东革阿里总黄酮抗氧化活性及多糖结构表征与免疫调节活性研究

发布时间：2020-08-07 05:16

【摘要】：东革阿里(Eurycoma longifolia)为苦木科东革阿里属植物,产自东南亚地区的一种传统草药。本论文以马来西亚东革阿里树根为原料,先提取纯化出东革阿里总黄酮和多糖,再进行结构鉴定,最后用不同的生化指标和细胞模型评估其生物活性,即东革阿里总黄酮的化学和CAA抗氧化活性、多糖的免疫调节活性和抗AAPH氧化溶血活性。选用AB-8大孔吸附树脂分离东革阿里总黄酮,黄酮的吸附率为76.57%,经冻干后得到东革阿里总黄酮样品;然后通过紫外全波长扫描和红外吸收光谱初步分析了其所含官能团和结构特征;再对东革阿里总黄酮进行的体外化学抗氧化能力测定,结果说明:在样品浓度范围内对DPPH自由基、超氧自由基均具有较好的清除效果,对铁离子具有较好的还原力;ORAC值和HepG2细胞抗氧化活性结果表明:东革阿里总黄酮ORAC值为2302.48μmol TE/g,EC_(50)值为192.27μg/mL,CAA值为为4.10μmol QE/100μmol of total flavonoid,与一般植物黄酮的ORAC值和细胞抗氧化活性对比,东革阿里总黄酮处于较优抗氧化水平。采用水提醇沉法分离东革阿里粗多糖,其得率为6.93%;经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和G-50凝胶柱层析进一步纯化出Ali-1组分,经检测样品纯度为95.42%。高效凝胶渗透色谱法测得Ali-1分子量为14.3Ku;红外光谱扫描显示Ali-1含有多糖特征吸收峰;单糖组成分析表明Ali-1其组成主要为阿拉伯糖、木糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸,其摩尔百分比分别为14.31%、57.69%、13.03%和14.86%;核磁共振分析及甲基化结果表明Ali-1组分的主链主要由1,4-Xylp糖苷键连接,并以1,2,4-Xylp糖苷键为分支点与支链相连接,其摩尔百分比分别为31.07%和22.68%;支链主要由1,2-GlcpA(12.99%)和1,2-Araf(9.71%)糖苷键组成,且支链末端以T-GalpA(12.30%)和T-Arap(11.25%)糖苷键终止。另外扫描电子显微镜观察到Ali-1具有片状外观,并伴随卵形颗粒随机分布在其整个微观结构中。最后采用小鼠巨噬细胞RAW264.7模型证明Ali-1能促进细胞分泌免疫因子NO、TNF-α和IL-6并伴随一定程度的剂量效应,从而表现出较好的免疫调节活性。同时选用体外红细胞抗氧化模型来评价Ali-1的抗氧化活性,在一定的样品浓度范围内,Ali-1可以保护人血红细胞免受AAPH的损伤,也具有一定的抗氧化活性。
【学位授予单位】：华南理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R284.2;R285.5;O657.3
【图文】：

阿里,植物成分,化学结构式,原子数

表 1-1 东革阿里苦木素类化合物Table 1-1 The Quassinoids compound in Eurycoma longifoliaC 原子数目化合物名称化学结构式C17Laurycolactone 见图 1-1CC18Eurycolactone B 见图 1-1DC19EurycomalideA 见图 1-1EC19Eurylactone 见图 1-1FC19Longilactone 见图 1-1GC19Eurycomalactone 见图 1-1HC20Eurycomanone 见图 1-1IC20Eurycomanol 见图 1-1JC20Pasakbumin B 见图 1-1KC20Hydroxyklaineanone 见图 1-1L

酮类化合物,基本结构

onoids）是植物经光合作用后，植物所的 2-苯基色原酮为基形，见图 1-2，主其在自然界分布范围广，目前文献报道茎叶，如芹菜、银杏叶、茶叶等；存在果实的皮中，如柑橘、柠檬皮；存在于黄酮类、异黄酮类、黄酮醇类、黄烷酮系的深入研究，发现其具有许多重要的增强免疫等[32-33]。

阿里,总黄酮含量,统计软件,单因素方差分析

取东革阿里纯化后黄酮冻干样品 10mg，压片后上机扫析。 3 组平行，结果以平均值±标准方差（mean±SD）表示 17.0 统计软件的单因素方差分析（one-wayANOVA）和）方法进行数据统计。论总黄酮含量的测定l(NO3)3-NaNO2的方法，得到如图 2-1 所示的标曲，同时130，y 为样液吸光值，x 为总黄酮含量。线性相关系数关系良好。经测定，东革阿里粗提液中总黄酮含量为

【参考文献】