丹栀复方对Graves病小鼠的甲状腺Caspase-3,Bcl-2,Bax蛋白表达的影响
发布时间：2020-07-19 03:14
【摘要】：目的:本实验将观察丹栀复方对Graves病模型小鼠的一般情况、甲功、病理切片及Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白在甲状腺表达的影响。为中药干预Graves病进展提供理论支持,并提出其治疗机制可能与影响细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax在甲状腺上的表达有关。方法:将健康的雌性Balb/c小鼠按照完全随机的方法分为模型组与空白组,采取股四头肌注射表达TSHR的腺病毒的方法制备Graves病小鼠模型。检验造模成功后,随机将造模组分为五组,分别为:模型组、西药组、丹栀复方低剂量组(Low dose group/LDG)、丹栀复方中剂量组(Middle dose group/MDG)、丹栀复方高剂量组(High dose group/HDG),并予其相应药物灌胃,给药周期为六周。期间监测小鼠的一般情况、饮食饮水量、体温体重。六周后,摘除小鼠眼球取血,分离甲状腺组织。用ELISA法检测甲功,Western Blot法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax在甲状腺中的表达,HE染色后,在光镜及电镜下观察甲状腺组织的形态与构造。结果:1.腺病毒免疫6周后,与空白组对比,造模后小鼠明显精神亢奋,躁动不安,易撕咬,饮食量、饮水量增大,体温升高,体重增长缓慢;模型组小鼠TSH明显低于空白组,T4、T3、TRAb明显高于空白组(P0.05);甲状腺HE染色呈弥漫性毒性甲状腺肿样改变。2.给药治疗6周后,与模型组相比,中中组小鼠饮食下降极显著(P0.01),西药组和中低组小鼠饮食显著下降(P0.05);西药组、中中组、中高组小鼠饮水下降极显著(P0.01);西药组及中药各剂量组小鼠体温有下调趋势,但无统计学意义(P0.05);中中组与中高组小鼠体重显著上升(分别为P0.05,P0.01)。3.给药治疗6周后,西药组、中中组血清T3显著下降(分别为P0.01,P0.05);西药组、中药各剂量组血清T4均极显著下降(P0.01);西药组、中中组血清TRAb极显著下降(P0.01),中高组显著下降(P0.05);西药组、中中组血清TSH极显著上升(P0.01),中高组TSH显著上升(P0.05)。4.给药治疗6周后,各治疗组Caspase-3表达量均极显著下调(P0.01);西药组、中中组、中高组Bcl-2表达量极显著上调(P0.01);各治疗组Bax表达量均极显著下调(P0.01);西药组、中高组Bcl-2/Bax显著上升(分别为P0.01,P0.05)。5.Caspase-3与Bax的表达量与T3、T4、TRAb水平呈正相关,与TSH水平呈负相关;Bcl-2的表达量与T3、T4、TRAb水平呈负相关,与TSH水平呈正相关;Bcl-2与Bax之间的比值与T3、T4、TRAb水平呈负相关,与TSH水平呈正相关。结论:1.本实验成功建立了Graves病小鼠的模型。丹栀复方和甲巯咪唑对Graves病小鼠的血清学指标均有改善作用,但甲巯咪唑的治疗效果优于丹栀复方。2.Graves病小鼠存在有细胞凋亡异常,细胞凋亡程度与Graves病程度呈正相关。3.丹栀复方和甲巯咪唑均能下调Caspase-3在甲状腺上的表达,上调Bcl-2与Bax之间的比值,抑制甲状腺细胞凋亡所致的甲状腺组织损伤,在丹栀复方各剂量组中,高剂量组疗效最优。3.Caspase-3、Bcl-2、Bax可能参加了丹栀复方抑制甲状腺细胞凋亡异常的调控过程。
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：
体温偏高，排泄量较空白组增加，排泄物颜色及质地未见明显小鼠始终保持精神状况良好，皮毛光泽，体重稳定增加，排泄物降。干预后，部分组别小鼠症状、体征有所改善。部分小鼠精神状态斗次数减少，饮食量、排泄量趋于接近空白组。其中症状、体征的药组、中中组最为明显，中高组有改善趋势，中低组及模型组改善白组症状及体征同前。时间段各组小鼠饮食的变化表 1 造模期间各组小鼠的饮食量比较（g， x±s）白组相比#P<0.05，##P<0.01；与模型组相比*P<0.05，**P<0.01 周（适应期） 1 周 2 周 3 周 4 周 5 周 6.92±0.45 3.89±0.32 4.21±0.72 3.82±1.00**4.15±0.71**4.47±0.92**4.12.85±0.480 4.03±0.46 3.84±0.47 4.36±0.79##5.07±0.72##5.07±0.74##5.02
成都中医药大学 2014 级硕士学位论文表 2 用药期间各组小鼠的饮食量比较（g， x±s）适应期) 1 周 2 周 3 周 4 周 5 周 0.50 4.34±0.36**4.49±0.90**4.55±1.08**4.11±1.49 4.00±0.58 41.20 5.19±0.94##5.38±0.44##5.63±0.90##3.88±1.98 4.20±2.27 51.13#4.79±0.44*##4.14±0.70**5.13±0.79 4.06±1.25 2.77±2.05*41.21 4.25±0.27** 4.13±0.91**4.72±1.07* 3.55±1.93 3.22±2.00 40.60 3.86±0.24**##3.64±1.30**##4.74±1.72* 2.98±1.85#2.57±2.33*41.00 3.85±0.48**##3.67±1.04**##4.56±1.58**3.00±1.91#2.57±2.01*4组相比#P<0.05，##P<0.01；与模型组相比*P<0.05，**P<0.01
图 3 造模期间各组小鼠的饮水量比较表 4 用药期间各组小鼠的饮水量比较（ml， x±s）0 周（适应期） 1 周 2 周 3 周 4 周 5 周 3.82±0.77**4.42±0.27**4.02±0.75**4.00±0.23**3.71±0.56*3.02±1.97 5.60±1.38##4.87±0.53##5.75±0.56##5.10±0.56##4.70±1.70#2.30±2.28 5.30±1.49##4.84±0.48##5.08±0.47**##5.06±0.56##5.54±1.40##3.00±2.24 5.00±1.11*##4.42±0.60**3.52±0.83**#4.16±0.74**3.73±1.69*3.02±2.26 4.80±0.76**##4.66±0.33 4.00±1.09**3.97±0.94**3.09±2.00**2.38±2.47 5.00±0.64*##4.84±0.56##4.15±0.79**4.39±0.95**#3.96±1.48 3.03±2.21 白组相比#P<0.05，##P<0.01；与模型组相比*P<0.05，**P<0.01
本文编号：2761823
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：
体温偏高，排泄量较空白组增加，排泄物颜色及质地未见明显小鼠始终保持精神状况良好，皮毛光泽，体重稳定增加，排泄物降。干预后，部分组别小鼠症状、体征有所改善。部分小鼠精神状态斗次数减少，饮食量、排泄量趋于接近空白组。其中症状、体征的药组、中中组最为明显，中高组有改善趋势，中低组及模型组改善白组症状及体征同前。时间段各组小鼠饮食的变化表 1 造模期间各组小鼠的饮食量比较（g， x±s）白组相比#P<0.05，##P<0.01；与模型组相比*P<0.05，**P<0.01 周（适应期） 1 周 2 周 3 周 4 周 5 周 6.92±0.45 3.89±0.32 4.21±0.72 3.82±1.00**4.15±0.71**4.47±0.92**4.12.85±0.480 4.03±0.46 3.84±0.47 4.36±0.79##5.07±0.72##5.07±0.74##5.02
成都中医药大学 2014 级硕士学位论文表 2 用药期间各组小鼠的饮食量比较（g， x±s）适应期) 1 周 2 周 3 周 4 周 5 周 0.50 4.34±0.36**4.49±0.90**4.55±1.08**4.11±1.49 4.00±0.58 41.20 5.19±0.94##5.38±0.44##5.63±0.90##3.88±1.98 4.20±2.27 51.13#4.79±0.44*##4.14±0.70**5.13±0.79 4.06±1.25 2.77±2.05*41.21 4.25±0.27** 4.13±0.91**4.72±1.07* 3.55±1.93 3.22±2.00 40.60 3.86±0.24**##3.64±1.30**##4.74±1.72* 2.98±1.85#2.57±2.33*41.00 3.85±0.48**##3.67±1.04**##4.56±1.58**3.00±1.91#2.57±2.01*4组相比#P<0.05，##P<0.01；与模型组相比*P<0.05，**P<0.01
图 3 造模期间各组小鼠的饮水量比较表 4 用药期间各组小鼠的饮水量比较（ml， x±s）0 周（适应期） 1 周 2 周 3 周 4 周 5 周 3.82±0.77**4.42±0.27**4.02±0.75**4.00±0.23**3.71±0.56*3.02±1.97 5.60±1.38##4.87±0.53##5.75±0.56##5.10±0.56##4.70±1.70#2.30±2.28 5.30±1.49##4.84±0.48##5.08±0.47**##5.06±0.56##5.54±1.40##3.00±2.24 5.00±1.11*##4.42±0.60**3.52±0.83**#4.16±0.74**3.73±1.69*3.02±2.26 4.80±0.76**##4.66±0.33 4.00±1.09**3.97±0.94**3.09±2.00**2.38±2.47 5.00±0.64*##4.84±0.56##4.15±0.79**4.39±0.95**#3.96±1.48 3.03±2.21 白组相比#P<0.05，##P<0.01；与模型组相比*P<0.05，**P<0.01
【参考文献】
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10 相萍萍;许楠;陆澄;;丹皮酚对甲状腺未分化癌FRO细胞相关lncRNA表达的影响[J];中医药学报;2015年05期
本文编号：2761823
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