同源药材桑枝、桑白皮功效与物质基础相关性研究

发布时间：2020-08-02 16:19

【摘要】：目的:阐明造成同源药材(桑枝和桑白皮)功效差异的关键药效物质,为二者质量控制和国家标准完善提供科学依据,也为合理利用桑源中药提供证据。方法:1.采用HPLC技术对桑不同药用部位进行分析,优化色谱条件使化学成分得到最大化表征,从而尽可能的揭示各不同药用部位在化学组成上的异同。2.利用UPLC-QTOF-MS提供的质谱信息,结合课题组前期分离的对照品,对桑枝、桑白皮成分进行鉴定,明确桑枝、桑白皮的共性和差异成分。3.对桑枝、桑白皮的主要成分进行HPLC定量,并归纳二者差异成分的含量、比例关系等信息。4.选取代表性的桑枝、桑白皮药材提取物开展与传统功效相关的药效评价。针对桑枝和桑白皮都具有抗炎的共同特点,选择二甲苯致小鼠耳肿胀炎症动物模型评价二者抗炎作用。以小鼠氨水诱咳试验评价桑白皮的平喘作用。5.将化学信息和药效信息相对应,利用化学计量学手段,分析主要成分、差异成分与功效的相关性。结果:1.建立了桑不同药用部位的HPLC指纹图谱及共有模式图,桑白皮共有峰10个,桑枝共有峰11个,桑叶共有峰12个,桑椹共有峰8个。基于对照品比对和UPLC-QTOF/MS提供的精确相对分子量对10个特征峰进行了指认。2.采用UPLC-QTOF/MS技术,根据化合物的精确相对分子量,桑枝桑白皮共标定了147个峰,其中二者共有35个,桑白皮特有55个,桑枝特有57个;结合二级质谱裂解信息对桑枝、桑白皮成分进行推测,鉴定了39个化合物,二苯乙烯类16个,2-芳基苯并呋喃类4个,香豆素类化合物4个,黄酮类10个,diels-alder型加合物3个,酚酸类1个,生物碱1个。3.建立了桑枝、桑白皮中5种主要成分的hplc含量测定方法,对53批桑白皮和54批桑枝药材进行测定。桑白皮的指标成分为桑皮苷a、氧化白藜芦醇、桑酮g、桑酮h、桑辛素;桑枝的指标成分为桑皮苷a、氧化白藜芦醇、桑酮g、柘树黄酮c、桑辛素。明确了桑枝、桑白皮的共性成分及专属性成分以及它们在多批次药材中的含量。同时,对桑白皮产地加工过程中去皮的合理性进行分析。4.二甲苯致小鼠耳肿胀试验中,桑白皮高剂量(9.6g/kg),低剂量(2.4g/kg)及桑枝高剂量(12g/kg)组小鼠耳肿胀度均明显降低,结果具有显著性差异(p0.05或p0.01);小鼠氨水诱咳实验中,桑白皮高、低剂量组都可以减少咳嗽小鼠的咳嗽次数,与模型对照组相比,结果有显著性差异(咳嗽潜伏期p0.01,咳嗽次数p0.001;咳嗽潜伏期p0.05,咳嗽次数p0.01)。桑枝高、低剂量与模型对照组相比均无显著性差异。5.桑枝、桑白皮均有抗炎作用,可能是二苯乙烯类(桑皮苷a)和黄酮类(桑酮g、桑酮h、柘树黄酮c、桑辛素等)成分共同作用的结果;桑白皮的止咳作用可能与其桑皮苷a的含量较高有关。6.综述了桑枝、桑白皮化学成分、药理活性及质量评价研究进展。结论:通过多批次药材的定性定量比较,基本明确了桑枝、桑白皮化学成分的共性和差异性。桑皮苷a、氧化白藜芦醇、桑酮g、和桑辛素4个成分为桑枝、桑白皮所共有,但成分的含量和比例差异非常大。桑酮h为桑白皮的特有成分,柘树黄酮c为桑枝的特有成分。另外,对桑白皮产地加工过程中去皮的合理性进行分析。药效实验表明,桑枝、桑白皮均有抗炎作用,可能是二苯乙烯类和黄酮类成分共同作用的结果;桑白皮的止咳作用可能与其桑皮苷a的含量较高有关。研究结果可为桑枝、桑白皮的质量控制和国家标准完善提供参考数据和建议。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R284.1;R285.5
【图文】：

市售桑白皮饮片图

图 1-2 市售桑枝饮片图1.2 方法1.2.1 HPLC 色谱条件色谱柱为 Agilent Eclipse XDB C18（4.6×250 mm，5 μm） ；以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相，梯度洗脱：0 ~ 5 min，9%A；5 ~ 13 min，9% ~ 13%A；13 ~22 min，13% ~ 22%A；22 ~ 31 min，22% ~ 34%A；31 ~ 44 min，34% ~ 48%A；44 ~ 54min，48% ~ 53%A；54 ~ 59 min，53% ~ 65%A；59 ~ 75 min，65%A；75 ~ 80 min，65% ~ 79%A。流速 1.0 mL min-1，柱温 30℃，检测波长 254 nm，进样体积 10 μL。1.2.2 UPLC-MS 条件色谱柱为 ACQUITY UPLC BEH C18(2.1×100 mm，1.7 μm)，以乙腈（A）-0.1%甲酸水（B）为流动相，梯度洗脱：0 ~ 3 min，12%~50%A；3 ~ 8 min，50% ~ 70%A；

桑白皮HPLC指纹图谱

【参考文献】

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本文编号：2778763