【摘要】:唐古特白刺(Nitraria tangutorun Bobr.)是蒺叕科(Zygophyllceae)白刺属(Nitraria)植物,其果实药食同源。唐古特白刺果实富含多糖,研究表明唐古特白刺果实多糖具有免疫调节和抗氧化等生物活性,具有巨大的开发利用价值。本研究主要对唐古特白刺果实多糖提取工艺、脱色工艺、羧甲基化修饰、羧甲基化修饰前后白刺多糖的化学表征及其抗氧化和免疫活性等方面进行了研究,以期能够为开发利用唐古特白刺多糖提供实验依据。主要实验结果如下:1.优化植物多糖提取工艺可以减少资源浪费,降低能耗。本研究在单因素实验的基础上,采用响应面法分别优化了热水浸提唐古特白刺多糖和酶辅助提取唐古特白刺多糖的工艺。热水浸提法的最佳提取条件为:提取温度79 ℃,提取时间1.5 h和料液比1:15,再此条件下提取两次,白刺多糖得率为39.67 ±0.02%。酶辅助提取法较优的提取条件为:酶用量2.5%,pH = 3,提取时间58 min和提取温度40.0℃,提取一次,白刺多糖得率为39.57 ±0.11%。酶辅助提取唐古特白刺多糖缩短了提取时间、降低了提取温度、减少了提取次数,大幅度降低了提取过程中的能耗。2.从植物原材料中提取获得的植物粗多糖通常具有较深的颜色,严重限制了植物多糖在食品和药品中的应用。为了有效解决这一问题,本研究采用大孔树脂吸附法对白刺粗多糖溶液进行脱色,并对脱色工艺进行了优化。利用静态吸附实验,从10种大孔树脂中筛选出HPD-100A大孔吸附树脂作为脱色树脂,并考察了pH对大孔树脂脱色、多糖回收率和脱蛋白的影响;利用动态吸附实验考察了上样流速和上样浓度对大孔树脂脱色和脱蛋白的影响。最终优化的脱色条件为:采用HPD-100A大孔吸附树脂作为脱色树脂,白刺粗多糖溶液浓度为1.04mg/mL,pH =5,上样流速为1.5 BV/h。在此条件下白刺粗多糖的脱色率为74.78%,脱蛋白率为70.96%,多糖的回收率为86.31%。3.目前多用化学方法对多糖进行结构修饰,本研究采用氢氧化钠-氯乙酸法制备得到取代度为0.36的羧甲基化白刺多糖,产率为51.38%,并测定了修饰前后白刺多糖中蛋白质、糖醛酸和总糖的含量。采用HPLC柱前衍生的方法对白刺多糖(N.tangutorun Bobr.Polysaccharides,NTP)和和(carboxymethylated N.tangutorun Bobr.Polysaccharides,CMNTP)的单糖组成进行了分析,结果表明NTP和CMNTP都是由甘露糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖7种单糖组成的。采用HPGPC法测定NTP和CMNTP多糖的分子量,NTP的分子量为 74359 Da-438665 Da,CMNTP 的分子量为 11459 Da-80385 Da。红外光谱分析结果显示,NTP和CMNTP具有糖类的特征吸收峰,羧甲基化修饰后,红外光谱中出现了羧甲基的特征吸收。刚果红实验结果表明,NTP和CMNTP都具有三股螺旋结构。4.采用羟基、超氧阴离子和DPPH自由基体系,测定NTP和CMNTP的体外抗氧化活性。结果表明:NTP和CMNTP对羟基、超氧阴离子和DPPH自由基有不同程度的清除作用,经羧甲基化修饰后,白刺多糖清除羟基和超氧阴离子自由基的能力显著提高。5.本实验采用环磷酰胺诱导小鼠免疫受抑制模型,研究白刺NTP和CMNTP对免疫抑制小鼠免疫的调节作用。结果表明,NTP和CMNTP能够显著提高环磷酰胺诱导的免疫受抑制小鼠的胸腺指数和脾脏指数(p0.05),能够显著提高免疫受抑制小鼠血清IFN-γ和IL-4水平(p0.05),能够改善Thl/Th2免疫平衡失衡状况,增加小肠绒毛长度,减少V/C值的下降,促进小鼠小肠中SIgA的分泌,并且经过羧甲基化修饰后,白刺多糖的免疫调节活性提高。
【学位授予单位】:陕西师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:R285.5;R284.2
【图文】: 陕西师范大学硕士学位论文逡逑表2-1葡萄糖标准品线性实验结果(《邋=邋3)逡逑Table邋2-1邋Results邋of邋linearity邋experiment邋of邋Glucose邋(n邋=邋3)逡逑浓度逡逑0.01逦0.02逦0.03逦0.04逦0.05逦0.06逦0.07逦0.08逦0.09逡逑g/mL)逡逑光值逡逑0.1162逦0.1909逦0.2798逦0.3680逦0.4615逦0.5504逦0.6150逦0.7092逦0.7868逡逑(A)1.20-逡逑
逦1逡逑0.00逦0.02逦0.04逦0.06逦0.08逦0.10逦0.12逦0.14邋mg/mL逡逑图2-1葡萄糖溶液标准曲线(I土邋SD,/7邋=邋3)逡逑Fig邋2-1邋Calibration邋curve邋of邋Glucose邋(x邋土邋SD,邋;7邋=邋3)逡逑(2)
逦1逡逑0.00逦0.02逦0.04逦0.06逦0.08逦0.10逦0.12逦0.14邋mg/mL逡逑图2-1葡萄糖溶液标准曲线(I土邋SD,/7邋=邋3)逡逑Fig邋2-1邋Calibration邋curve邋of邋Glucose邋(x邋土邋SD,邋;7邋=邋3)逡逑(2)
【参考文献】
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本文编号:
2778949
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