复方四黄外洗液提取工艺优化和质量标准研究

发布时间：2020-07-17 15:58

【摘要】：目的本课题通过用正交设计法优选最佳的提取工艺,通过HPLC法对复方四黄外洗液中大黄素和盐酸小檗碱进行定量分析,为科学评价和有效控制其质量提供可靠依据。结合薄层色谱鉴别实验对复方四黄外洗液质量标准进行研究,并提高复方四黄外洗液质量标准,增强该制剂的可控性。并且建立复方四黄外洗液的HPLC指纹图谱分析方法,为该制剂的鉴别和质量标准提供依据。方法主要分为提取工艺优化研究、质量标准提高和中药指纹图谱建立,分别从三大部分进行研究:(1)复方四黄外洗液的工艺优化研究:水提醇沉工艺用大黄素为对照品,用高效液相法在波长245nm处测定大黄素的峰面积,再根据标准曲线法计算四黄外洗液水提药材大黄素的含量。采用L_9(3~4)正交实验设计,以水提液的干浸膏和大黄素为指标,考察煎煮次数、煎煮时间,加水量,醇沉浓度这4个因素对大黄素提取的影响,醇沉浓度作为误差列;醇提水沉工艺用盐酸小檗碱为对照品,用高效液相法在波长265nm处测定盐酸小檗碱的峰面积,再根据标准曲线法计算四黄外洗液醇提药材盐酸小檗碱的含量。采用L9(3~4)正交实验设计,以醇提液的干浸膏和盐酸小檗碱为指标,考察加醇量,回流时间,乙醇浓度,回流次数这4个因素对盐酸小檗碱提取的影响。(2)复方四黄外洗液的质量标准研究:参考《中国药典》2015版一部及相关文献方法,对复方四黄外洗液中的大黄、黄连、黄柏、黄芩、连翘、虎杖6味药材进行薄层色谱鉴别研究(3)复方四黄外洗液的指纹谱建立:采用Zorbax SB C18(150 mm×4.6mm,5μm)(美国Agilent公司));流动相为0.1%磷酸(含0.03mol/L磷酸二氢钾)(A)-乙腈(B)-甲醇(C);检测波长254nm;柱温为25℃,进样量为10μL,洗脱时间为60min,分析复方四黄外洗液的HPLC图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2009版V1.1)进行相似度评价。结果(1)水提醇沉的最佳工艺为煎煮次数为3次、煎煮时间为1.5h、加水量为8倍、醇沉浓度为60%;醇提水沉得最佳工艺为乙醇浓度为70%、回流次数为3次、加醇量为8倍、回流时间为1h。(2)方四黄外洗液中的大黄、黄连、黄柏、黄芩、连翘、虎杖对照中药、对照品薄层色谱主斑点位置一致,并且定性鉴别斑点圆整、分离度好、易于区别。(3)对10批不同批号的复方四黄外洗液进行HPLC指纹图谱测定,并对其相识度进行分析,确定了13个共有峰,确认连翘苷、黄芩苷、盐酸小檗碱、大黄素峰的位置,并且各批次对照图谱间相识度高。结论该方法工艺经试验,含量测定方法准确、简单便捷、重复性好,提取工艺合理、经济,值得推广,对质量研究有较好的参考利用价值。所建立的薄层色谱方法、HPLC指纹图谱方法简便、易行、专属性比较强,可作为复方四黄外洗液质量控制方法之一。
【学位授予单位】：广州中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R286.0

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