榄仁叶降血糖活性成分研究

发布时间：2020-07-28 16:09

【摘要】：榄仁(TerminaliacatappaL.),为使君子科(Combretaceae)榄仁属(Terminalia)植物。分布于热带及亚热带地区,在我国主要分布于广东、广西、海南、台湾、福建地区。民间多用其落叶预防和治疗皮肤病和肝脏疾病。榄仁叶有报道具有降糖功效。随着人们生活水平的提高以及我国的饮食结构,高淀粉摄入的增加,由饮食习惯导致的糖尿病已经成为糖尿病形成的主要原因。本课题选用广东湛江的榄仁叶,经80%乙醇冷浸提取,再按不同极性的萃取溶剂对提取物进行分步萃取,得到四个萃取部位,分别为二氯甲烷部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位。本课题首先采用体外α-淀粉酶抑制模型,对榄仁叶提取物及四个萃取部位的α-淀粉酶抑制活性进行测试。实验结果初步确定了榄仁叶提取物和萃取部位的α-淀粉酶抑制活性,在给药终浓度为556μg/mL时,阳性对照阿卡波糖抑制率为100%,榄仁的二氯甲烷部位对α-淀粉酶的抑制作用最强,抑制率达到39.09%;其次为乙酸乙酯部位,抑制率为14.49%;提取物也表现出一定的抑制活性,抑制率为4.87%。为了进一步研究榄仁叶的降糖活性,本课题组采用大鼠STZ诱导的糖尿病模型实验对不同剂量提取物的降糖活性进行了验证,确认了榄仁叶提取物能够降低大鼠随机血糖水平,降低糖化血红蛋白和血浆胰岛素,改善大鼠糖耐量的作用。本实验采用各种色谱分离技术对榄仁叶进行化学成分的系统研究,重点对榄仁叶活性部位的化学成分进行分离与纯化,由其二氯甲烷部位分离得到28个化合物,即L y-01～Ly-28;由乙酸乙酯部位分离得到了12个化合物,即Ly-29～Ly-40。再运用各种现代波谱分析技术对所分得的40个化合物进行结构鉴定,分别为Ly-1 β-谷甾醇(β-sitos terol)、Ly-2 胡萝卜苷(daucosterol)、Ly-3 stigmasteryl-3β-arachidate、Ly-4 丁烯基苯酞(butylphthalide)、Ly-5 齐墩果酸(oleanolic acid)、Ly-6 豆甾-4-稀-3,6-二酮(stgmast-4-ene-3,6-dione)、Ly-7 没食子酸(gallic acid)、Ly-8 对羟基苯甲酸(p-Hydr oxybenzoic acid)、Ly-9 间-二没食子酸甲酯(methyl-digallate)、Ly-10 没食子酸甲酯(m ethyl gallate)、Ly-11 没食子酸乙酯(ethyl gailate)、Ly-12 白桦酸(butulinic acid)、Ly-13 2-羟基熊果酸(2α-hydroxy-ursolic acid)、Ly-14 3-表白桦脂酸(3-epibetulinic acid)、Ly-15 3,3,-二甲基鞣花酸(3,3'-di-O-methylellagic acid)、Ly-16 3,5-二羟基-4-甲氧基苯甲酸(3,5-dihydroxy-4-methoxybenzoic acid)、Ly-17 鞣花酸(ellagic acid)、Ly-18阿江榄仁酸(arJunolic acid)、Ly-19 3-乙酰氧基-齐墩果酸甲酯(3-acetyl-12-ene-olea nolicacidmethylester)、Ly-20 3,3',4'-三甲基鞣花酸(3,3',4'-trimethylellagic acid)、Ly-21 麦珠子酸(alphitolic acid)、Ly-22 24-ethylcholesta-3,6-dione、Ly-23 3β,23-二羟基-12-稀-28-乌苏酸(3β,23-dihydroxyurs-12-en-28-oicacid)、Ly-24 cholest-4-en e-3,6-dione、Ly-25 3α,19α,23,24-四羟基-12-烯-28-乌苏酸(3α,19α,23,24-tetrahydrowxn rs-12-en-28-oic acid)、Ly-26 2,4,6-三叔丁基苯酚(2,4,6--tri-tert-butylphenol)、Ly-27 3-甲基鞣花酸(3-methylellagic acid)、Ly-28 没食子酸正丁酯(n-butyl gallate)、Ly-29 积雪草酸(asiatic acid)、Ly-30 4-O-乙基没食子酸(4-O-ethylgallic acid)、LY-31 3,3-二甲基鞣花酸(3,3,di-O-methylellagic acid)、Ly-32 plantainosideA、Ly-33 rubraJaleelol、Ly-34 1,2-没食子酰丙三醇(l,2-O-di-galloylglycerol)、Ly-35 robin lin、Ly-36 马斯里酸(maslinic acid)、Ly-37 α-spinasterol、Ly-38 科罗索酸(corosolic acid)、Ly-39(-)-berchemol、Ly-40 dihydrovomifoliol-O-β-D-glucopyranoside。其中有22个化合物为首次从该科属中分离得到,分别为Ly-3,Ly-4,Ly-6,Ly-9,Ly-11,Ly-12,Ly-13,Ly-14,Ly-19,Ly-20,Ly-21,Ly-22,Ly-25,Ly-26,Ly-30,Ly-32,Ly-33,Ly-34,Ly-35,Ly-37,Ly-39,Ly-40。从榄仁叶中分离得到 16个酚类,13个三萜类、7个g体类和2个木脂素类。对榄仁叶活性部位中分离得到19个单体化合物进行体外α-淀粉酶抑制活性筛选。结果显示,化合物Ly-10、Ly-15、Ly-27、Ly-28、Ly-29、Ly-37对α-淀粉酶具有较好的抑制活性。酚类化合物和三萜类化合物具有较强的α-淀粉酶抑制活性。本研究为阐明榄仁叶降血糖作用的物质基础提供重要的科学依据,为榄仁叶的进一步开发利用提供理论依据。
【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284;R285.5
【图文】：

组、榄仁提取物低剂量组（５０ｍｇ／ｋｇ＊ｄ）、榄仁提取物高剂周后，随机血糖较糖尿病模型组下降非常显著（ｐ＜0．0ｌ）榄仁叶提取物对大鼠随机血糖影响（ｍｇ／ｄＬ，0土Ｓ，邋ｎ＝１大鼠随机血糖（ｍｍｏｌ／Ｌ）逡逑一0ｗ逦ｌｗ逦２ｗ逦３ｗ８５．２±１６．９逦８６．５±１６．８逦１０１．９±１１．４逦９１．１邋士９．５３５３．３±１１５．６洲逦３３７．３±５７．４＃ｓ逦３２３．２±３６．９拙逦３７１．５±８３．３册３５６．２±６１．２逦２９０．６±７６．６逦２７１．８±３５．１逦２８１．３土５５．５＊逦３５４±１１８．６逦３３４．Ｕ８４．６逦３３６．８±８２．２逦３３８．８±６０．８逦３５５±１０９逦３２２．３±５６．２逦３０３．９±５８．６逦２７７．３±８１．４＊１，与正常组比较；ｂ＊ｐ＜0．0５，邋＊＊ｐ＜０．０１，与模型组比较逡逑血缔＜邋ｍ扣0ｆ／Ｌ）逡逑－逡逑

水平及糖负荷后血糖曲线下面积（ｐ＜０．０５）；榄仁叶提取的血糖水平降低显著（ｐ＜０．０５）邋，邋１２０ｍｉｎ时血糖水平、糖低非常显著（ｐ＜０．０１）；与阿卡波糖组不同的是，榄仁叶低空腹血糖水平（ｐ＜0．0５）。逡逑－３榄仁叶提取物对于糖耐量异常的影响（ｍｇ／ｄｌ，土Ｓ，邋血糖（ｍｍｏｌ／Ｌ）逡逑Ｏｍｉｎ逦３０ｉｎｉｎ逦６０ｍｉｎ逦１２０ｍｉｎ逦７８士１０．４逦１１８．４士１７．３逦１４２．４±６４．７逦９２．１±１２逦２逦２１２±７５．４＃＃邋４９９．３±１６０．３＃＃邋５２０．３±１５８．５＃＃逦８８逦１６５．４士３３．４逦３１７．９±１１９＊＊逦３２９．３±１６０．３＊＊逦２１６±５０．４“逦５５组逦１７６．７±５６．８邋４３０．７±１９０．７逦３８４．１±６３．６＊逦３１９．６±９２．５逦７０组逦１４０．１±３８．５＊逦３４４±７５．６＊逦３７７．７±８７．７＊逦２２５．３±７２．１＊＊逦６０．０１，与正常组比较；ｂ＊ｐ＜０．０５，邋＊＊ｐ＜０．０１，与模型组比较逡逑

给药４周后，处死动物，测定各组动物血浆血脂的水平，结果见表１－７。与正常对逡逑照组比较，糖尿病模型组的甘油三酯及总胆固醇水平的升高非常显著（Ｐ＜０．０１）；如逡逑图１－７，与糖尿病模型组比较，各给药治疗组甘油三酯的水平均有所降低，榄仁提取逡逑物高剂量组与阿卡波糖组差异显著（Ｐ＜0．0５）；如图１－〗０，与糖尿病模型组比较，阿逡逑卡波糖组、榄仁提取物低剂量组、高剂量组大鼠血浆总胆固醇的水平均无显著变化。逡逑表１－７榄仁叶提取物给药对糖尿病大鼠血脂的影响（ｍｍｏｌ／Ｌ，邋ｉ士Ｓ，邋ｎ＝１０）逡逑组别逦正常组逦模型组逦阳性药逦榄仁低剂量组逦榄仁高剂量组逡逑ＴＧ逦０．８±０．２６逦１．９４±０．８３＃＃逦１，２６±０．２９＊逦１．５１±０．４８逦１．３４±０．４＊逡逑ＴＣＨＯ邋１．２１±０．４８逦４．４４士邋１．２５ｓ＊逦４．２３邋士０．７５逦４．２４±２．２２逦４．０２±０．７３逡逑ａ＃ｐ＜０．０５，邋＃＃ｐ＜０．０１，与正组比较；ｂ＊ｐ＜０．０５，邋＊＊ｐ＜０．０１，与模型组比较逡逑ＴＧ（ｍｍｏｌ／Ｌ）逡逑ｎ逦栜逦ＴＣＨＯ（ｍｍｏｌ／Ｌ）逡逑了邋＿~栧危稿义希礤澹恚悖恚恚礤蜽正常组逡逑２逦＊逦＿配胬}弊殄危叮�逦Ｔ逦ｍｍｃｍｍｍ逡逑２ｍ逦Ｔ逦？邋＿邋■逦—逦Ｔ邋＿邋梭仁高＿逡逑N邋Ｔ邋ｔ邋■逦＿逦ｔ邋Ｔ邋ｉ邋ｍｍ逡逑＿逦：邋４１｜一逡逑。N偡耍鮼s逦ｍｕ蝴逡逑ａ＃ｐ＜０．０５

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本文编号：2773119