右归丸含药血清对大鼠BMSCs中GPR48及相关因子的表达研究

发布时间：2020-07-18 03:15

【摘要】：目的:以中医“肾藏精,主骨生髓”为理论基础,通过实验观察右归丸含药血清对体外培养大鼠BMSCs向成骨细胞增殖分化及细胞中GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP蛋白表达的变化,探究右归丸防治肾虚骨质疏松症的作用机制,为临床治疗骨质疏松症提供科学依据。材料与方法:本实验采用血清药理学方法,将SPF级3月龄未曾交配的SD雌性大鼠,体重190-220g随机分组为正常组、诱导液组、右归丸组、福善美组、骨疏康组,每组8只,共40只。实验大鼠连续灌胃一周,每日灌胃1次,一周后将大鼠脱颈处死,并进行取材,留存各组含药血清。取双侧股骨及胫骨,分离提取BMSCs,培养及传代纯化。选取MTT法测定细胞增殖情况,采取ELISA法检测细胞中ALP、GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP的蛋白表达情况。运用SPSS统计软件对所得实验数据结果进行分析比较,观察各组含药血清对BMSCs向成骨细胞分化的影响,探讨右归丸对骨质疏松症的防治机制。结果:1.各实验组对细胞中MTT调控结果显示:与正常组比较,右归丸组显著增长(P0.01);与诱导液组、骨疏康组、福善美组相比,右归丸组有显著差异(P0.01)。2.各实验组对细胞中ALP活性调控结果显示:右归丸组与正常组比较,有显著差异(p0.01);右归丸组与福善美组、骨疏康组阳性对照组相比有显著差异(P0.01)。3.各组含药血清对大鼠BMSCs培养中GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP的蛋白含量调控结果显示:与正常组相比,诱导液组、骨疏康组、福善美组、右归丸组均有明显提升(P0.01)。结论:1.正常大鼠BMSCs中可以表达GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP,表明大鼠中存在GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP信号因子。2.右归丸可以上调大鼠BMSCs中GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP的蛋白含量,表明右归丸可能是通过调节GPR48、ATF4、BSP、BMP7、TGF-β、BGP蛋白表达水平以达到防治骨质疏松症的目的。3.右归丸含药血清可以促进大鼠BMSCs向成骨细胞分化,诠释了中医“肾藏精,主骨生髓”理论的科学性。
【学位授予单位】：辽宁中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

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