±０．５７＊逦２９．３７±３．７９＊逦９．２±１＊逡逑左归丸高剂量组逦＆ｆｉＡ６＿９ｇ／ｋｇ／ｄ逦６．２２邋士邋０．８９＃逦２１．２２±２．０９＃逦６．６６±１．１５＃逡逑左归丸中剂量组左归丸邋４．６ｇ／ｋｇ／ｄ逦６．８９士０．６２．＃逦２１．８６±１．９３＃逦７．０２±１．０１＊逡逑左归丸低剂量组左归丸邋２．３ｇ／ｋｇ／ｄ逦６．９７士０．５Ｔ＃逦２４．４３±５．９５＊逦７．５丨±０．４４＊逡逑雌二醇组逦１７ｐ－雌二醇邋２５ｎｇ／ｋｇ／ｄ逦７±０．２５

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本文编号：2749294