四种复方中药对甲状腺功能减退治疗作用及其机制的研究

发布时间：2020-07-22 18:51

【摘要】：目的:研究复方中药(银菊散结颗粒、复方中药一、复方中药二和复方中药三)对实验性甲减小鼠甲状腺功能减退及常见并发症的治疗作用,以及复方中药对实验性自身免疫性甲状腺炎功效以及免疫调节作用,观察复方中药一初步临床疗效。采用CETSA实验验证,银菊散结颗粒中的小分子药物和靶标蛋白TSHR有结合。利用药效团模型,从银菊散结颗粒中筛选TSHR激动剂,探讨其作用机制。方法:1.复方中药的提取采用60%乙醇浸提法提取复方中药一、复方中药二和复方中药三。2.复方中药治疗实验性甲状腺功能减退的药效学研究采用化学诱导法制成甲减模型。化学发光法检测甲状腺激素水平;HE染色观察病理变化;Morris水迷宫和疲劳仪评估行为学变化。3.复方中药治疗自身免疫性甲状腺炎的药效学研究采用抗原佐剂免疫诱导法制成小鼠EAT模型。化学发光法检测TPOAb、Tg Ab以及甲状腺激素水平;HE染色观察病理变化;ELISA检测TNF-α和IL-10;IHC检测TNF-α、IL-10以及TGF-β1。以TPOAb、Tg Ab、TSH、FT4和FT3水平变化为指标,初步观察复方中药一对桥本氏甲状腺炎患者的临床疗效。4.复方中药的作用靶点及有效组分的初步研究利用CETSA实验,检验复方中药银菊散结颗粒是否和TSHR蛋白有结合。通过已知的激动剂构建药效团模型,并进行模型验证,从复方中药银菊散结颗粒中筛选TSHR激动剂。结果:1.复方中药的提取复方中药一、复方中药二和复方中药三中药提取物为干粉,提取率分别为21%、24%和22%。2.复方中药治疗实验性甲减的药效学研究和空白组相比较,造模组血清FT4下降、TSH水平上升显著,平均潜伏期增加,到达平台的只数百分率下降,跑步时间显著缩短(p(27)0.05)。和造模组相比较,各治疗组血清FT4均有所上升;TSH水平显著降低,其中复方中药一高、低剂量组,复方中药二高剂量组和复方中药三高剂量组作用效果显著(p(27)0.05);治疗组平均潜伏期缩短;到达平台的只数百分率上升,其中阳性对照药银菊散结颗粒,复方中药一高剂量组和复方中药二高剂量组上升显著(p(27)0.05);各治疗组跑步时间增加,其中,复方中药一、二高剂量组增加跑步时间作用显著(p(27)0.05)。病理结果显示:和空白组相比,造模组甲状腺组织滤泡上皮肥大,胶质减少显著。各治疗组和造模组相比较,上皮细胞肿大程度减轻,胶质增多。3.复方中药治疗实验性自身免疫性甲状腺炎的药效学研究和空白组相比,造模组血清Tg Ab、TPOAb、TNF-α水平都升高,血清FT4、IL-10水平降低,甲状腺组织TGF-β1、TNF-α表达增加,IL-10表达减少(p(27)0.05)。和造模组相比,各治疗组Tg Ab、TPOAb、TNF-α水平均降低(p(27)0.05);FT4、IL-10水平均升高,其中,各治疗组IL-10水平均升高(p(27)0.05);各治疗组TGF-β1、TNF-α均显著表达减少,IL-10均表达增加(P0.05),银菊散结颗粒高剂量,复方中药一高剂量组效果更好。病理结果显示:和空白组相比,造模组淋巴细胞浸入程度显著增多(p(27)0.05)。和造模组相比,各治疗组淋巴细胞浸入程度降低(p(27)0.05)。其中,复方中药一高剂量组,复方中药三高剂量组更为显著。复方中药一对HT患者的临床总有效率60%,优于对照组。4.复方中药的作用靶点及有效组分的初步研究CETSA实验TSHR蛋白热稳定性提高。表明,复方中药银菊散结颗粒和TSHR蛋白有结合。通过验证药效团模型,激动剂检出率为50%,且该模型的GH打分为0.875,进一步从银菊散结颗粒的小分子数据库中筛选出26个化合物。结论:1.四种复方中药可以改善实验性甲减小鼠的甲状腺功能。2.四种复方中药能够减轻甲减并发记忆障碍以及疲劳。3.三种复方中药可以降低EAT自身抗体,减少淋巴细胞浸润。4.三种复方中药能有效调节EAT小鼠免疫功能,逆转Th1/Th2极化偏移。5.复方中药一对HT患者疗效较好,优于对照组。6.CETSA实验证明,银菊散结颗粒中的小分子和TSHR蛋白有结合。7.通过构建TSHR激动剂的药效团模型及其验证,从复方银菊散结颗粒的中药小分子数据库中虚拟筛出化合物。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285

【相似文献】