黄芥籽中活性成分的制备及其抗氧化活性评价

发布时间：2020-08-09 22:25

【摘要】：随着科技发展及生活水平提高,现代人们日常接触到越来越多的辐射以及致癌物,这些物质进入体内,能够诱导过量的自由基产生,使机体的抗氧化系统紊乱,导致氧化还原失衡,引起氧化应激,从而导致衰老及多种慢性病的发生。因此采取有效手段清除过量自由基,对于减缓衰老以及改善人们健康状况意义重大。科学研究表明,西兰花、芥菜等十字花科植物具有抗氧化、抗癌等活性,经常食用十字花科植物能够降低多种慢性病的发生。本文以芥菜的种子黄芥籽为原料,对其水提取的工艺及水解条件进行了优化,分别得到了黄芥籽水提物及水解产物,并对二者进行了成分分析及抗氧化活性的评价。本论文主要的研究内容如下:本实验以黄芥籽水提物中的硫苷及多酚含量为响应值,对黄芥籽的水提取工艺进行了单因素及响应面优化,确定黄芥籽水提物中总硫苷及总酚含量最优的提取条件为:提取温度92 ℃,料液比1:40(w/w),提取时间2.0h并对水提物进行了理化成分分析,其中主要的活性成分硫苷、多酚及黄酮的含量分别为56.94 ±0.32、15.29 ±0.40、10.67 ± 0.83 mg/g。之后通过DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及FRAP亚铁离子还原能力测定对黄芥籽水提物的体外抗氧化活性进行研究,结果发现黄芥籽水提物不具有DPPH自由基清除能力,具有良好的羟自由基清除能力及亚铁离子还原能力。通过单因素实验和响应面法对黄芥籽的水解条件进行了优化,确定黄芥籽水解产物中主要活性成分AITC含量最优的水解条件为:pH 6.0、抗坏血酸添加量2.0 mg、EDTA添加量1.2 mmol;在此条件下异硫氰酸酯的产量为8.17±0.35mg/g。采用气质联用法对其水解产物进行了成分分析,共分离出34种物质,包含异硫氰酸酯类、脂类、醛类、酸类等,其中烯丙基异硫氰酸酯及亚油酸响应值最高。本实验采用H2O2诱导HepG2细胞成功建立细胞抗氧化模型,通过MTT实验及细胞凋亡实验确定了黄芥籽水提物及水解产物对HepG2细胞的安全剂量,并对其抗氧化能力进行了评价。研究表明,黄芥籽水提物及水解产物能够显著增强氧化损伤细胞的活力及细胞内抗氧化酶SOD、CAT及GSH-Px的活力,并且能够显著降低受损伤细胞LDH泄漏率、细胞内ROS及MDA的含量。综合以上,可以确定黄芥籽水提物及水解产物可以显著缓解HepG2细胞由H202诱导的氧化损伤。
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R284;R285
【图文】：

０逡逑ＳＦＮ逡逑图１－３常见的异硫氰酸酯的结构示意图逡逑Ｆｉｇ．邋１－３邋Ｔｈｅ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ邋ｏｆ邋ｃｏｍｍｏｎ邋ｉｓｏｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅｓ逡逑１．４．３．２异硫氰酸酯的分析方法逡逑（１）

逦１：６０逡逑料液比（ｗＡｖ）邋＋硫苷＋总酚逡逑图３－４料液比对黄芥籽水提物中硫苷及总酚含量的影响逡逑Ｆｉｇ．邋３－４邋Ｅｆｆｅｃｔ邋ｏｆ邋ｆｅｅｄ邋ｌｉｑｕｉｄ邋ｒａｔｉｏ邋ｏｎ邋ｔｏｔａｌ邋ｃｏｎｔｅｎｔ邋ｏｆ邋ｇｌｕｃｏｓｉｎｏｌａｔｅｓ邋ａｎｄ邋ｐｈｅｎｏｌｓ邋ｉｎ邋ａｑｕｅｏｕｓ邋ｅｘｔｒａｃｔ邋ｏｆ逡逑ｙｅｌｌｏｗ邋ｍｕｓｔａｒｄ逡逑注：不同字母代表各组间数据具有差异显著性（Ｐ＜邋０．０５）逡逑３．１．３．３提取时间对黄芥籽水提物中总硫苷及总酚含量的影响逡逑提取时间对黄芥籽水提物中硫苷及总酚含量的影响见图３－５。由图３－５可见，随逡逑着提取时间的增加黄芥籽水提物中的硫苷和总酚含量均呈现先升高后下降的趋势，提逡逑取时间由１．０邋ｈ增加到２．０邋ｈ时，硫苷及总酚含量增加比较明显，但２．０邋ｈ后两者含量逡逑开始下降，因提取时间过长，使得多酚在相对高的温度条件下发生降解，并且过长的逡逑提取时间使多糖，果胶，蛋白等水溶性杂质溶出增加，从节省时间考虑，确定最佳提逡逑取时间为２．０邋ｈ。逡逑５５邋－Ｉ逦ｒ逦１６逡逑＾邋ｂ邋ｂ邋－１４邋＾逡逑Ｊ邋４０邋－逦＼逦Ｊ逡逑ｉＷ逦ａ逦ｆ邋＇邋１３邋＊ｉ逡逑＜＾ｉ邋３３逦ａ逦邻逡逑细逦？逦１２逦ｇ逡逑ｍ邋３０＇逦铒逡逑２５－逦．逦１１逡逑２０邋－Ｊ逦．逦．逦．逦．逦１－邋１０逡逑１．０逦１．５逦２．０逦２．５逦３．０逡逑提取时间（ｈ）逦一■一硫苷一＾一总酚逡逑图３－５提取时间对黄芥籽水提物中硫苷及总酚含量的

图３－６响应面交互作用分析逡逑Ｆｉｇ．邋３－６邋Ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ｒｅｓｐｏｎｓｅ邋ｓｕｒｆａｃｅ邋ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ逡逑总酚含量的回归方程：逡逑Ｙ邋ｉ＝ｌ邋５．２６－０．５５邋Ａ＋０．１０Ｂ－０．１６Ｃ－２．５００Ｅ－００３ＡＢ＋０．１邋９ＡＣ＋０．１４ＢＣ－０．９２Ａ２－０．４４Ｂ２－逡逑０．４６Ｃ２。逡逑总酚含量的各因素方差分析见表３－３。逡逑表３－３方差分析逡逑Ｔａｂｌｅ邋３－３邋Ｖａｒｉａｎｃｅ邋ａｎａｌｙｓｉｓ邋ｏｆ邋ｒｅｓｐｏｎｓｅ邋ｓｕｒｆａｃｅ邋ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ逡逑来源逦平方和逦自由度逦均方逦Ｆ？逦Ｐ值逦显著性逡逑模型逦６．８４逦９逦０．７６逦１７９．４５逦＜０．０００１逦显著逡逑Ａ逦0．0３４逦１逦０．０３４逦７．９５逦０．０２５８逡逑Ｂ逦0．0４８逦Ｉ逦０．０４８逦１１．４５逦０．０１１７逡逑Ｃ逦０．５９逦１逦０．５９逦１４０．３２逦＜０．０００１逡逑ＡＢ逦０．０４３逦Ｉ逦０．０４３逦１０．１８逦０．０１５３逡逑ＡＣ逦０．１７逦Ｉ逦０．１７逦４０．７３逦０．０００４逡逑

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本文编号：2787639