解毒通络方对心肌纤维化大鼠CTGF和TGF-β1表达的影响

发布时间：2020-07-31 16:05

【摘要】：目的:观察解毒通络方对心肌纤维化大鼠CTGF和TGF-β1表达的影响,初步探讨解毒通络方介导TGF-β1-CTGF途径干预心肌纤维化的机制。方法:36只8周龄SD雄性大鼠随机分为对照组,模型组,解毒通络方低、中、高剂量组和ACEI组,每组各6只。对照组给予5mg/kg体重生理盐水,其余各组给予5mg/kg体重盐酸异丙肾上腺素(ISO)腹腔注射,造成心肌缺血损伤模型,从造模当天开始,解毒通络方低、中、高剂量组每只大鼠每天给予浓度为1g/ml的解毒通络方原药混悬液10、20、30ml/kg体重灌胃,ACEI组给予浓度为0.5mg/ml的卡托普利混悬液10ml/kg体重灌胃。CK组给予等量蒸馏水灌胃。于造模后3d,末次给药24h后处死,取大鼠心尖部位,Masson三色染色观察计算各组胶原容积分数(CVF),免疫组化法检测TGF-β1和CTGF蛋白在心肌组织中的表达,RT-PCR法检测TGF-β1和CTGFmRNA的表达情况。结果:1.MF组心肌组织中TGF-β1和CTGF蛋白和mRNA的表达对比CK组显著增高(P0.05)2.解毒通络方高、中、低剂量组心肌组织中TGF-β1和CTGF蛋白和mRNA的表达对比MF组显著降低(P0.05)3.解毒通络方高、中、低剂量组组间对比无明显差异(P0.05)。结论:解毒通络方可能通过抑制TGF-β1和CTGF蛋白的表达减缓了心肌纤维化的发展。
【学位授予单位】：长春中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5
【图文】：

心肌细胞出现广泛坏死，形成明显纤维化病灶，灶内成纤维细胞增生，解毒通络方各组及ACEI组心肌细胞结构尚算完整，心肌纤维肿胀，排列疏松，偶见心肌细胞坏死，其中以中、高剂量组改善最为明显。见图1。图1：大鼠心肌组织HE染色结果

蓝色胶原纤维少见。模型组可见大片的蓝色胶原纤维沉积，特别是坏死灶内心机间质胶原纤维明显增多。解毒通络方各剂量组及ACEI组正常心肌细胞周围可见少量沉积胶原，坏死灶内沉积明显。见图2。图 2 大鼠 Masson 染色结果（200×）1.2.2各组大鼠每只随机选取5张切片，选定心内膜心肌坏死灶高发部位随机选取（200×）视野5个，以计算机图像分析，计算胶 原容积分数（CVF%），公式为：CVF%=胶原面积/视野面积×100%。与CK组相比，MF组大鼠的CVF显著升高（p<0.01）,与MF组相比，解毒通络方低中高剂量组和ACEI组 CVF显著下降（p<0.05）。见表1。表 1 大鼠 Masson 染色心肌胶原容积分数（% x ±s）注：与对照组比较，*P<0.01；与模型组比较，△P<0.01。组别 心肌胶原容积分数（%）对照组 4.14±1.45模?

2.1经免疫组化染色之后，TGF-β1蛋白在心肌细胞中以棕黄色颗粒存在，镜下可见：对照组未见明显的阳性表达，模型组可见心内膜周围明显棕黄色染色，表达强烈，解毒通络方各组和ACEI组棕黄染色减少。见图3、4。图3：各组大鼠TGF-β1免疫组化染色结果（200×）图4：各组大鼠CTGF免疫组化染色结果（200×）

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本文编号：2776702