丹皮酚对缺氧大鼠PASMCs炎症介质的影响

发布时间：2020-08-10 09:58

【摘要】：肺动脉高压是一种以肺血管重构为主要病变的综合性疾病,其早期表现通常是以炎性反应为主。肺动脉高压患者在患病后随着自身血流动力学的改变,体力会急剧下滑,并会出现心绞痛及呼吸困难等症,更严重的还会发生右心衰竭而导致患者死亡。丹皮酚,是从毛茛科植物芍药、牡丹以及萝呮科植物徐长卿中提取的一种活性成分。丹皮酚具有解热、镇痛、抗炎、保护心血管系统等功效。而近年来,多位研究人员发现,丹皮酚能够很好的抑制血管组织内炎症介质的释放作用。因此,本文所探究的重点便在于,丹皮酚是否能够通过抑制肺动脉炎症介质的释放,来缓解并改善肺动脉高压所出现的肺炎症反映,从而缓解肺动脉高压症状,为肺动脉高压疾病的治疗提供新的思路和方法。实验通过缺氧箱制造缺氧环境来进行肺动脉高压大鼠造模。选取炎症反映的重要介质细胞间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1作为炎症介质指标。实验采用右心导管法和苏木精—伊红染色法检查造模是否成功。免疫组化技术来观察大鼠肺组织血管形态的的变化,了解丹皮酚对炎症浸润的影响。使用蛋白质印迹法检测三组SD雄性大鼠肺组织中的间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1水平来了解丹皮酚对炎症介质表达的影响。体外培养大鼠肺动脉血管平滑肌细胞。通过实时定量PCR法和蛋白质印迹法检测了不同缺氧时间、不同浓度梯度下大鼠肺动脉血管平滑肌细胞中间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1等炎症介质的mRNA和蛋白水平的表达。采用体外噻唑蓝比色法检测了不同浓度梯度丹皮酚对缺氧环境下大鼠肺动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。最后实验通过实时定量PCR法和蛋白质印迹法,检测了常氧、缺氧、加抑制剂、加丹皮酚、同时添加抑制剂与丹皮酚等五组大鼠肺动脉平滑肌细胞中炎症介质间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1的mRNA和蛋白水平的表达情况,并通过蛋白质印迹法检测了五组条件下p38通路活化的情况。以此研究丹皮酚在大鼠肺动脉平滑肌细胞中通过p38通路对这些炎症介质的作用。通过对实验结果分析,研究发现丹皮酚能够抑制甚至逆转缺氧造成的肺动脉血管壁增厚和血管腔狭窄这一病理改变。显著改善缺氧引起的右心室收缩压升高及肺组织炎性浸润情况,并能够降低肺组织中间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1等炎症介质的表达。实验还发现在缺氧环境下,肺动脉平滑肌细胞中间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1等炎症介质的水平,与缺氧时间成正相关,其会到缺氧24小时后达到最高。该作用也呈剂量依赖,当丹皮酚给药浓度为120mmol·L-1时效果最佳。当对体外培养的大鼠肺动脉血管平滑肌细胞分别加入p38抑制剂、丹皮酚、p38抑制剂+丹皮酚时,发现其对间黏附因子-1、白细胞介素-6以及血管细胞黏附因子-1等炎症介质的表达趋势一致,且p38抑制剂与丹皮酚具有协同作用,综上我们可以得出丹皮酚对肺组织炎症反应有很好的抑制作用,可以很好的缓解肺高压反应。且这一作用是通过p38通路来实现的。
【学位授予单位】：哈尔滨商业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R285.5
【图文】：

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本文编号：2787930