青蒿琥酯对高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9表达的影响

发布时间：2020-07-18 09:39

【摘要】：目的:应用青蒿琥酯(ART)处理高糖条件下血管内皮细胞,以探讨青蒿琥酯对高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9蛋白表达的影响。方法:将人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells,HUVEC)作为实验对象,分为葡萄糖(Glucose,G)组、40mmol/L G+ART(G40+ART)组,甘露醇(Mannitol,M)对照组、G40+二甲基亚砜(DMSO)对照组,其中葡萄糖组浓度梯度分为5.5mmol/L G(G5.5)、25mmol/L G(G25)、40mmol/L G(G40);甘露醇对照组浓度梯度为5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5mmol/L M(M40),G40+ART组中依据ART浓度梯度分为G40+10ug/ml ART(10A)、G40+20ug/ml ART(20A)、G40+40ug/ml ART(40A);DMSO对照组中DMSO用量与40A组中溶解ART所用DMSO体积相同。采用Western blot、细胞免疫荧光技术分别检测各组细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达情况。结果:1.高糖条件对HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响,及ART对高糖条件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响。应用G5.5,G25,G40的培养液处理细胞,Western blot结果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G25组较G5.5组表达升高,且G40组较G25组表达升高,差异有统计学意义(均为P0.01)。细胞免疫荧光检测结果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G25组较G5.5组表达升高,且G40组较G25组表达升高。应用10A,20A,40A三种药物浓度对细胞进行处理,同时保证细胞培养过程中药物浓度以外的其他培养条件相同。Western blot结果表明ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART组较G40组表达下降,其中,10A组低于G40组,20A组低10A组,40A组低于20A组,差异有统计学意义(均为P0.01),细胞免疫荧光检测结果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白在G40+ART组较G40组表达下降,其中,10A组低于G40组,20A组低10A组,40A组低于20A组。2.高渗透压对HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响。对于M对照组,应用含有5.5 mmol/L G+19.5 mmol/L M(M25),5.5 mmol/L G+34.5 mmol/L M(M40)的培养液处理细胞,分别与G25组、G40组相比,Western blot结果显示ICAM-1、MMP-9蛋白表达在G25组较M25组表达升高,G40组较M40组表达升高,差异有统计学意义(均为P0.01)。细胞免疫荧光检测结果表明,ICAM-1、MMP-9蛋白表达在G25组较M25组表达升高,G40组较M40组表达升高。3.为进一步证明ART对高糖条件下HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达的影响,设置DMSO对照组。DMSO对照组中DMSO用量与40A组中溶解ART所用DMSO体积相同,Western blot结果显示G40+ART组ICAM-1、MMP-9蛋白表达低于DMSO组,差异有统计学意义(均为P0.01)。细胞免疫荧光检测结果显示G40+ART组ICAM-1、MMP-9蛋白表达低于DMSO组。结论:1.ICAM-1和MMP-9蛋白在高糖条件下表达升高,且具有浓度依赖性。2.高渗透压对HUVEC ICAM-1、MMP-9蛋白表达无明显影响。3.ART可抑制高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表达,且具有浓度依赖性。4.本实验在细胞水平证明ART可抑制高糖条件下血管内皮细胞ICAM-1和MMP-9蛋白的表达,为进一步研究ART抑制视网膜新生血管形成和渗漏的机制中ICAM-1和MMP-9表达变化奠定基础
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

结果糖条件对 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表达的影响，及 ART 对高 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表达的影响。用 G5.5，G25，G40 的培养液处理细胞，运用 Western blot、细胞免疫CAM-1、MMP-9 蛋白表达。结果表明 ICAM-1、MMP-9 蛋白在 G25 组较 G5.5 ，且 G40 组较 G25 组表达升高，差异有统计学意义（均为 P＜0.01）。0A，40A 三种药物浓度对细胞进行处理，运用 Western blot、细胞免疫CAM-1、MMP-9 蛋白表达，结果表明 ICAM-1、MMP-9 蛋白在 G40+ART 组较下降，其中，10A 组低于 G40 组，20A 组低 10A 组，40A 组低于 20A 组，有统计学意义（均为 P＜0.01）（如图 1 A、B、C、D）。

青岛大学硕士学位论文2 高渗透压对 HUVEC ICAM-1、MMP-9 蛋白表达的影响。对于 M 对照组，应用 Western blot、细胞免疫荧光检测 HUVEC ICAM-1、MM白表达情况，结果显示 ICAM-1、MMP-9 蛋白表达在 G25 组较 M25 组表达升0 组较 M40 组表达升高，差异有统计学意义（均为 P＜0.01）（图 2 A、B、C、D

3.A、B 、C、D Western blot、细胞免疫荧光结果显示 ART 组 ICAM-1、MMP-9 蛋白表于 DMSO 组（*表示与 10A、20A、40A 组相比均为 P＜0.01）。

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本文编号：2760718