外用骨痛膏干预兔激素性股骨头坏死的实验研究

发布时间：2020-07-29 21:01

【摘要】：目的通过观察外用骨痛膏对兔激素性股骨头坏死骨组织中骨形态发生蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2)和血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)的表达的影响以及组织学改变,观察传统外用中药骨痛膏对激素性股骨头坏死的疗效,初步探讨其作用机制,为骨痛膏在临床中的应用提供实验依据。方法选取30只雄性新西兰大白兔,采用改良的脂多糖联合甲基强的松龙的造模方法,建立兔激素性股骨头坏死动物模型。造模完成后采用X线及MRI检查进行模型鉴定。动物模型鉴定成功后将实验动物随机分三组:空白组、模型组及实验组。将实验组兔子双侧髋关节毛发剔除干净,将骨痛膏涂抹于透气棉布上,大小约10*10cm,外敷于双侧髋部,隔日换药,连续应用4周,模型组及空白组仅常规饲养。4周后,处死实验动物,取出双侧股骨头行HE染色,显微镜下作组织学观察,统计各组空骨陷窝率;通过免疫组化检测各组股骨头组织BMP-2及VEGF表达。结果1、造模前所有兔子精神状态良好,毛色鲜亮有光泽,对外界刺激反应敏感,进食量正常,大小便正常。大部分兔子在注射激素后出现精神状态萎靡,毛发蓬松,色泽较暗淡,少量脱毛,活动较造模前减少,对外界刺激反应迟钝,进食量减退,部分出现腹泻,体重稍减轻。MRI T1加权相可见股骨头内片状低信号,T2抑脂相可见股骨头内片状不均匀信号,髋关节积液,证实造模成功。2.治疗后股骨头大体形态观察:①空白组:股骨头形态完整,表面光滑,整体呈瓷白色,未见软骨面的塌陷,骨质坚硬,切开费力;②模型组:股骨头形态完整,软骨面未见明显塌陷,股骨头表面光泽稍暗淡,整体呈青色,骨皮质明显变薄,骨质较疏松,易于切开;③实验组组:股骨头形态完整,软骨面未见明显塌陷,股骨头表面有光泽,整体呈淡白色,软骨较透明,骨质较坚硬,切开需要一定力度。3.各组股骨头HE染色观察:①空白组:骨小梁规则整齐排列,骨细胞清晰可见,细胞核较大、位于中央,髓腔内造血细胞丰富,脂肪少,空骨陷窝率为9.128%;②模型组:股骨头表面软骨层变薄,骨组织连续性中段,骨小梁排列杂乱、变细、变疏,部分骨小梁出现断裂,骨细胞核固缩,胞核变小,陷窝内骨细胞数量明显减少,空骨陷窝数量增多,髓腔内造血细胞减少,被大量肥大的脂肪细胞充斥,有的融合成泡状,空骨陷窝率为19.5920%;③实验组:股骨头表面软骨层轻微变薄,骨组织连续性尚可,骨小梁排列较规则,稍变细,破坏不明显,可见新骨生成,骨细胞分布有规律,髓腔内可见造血细胞,脂肪细胞未见明显增生增多,空骨陷窝率为15.2130%。各组空骨陷窝率经方差分析,同空白组相比,模型组与实验组空格陷窝率均较高,差异具有统计学意义(p0.05),证实造模成功;模型组与实验组之间有明显差异,具有统计学意义(p0.05)。4.免疫组化检测结果:①模型组和实验组BMP-2和VEGF的表达均低于空白组,差异具有统计学意义(p0.05);②实验组BMP-2和VEGF的表达高于模型组,差异具有统计学意义(p0.05)。结论1.脂多糖联合甲强龙诱导激素性股骨头坏死动物模型的方法,动物死亡率低,造模成功率高,简单可靠。2.激素性股骨头坏死的发生与进展与骨组织BMP-2和VEGF的表达密切相关,BMP-2和VEGF能够促进血管再生及新骨形成。3.外用骨痛膏可提高激素性股骨头坏死骨组织中BMP-2和VEGF的表达,从而促进坏死区微血管的形成及骨的修复,对激素性股骨头坏死有一定的防治作用。
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5

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本文编号：2774490