Ki-67在ANE诱导的口腔黏膜FB细胞中的表达及中药干预

发布时间：2020-08-12 05:43

【摘要】：目的:运用血清药理学方法及体外细胞培养技术,观察丹玄口康含药血清对槟榔提取物(ANE)刺激下的口腔黏膜成纤维细胞(FB)细胞增殖分裂及肿瘤增殖抗原Ki-67表达的影响。方法:1.将30只SD大鼠随机分为3组,每组10只分别灌胃生理盐水、低剂量丹玄口康、高剂量丹玄口康,制备正常血清和含药血清。2.运用组织块法进行口腔黏膜成纤维细胞培养,取第三代或第四代细胞用于实验。(1)免疫细胞化学染色SP法鉴定口腔黏膜成纤维细胞。(2)将细胞接种后分为4组:A空白对照组、B正常血清组、C含药血清低剂量组、D含药血清高剂量组,分别加入正常血清、含药血清和100ug/ml的ANE,干预48小时后。MTT法检测细胞增殖,记录细胞的吸光度值(OD);ELISA法和免疫细胞化学检测培养细胞及上清液KI-67蛋白的表达;福尔根法检测DNA;Giemsa染色于油镜下计数细胞微核率(‰)。结果:(1)口腔黏膜成纤维细胞SP法染色胞浆内可见波形蛋白表达阳性。(2)ANE干预48h后FB平均光密度值明显高于A空白组,含药血清组OD值低于正常血清组。(3)经ANE干预的FB及上清液中KI-67含量高于空白组,而含药血清组中KI-67含量低于正常血清组,有显著差异(P0.05)。(4)ANE干预的FB细胞核NA、NP、NV值高于空白组,含药血清组低于正常血清组。(5)ANE干预的FB细胞中微核细胞率明显高于空白组,丹玄口康含药血清组细胞微核率低于正常血清组,并且含药血清高剂量组降低程度比含药血清低剂量组高。结论:1.100ug/ml的ANE促进口腔黏膜成纤维细胞增殖。2.丹玄口康含药血清可以拮抗ANE对FB的促增殖作用及KI-67的高表达。3.丹玄口康可以减少ANE诱导下的FB细胞的异形性,进而达到治疗OSF的目的。
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R285.5

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本文编号：2790127