当归不同部位的化学成分与补血作用研究

发布时间：2020-08-05 15:45

【摘要】：当归为常用中药材,具有补血活血,调经止痛,润肠通便的功效。迄今为止,已发现的当归有效成分有多糖、挥发油、有机酸、黄酮等;药理作用有改善贫血、调节子宫平滑肌、润肠等。然而,当归传统以根入药,关于当归资源的利用与报道基本上全集中在当归根的研究上,对其茎叶部位的化学成分及药理学研究鲜有报道,造成了资源的大量的浪费;另一方面人们对于当归的研究多为干品,对于当归鲜品的研究也很少,因此本论文在前期实验的基础上,主要从化学成分以及补血作用两个方面对当归不同部位及当归鲜品(榨汁液)与干品(水煎液)分别进行了相关的研究,旨在为当归全药材资源的综合利用提供一定的科学依据。其内容如下:一、当归不同部位的HPLC指纹图谱、多糖含量及挥发性成分研究采用HPLC法建立了当归不同部位(根与茎叶)HPLC色谱图,采用UV测定当归根与茎叶中多糖的含量,采用GC-MS检测当归根与茎叶中的挥发性成分。结果显示当归不同部位HPLC指纹图谱、多糖含量、挥发性成分均具有一定的差异性,且当归根中阿魏酸的相对峰面积、多糖含量、挥发性主要成分Z-藁本内酯与正丁烯基苯酞的相对含量均高于当归茎叶,旨在为扩大当归药材的用药范围提供一定的实验依据。二、当归不同部位的补血作用研究采用乙酰苯肼建立血虚模型,造模第1天给予当归与茎叶水煎液灌胃治疗,13天后取材,通过检测其血常规、脏器指数、生化指标以及肝脾HE染色病理切片观察来探讨当归不同部位(根与茎叶)对溶血性血虚小鼠的干预作用。结果显示,与模型组相比,当归根与茎叶的各项指标均具有一定的统计学意义(P㩳0.05或P㩳0.01),另外,病理切片显示当归茎叶水煎液和当归根水煎液均可减轻APH所致小鼠肝脏、脾脏细胞的点状坏死及淤血。说明当归根与茎叶对于溶血性贫血均具有一定的改善作用,且当归根的效果较好,但相对于模型组小鼠来说,当归茎叶各项指标仍具有一定的统计学意义(P㩳0.05或P㩳0.01),表明当归茎叶具有一定的可开发价值。三、当归不同部位水煎液与榨汁液的HPLC指纹图谱、多糖含量及挥发性成分研究采用HPLC法建立了当归不同部位(根与茎叶)水煎液与榨汁液HPLC色谱图,采用UV测定当归不同部位(根与茎叶)水煎液与榨汁液多糖的含量,采用GC-MS检测当归不同部位(根与茎叶)水煎液与榨汁液的挥发性成分。结果显示当归不同部位水煎液与榨汁液HPLC指纹图谱、多糖含量、挥发性成分均具有一定的差异性,且当归茎叶榨汁液中阿魏酸的相对峰面积、多糖含量、挥发性主要成分Z-藁本内酯与正丁烯基苯酞的相对含量均高于当归茎叶水煎液;当归根榨汁液中除Z-藁本内酯与正丁烯基苯酞的相对含量高于当归根水煎液外,多糖含量与阿魏酸相对峰面积均略低于当归根水煎液,旨在为当归鲜药材的开发利用提供一定的实验依据。四、当归不同部位水煎液与榨汁液的补血作用研究采用乙酰苯肼建立血虚模型,造模第1天给予当归不同部位榨汁液与水煎液灌胃治疗,13天后取样,通过检测其血常规、脏器指数、生化指标以及肝脾HE染色病理切片观察来探讨当归不同部位(根与茎叶)水煎液与榨汁液对溶血性血虚小鼠的干预作用,结果显示,与模型组相比,当归不同部位榨汁液与水煎液的各项检测检测指标均具有一定的统计学意义((P㩳0.05或(P㩳0.01);另外,病理切片显示鲜当归榨汁液和当归水煎液均可减轻APH所致小鼠肝脾脏细胞的点状坏死及淤血。说明当归不同部位榨汁液与水煎液对溶血性血虚模型均具有一定的改善作用,且榨汁液效果较水煎液好,旨在为当归鲜品资源的开发利用提供一定的实验依据。
【学位授予单位】：甘肃中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R285;R284.1
【图文】：

HPLC色谱,当归,根重,复性

每次 10 uL，记录色谱图谱，以阿魏酸的保留时间和峰面积为参照，测的各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均<3 %，各指纹图谱相似度在 0.984~1.000，表明仪器精密度良好。2.4.2 稳定性试验精密称取当归根粉末约 0.5 g，按 2.2 项下制备供试品溶液，置于室温，分别于 0 h，4 h，8.h，12.h，24.h，36.h 进样检测，记录色谱图谱，以阿魏酸的保留时间和峰面积为参照，测的各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均<3 %，各指纹图谱相似度在 0.957~1.000，表明室温下当归根供试品溶液在 36 h 内稳定性良好。2.4.3 重复性试验精密称取当归根粉末约 0.5 g，平行 6 份，按 2.2 项下制备供试品溶液，按 2.3 项下分别进样检测，记录色谱图谱，测的各主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD均<3%，各指纹图谱相似度在 0.991~1.000，表明重复性良好，其色谱图见图 1-1。

HPLC色谱,阿魏酸,对照品,当归

当归不同部位的化学成分与补血作用研究2.5 当归根与茎叶 HPLC 指纹图谱方法的建立[5-7]2.5.1 特征指纹峰的选择将当归根与茎叶中各组分相对保留时间按从小到大的顺序依次排列，并在每个相对保留时间下标出该组分的相对面积，以相对峰面积≥1%来比较当归根与茎叶样品中相同保留时间值的相对峰面积。2.5.2 参照峰的标定本实验选择保留时间为 27.60±0.13min 的色谱峰为参照峰计算各色谱峰的相对保留时间和相对保留峰面积，即 10 号峰，因 10 号峰为阿魏酸，是药典规定的指标性成分，阿魏酸对照品 HPLC 色谱图见图 1-2。

色谱图,当归,茎叶,色图

当归不同部位的化学成分与补血作用研究二者共有峰 12 个，除 10 号峰（阿魏酸）和 4 号峰外，其余的 9 个共有色谱峰中当归茎叶的相对峰面积均大于当归根的相对峰面积，且 2、13、14 号峰当归茎叶相对峰面积是当归根的 10 倍左右。除共有峰外，当归茎叶 6 号峰的相对峰面积（14.36%）也较大，在 10%以上；当归根中 10、24 号峰，即阿魏酸（8.099%）、藁本内酯（71.973%）相对峰面积均较高于当归茎叶中阿魏酸（0.571%）与藁本内酯（2.365%）相对峰面积。对比当归根与茎叶 HPLC 色谱图可以看出，在 15~50 min 时间段，当归茎叶色谱峰较当归根多，尤其是在 15~30 min 时间段，当归茎叶除去已标定的特征峰之外，还有许多色谱峰，表明当归茎叶中存在许多极性大成分。

【参考文献】