血尿胶囊质量标准的提升及药效物质基础研究

发布时间：2020-07-20 10:59

【摘要】：目的针对纯中药制剂血尿胶囊质量控制水平低,药效物质基础不明确的问题,研究建立原料药材棕榈子的质量控制标准,建立成品含量测定及指纹图谱等质控指标,全面提升血尿胶囊质量标准,并通过开展谱效关联研究,初步明确其治疗急性肾盂肾炎的药效物质基础,为保证血尿胶囊质量和临床应用提供依据。方法在现有药典以及部颁标准的基础上,采用薄层色谱(TLC)进行定性鉴别、高效液相色谱(HPLC)建立指标成分的含量测定方法,进一步完善提升血尿胶囊原料药棕榈子及其成品质量标准;综合血尿胶囊的制备工艺及其原料药所含成分的特殊性,采用高效液相色谱法及气-质联用色谱法(GC-MS)分别建立其指纹图谱,并将两种检测手段所得数据进行归一化处理,研究建立血尿胶囊融合指纹图谱;通过对照品比对及NIST2008数据库检索鉴定,进行成分指认,并对血尿胶囊中单味药材、缺味复方及四个部位的指纹图谱进行共有峰归属分析,再结合主要药效学数据,以双变量相关统计方法对血尿胶囊不同极性部位进行谱效关联研究。结果研究建立了血尿胶囊主要原料药棕榈子药材的薄层鉴别和原儿茶酸的含量测定项,从药材源头保证成品的质量;建立了血尿胶囊中棕榈子、菝葜、薏苡仁三味药的薄层色谱鉴别项;研究建立了基于HPLC-UV和HPLC-ELSD测定血尿胶囊中原儿茶酸、白藜芦醇和甘油三油酸酯含量的方法以及血尿胶囊的HPLC指纹图谱和GC-MS指纹图谱,其中,HPLC色谱峰均属于棕榈子和菝葜,主要集中于正丁醇部位,GC-MS指纹图谱中色谱峰均属于薏苡仁,主要集中在石油醚部位;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0版》(国家药典委员会)将血尿胶囊GC-MS与HPLC指纹图谱进行融合,建立了血尿胶囊融合指纹图谱。通过对振东制药以及其他不同厂家生产的血尿胶囊的指纹图谱分析,发现除个别厂家外,其余相似度均在0.8以上,并确定了34个共有峰,其中HPLC图谱部分通过对照品比对指认了原儿茶酸、儿茶素、绿原酸、咖啡酸、虎杖苷、落新妇苷、黄杞苷、白藜芦醇、槲皮素等9种成分,GC-MS图谱部分通过NIST2008数据库检索鉴定了棕榈酸甲酯、棕榈酸乙酯、9,12-十八碳二烯酸甲酯、(E)-9-十八烯酸甲酯、硬脂酸甲酯、亚油酸乙酯、油酸乙酯、7,10-十八碳二烯酸甲酯、硬脂酸乙酯、11-二十烯酸甲酯、二十酸甲酯、二十二酸甲酯等12种成分;将药效指标sIgA含量、CD4/CD8、IL-10、尿肌酐以及肾脏代谢产物(胆碱、琥珀酸、乙酸)分别与血尿胶囊各个部位GC-MS及HPLC指纹图谱进行双变量关联分析,结果表明血尿胶囊四个部位对不同的药效指标影响各有侧重,四个部位相辅相成,共同发挥临床疗效。结论建立的薄层鉴别方法专属性强,操作方便可行,建立的原儿茶酸和白藜芦醇含量测定项可控制棕榈子和菝葜两味药的质量,甘油三油酸酯含量测定可控制薏苡仁的含量,建立的融合指纹图谱较为全面地反映了血尿胶囊的整体特性,提升后的血尿胶囊质量标准可全面控制成品的质量,能充分保证临床疗效。谱效关联研究表明血尿胶囊组方精辟,提取工艺合理可行。
【学位授予单位】：山西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R286.0;R285
【图文】：

高效液相色谱,棕榈,高效液相色谱,原儿茶酸

材在相同位置均显相同颜色的荧光斑点。3.2 含量测定3.2.1 HPLC 色谱图实验得到原儿茶酸对照品、棕榈子样品溶液以及空白对照溶液的色谱图，结果见图 2，由此可知原儿茶酸对照品峰形较好且样品中杂质峰无干扰。

棕榈,原儿茶酸,子样品,峰面积

A.对照品溶液 B.棕榈子样品溶液 C.空白对照；1.原儿茶酸2.2 方法学考察2.2.1 线性关系经计算可得回归方程为 y=5084x+13.01（r=0.9996），结果见图 3，表明原儿茶酸样量在 0.0258～0.3096 μg 之间，质量与峰面积关系良好。

标准曲线,原儿茶酸,标准曲线,子样品

【参考文献】