痛风消2号对MSU诱导的大鼠急性痛风性关节炎抗炎作用及其机制的实验研究

发布时间：2020-08-01 07:47

【摘要】：目的:本实验通过建立尿酸钠诱导的大鼠急性痛风性关节炎模型,并给予痛风消2号进行干预,观察痛风消2号给药后对大鼠踝关节肿胀程度、关节病理学变化,以及关节中VCAM-1、ICAM-1、NF-κB表达和血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量的影响,探讨痛风消2号对大鼠急性痛风性关节炎的抗炎作用及其作用机制。方法:选取清洁级雄性SD大鼠84只,体重(180±20)g,随机分为6组,分别为空白对照组,模型对照组,西药对照组,痛风消2号高剂量组,痛风消2号中剂量组,痛风消2号低剂量组,每组14只。水提中药痛风消2号制成片剂;西药对照组选用秋水仙碱片。灌胃给药18天,除空白对照组的大鼠外,其余各组大鼠均选右后肢踝关节以4号针头向关节腔注入0.2ml尿酸钠溶液1次,以关节囊对侧鼓起为注入标准,诱导急性痛风性关节炎模型,模型复制成功后继续灌胃给药至取材当日,造模前后测量踝关节周长。造模4天后麻醉动物,每组14只,腹主动脉采血,在室温下静置2h后,分离血清,-20℃冻存,以便ELISA法测量IL-1β、IL-6、TNF-α含量;采血后处死动物,取下其受试关节组织放入甲醛中固定一周,之后放入EDTA中固定,经脱水、包埋之后制成石蜡切片,并做HE染色和免疫组化。结果:大鼠踝关节周长:造模1h后,模型对照组的大鼠踝关节周长与空白对照组相比较,差异性显著(P0.01);造模5h后,痛风消2号高剂量组与模型对照组相比均有显著性差异(P0.01);造模24h后,痛风消2号高剂量组与模型对照组相比均有显著性差异(P0.01);造模48h后,痛风消2号高剂量组与模型对照组相比均有显著性差异(P0.01);造模72h后,痛风消2号高剂量组与模型对照组有显著性差异(P0.01)。大鼠血清炎症介质结果:与空白对照组相比,模型对照组大鼠血清IL-1β含量显著升高,差异性显著(P0.01);痛风消2号高剂量组大鼠血清中IL-1β含量与模型对照组比较,虽无差异,但数值明显降低;模型对照组的大鼠血清IL-6含量与空白对照组相比,显著升高,差异性显著(P0.01);痛风消2号高剂量组与模型对照组相比,IL-6含量降低,差异性显著(P0.01);模型对照组大鼠血清中TNF-α含量与空白对照组比较,数值明显升高,有显著性差异(P0.01);痛风消2号高剂量组与模型组比较,TNF-α含量有明显下降,有显著性差异(P0.01)。大鼠免疫组化结果:模型对照组VCAM-1、ICAM-1、NF-κB细胞平均光密度与空白对照组比较,数值均明显升高,并有显著性差异(P0.01);痛风消2号高剂量组与模型组比较,VCAM-1的细胞平均光密度值明显下降,有显著性差异(P0.01);痛风消2号高剂量组与模型组比较,ICAM-1的细胞平均光密度值明显下降,有显著性差异(P0.01);痛风消2号高剂量组与模型组比较,NF-κB的细胞平均光密度值明显下降,有显著性差异(P0.01)。大鼠关节病理学变化:光镜下显示痛风消2号给药组关节滑膜部分增生,有较轻的炎症反应。结论:1.痛风消2号可明显抑制痛风性关节炎模型大鼠踝关节肿胀度。2.痛风消2号能明显抑制痛风性关节炎模型大鼠的血清中TNF-α、IL-1β与IL-6的含量。3.痛风消2号能明显抑制痛风性关节炎模型大鼠踝关节局部中的VCAM-1、ICAM-1、NF-κB的蛋白表达。4.痛风消2号可明显改善痛风性关节炎模型大鼠局部炎细胞浸润和减轻滑膜组织增生。5.痛风消2号的抗炎作用机制可能与降低关节滑膜NF-κB信号通路有关,通过抑制转录因子NF-κB的产生,进而抑制细胞因子IL-1β,抑制炎症级联反应,从而减少TNF-α和IL-6等炎症介质的释放,进一步抑制ICAM-1、VCAM-1 表达。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285.5

【参考文献】